[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
한국벡크만쿨터
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
BioLab 이은열 교수
전체보기 안전점검 LABox
 카테고리: 전체 > Immunology > Immunophenotyping
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
Omics Chemical biology Bioinformatics Laboratory Equipments
Buffer/Reagent Bioethics Etc.
카테고리 전체보기펼치기
질문/투표/프로토콜 등록
Q. 팩스 분석시 ctrl에 관한 질문
APC Mouse IgM, κ Isotype Ctrl Antibody FITC Mouse IgG1, κ Isotype Ctrl Antibody PerCP Mouse IgG1, κ Isotype Ctrl Antibody PE Mouse IgG1, κ Isotype Control BV510 Mouse IgG1, k Isotype Control BV421 Mouse IgG1, k Isotype Control  비 필수적 안티바디로써 facs 분석 시 cotrol로 사용 되어진다고 알고 있는데 ... 어떻게 control 로써 사용되어지는지 궁금합니다...  negative control로써  예를 들어 5마리의 혈액을 분석한다고 치면  5마리의 혈액중 하나의 혈액을 위의 항체로 염색하여 분석하는ㄱ ㅓㄹ까요 ㅠㅠ ................... 하나도 모르곘어요 ㅜㅠ 자세하게 ㅏㅇㄹ려주시면 감사하겟습니다ㅜ ㅜ ㅜ  
회원작성글 ekekekek  |  06.20
Q. facs 분석 시 lysis buffer 넣는 순서
whole blood를 이용하여 IPT 분석을 하는 프로토콜을 만들려고 합니다. 그런데 비장을 이용한 세포 분석 시에는 lysis buffer를 이용하여 적혈구를 용해시킨 후에 항체를 붙였는데 전혈 (whole blood)를 이용하여 팩스 분석을 하는 경우에 전혈에 바로 항체 염색을 한 후에 적혈구 용해를 하던데 이렇게 하는 이유가 있을까요 ㅜㅜ ? 항체같은 경우도 100ug당 1x10^6cell이 되게 염색하는게 좋다고 하던데 전혈을 바로 염색하게 되면 세포 수는 어떻게 측정해서 항체를 계산해서 염색하죠... 아무것도 모른다 생각하고 설명해주시면 감사하겠습니다 ㅠㅠㅠㅠㅠㅠ
회원작성글 ekekekek  |  06.07
Q. astrocyte, microglia
astrocyte 또는 microglia 같이, 뇌와 관련된 신경 또는 면역세포 연구에 관심 있는 석사생입니다. 질문은 다음과 같습니다. 1)astrocyte, microglia cell들은 굉장히 예민하여, culture 자체가 어렵다고 들었습니다. self activation이 일어나고, contaim에 예민하다는데... 다음과 같은 특징들이 왜 culture를 할때 힘든건지, 추가적으로 위의 cell들의 특이사항들을 알고 싶습니다.   2)astrocyte와 microglia cell line 추가적으로 marker들을 알고 싶습니다. 현재 정보 수집 중에 있는데 찾는게 쉽지 않네요 ㅠㅠ 3)위의 cell들 외에 뇌와 관련된, 실험에 용의한 cell이 있다면 추천 부탁드립니다. 저는 운동에 따른 위 cell들의 변화와 관련된 연구를 계획 중 입니다. 석사 신입생이라 아직 많이 부족합니다. astrocyte, microglia와 관련된 어떠한 조언이든 감사히 듣겠습니다! 
회원작성글 척척석사_  |  05.28
Q. PBMC 파는 회사 있나요?
안녕하세요 PBMC 사용한 실험을 해야하는데 직접 피에서 추출 하지 않고 미리 추출 된 PBMC를 파는 회사 없나요?  알고 계신 것 있으면 추천 좀 부탁 드립니다...
회원작성글 bluebird  |  03.30
Q. flow cytometry 분석 중 헷갈리는 부분이 있습니다ㅠ 도와주세요ㅠ
안녕하세요. flow cytometry 를 찍는 중 no stain과 sample 에서 분석이 어려워 도움을 받고자 글을 올립니다. 형광은 FITC, PE, Pacific blue, PE-Cy7, APC 총 5개이고 compensation을 모두 맞추었는데, (1) pacific blue 형광의 positive-negative 기준을 모르겠고, (2) 또 분석시 뿔이 생기는데 어떻게 없애야 할 지 모르겠습니다. (1) no stain sample (왼쪽), all stain sample (오른쪽), (FITC-Pacific Blue)  보시면 pacific blue 의 cluster가 두개로 나뉘는 것 같은데, no stain을 보면 저게 모두 pacific blue가 negative 한 것 같아요.. 이런 경우에 오른쪽 사진 중 FITC positive cluster 2개를 모두 pacific blue negative로 봐야 할까요? (2) no stain sample (왼쪽), all stain sample (오른쪽), (PE-Pacific Blue) 설명 오른쪽 사진에 뿔같이 대각선으로 길게 이어져 있습니다. 저는 저게 PE, Pacific blue negative 같고 빨간색 동그라미 부분이 Pacific blue positive 같은데 저 대각선 부분이 내려오면 PE cluster가 죽고, 대각선 부분은 올라가지도 않아 분리를 할 수가 없습니다. 이건 여러 형광에서 비슷하게 나타나는데 compensation으로 저걸 동그랗게 만들 수가 없어요ㅠㅠ 다른 실험(아래 사진)에서는 아예 저 부분이    이렇게 되어서 compensation을 맞추면 빨간 동그라미 부분 cluster가 죽어버리고 저 대각선 저거를 어떻게 할 수 가 없습니다... 저 부분이 PE, Pacific blue 둘다 positive 인 것 같지는 않은데요ㅠㅠ 저 부분은 어떻게 해야 없앨 수 있을까요?
회원작성글 Jii  |  2021.09.27
Q. Facs
facs staining때 single과 multi staining의 결과값이 차이가 날 수 있나요??
회원작성글 만듀  |  2021.09.24
Q. FACS 보정 방법
안녕하세요, FACS를 이용해서 마우스 혈액, 비장 에서 CD45-PE, CD3-FITC, CD19-PC5.5 항체를 붙여서 면역세포 분석을 하려고 합니다. 항체 2개만을 이용할때는 게이팅과 보정을 위해 3개의 Figure를 생성하였고  FSC-H/SSC-H, FSC-H/FSC-A, FIT-C-H/PC5.5-H로 구성하였습니다. 1. 그러면, 항체가 3개 이상일때는 보정을 위해서 어떤 X,Y 조합으로 figure를 생성해야 할까요? 특정 형광은 항상 X축에 사용되는 건가요? CD45-PE/CD3-FITC, CD3-FITC/CD19-PC5.5, CD19-PC5.5/CD45-PE 같이 세개 figure에서의 보정만 필요할까요? 2. 각 항체들은 FL1,2,3,4에 해당되는데, 이것은 무엇을 의미하나요? FL1에 해당되는 항체 두개는 보정에 필요한 figure에서 X Y값에 놓일 수 없는건가요?  3. 비장에서는 CD19-PC5.5가 붙어서 B세포가 확인되는데, 혈액세포에서는 보이지가 않아요. RBC lysis가 B세포에 유독 손상을 주는지, 혹은 CD19-PC5.5의 형광정도가 약해서인지 궁금합니다. 형광때문이라면 이것을 높이기 위해서 형광염색의 농도와 시간을 늘려야 하는지도 궁금해요. 경험있으신 분들의 조언 부탁드립니다. 감사드려요~~  
회원작성글 Ladybug  |  2021.08.16
Q. NK cell FACs marker
안녕하세요. 이번에 FACs를 처음 찍어보는 초짜입니다. 랩에서 이전에 NK cell은 찍은 경험이 없어서 제가 antibody를 짜보게 되었는데 이게 맞는지 확인받고 싶어 글쓰게 되었습니다. 1. CD3-NK1.1+ 2. CD49b+NK1.1+ 3. NKp49+NK1.1+ 이 순서로 하면 NK cell population을 확인할 수 있는건가요? 혹시 유의사항이 있다면 같이 알려주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 우에에엥  |  2021.03.04
Q. Draining lymph node위치
Spleen의 draining lymph node위치가 어떻게 될까요?
회원작성글 HANY  |  2021.02.06
Q. 0.01M sodium citrate pH 6.0 만드는 법과 역할
0.01M sodium citrate pH 6.0 만드는 법과 역할을 알려주세여ㅠㅠㅠ
회원작성글 yjyjyj  |  2021.01.15
Q. 마우스 spleen에서 Treg 세포 분석
실험실에서 처음 면역세포 분석을 하게 되서 질문을 남깁니다. 가장 많이 연구된 비장을 가지고 먼저 테스트 해보려고하는데 먼저 저희는 CD4, CD8, CD19와 같은 기본적은 surface 마커들은 분석이 되는데 Foxp3, IL-17와 같이 intracellualr 마커들에 분석이 여러서 질문합니다.   많은 논문들을 참고해서 아래와같이 분석을 진행했습니다. WT 마우스 비장을 single cell로 분리해서 RBC lysis시킨 후 cell stimulation cocktali(PMA, inomycin, brefelin A)을 넣고 4시간 배양시킨 후 intracellualr staining 키트 방법 그대로 염색을 해서 FACS 분석을 했는데 전혀 발현이 되지 않습니다.   실험방법에 문제가 있는건가 싶어서 TNF-a도 함께 진행했는데 TNF-a는 발현이 제대로 나왔습니다.   제 방법에 문제가 있는건지 아니면 Treg, Th17 세포를 보려면 꼭 분화를 시켜서 봐야하는지 궁금해서 질문남깁니다.   너무 기초적인 질문이라 부끄럽지만 고수분들께 도움을 받고 싶습니다~~  
회원작성글 sskr1207  |  2020.11.13
Q. 유세포분석 결과 해석 질문드립니다. (Area vs Height)
저는 특정 세포로 분화시키는 실험을 진행하고있는데 분석은 유세포분석법으로 특정 세포로 얼마나 분화시켰는지 확인합니다.  여기서 x축 parameter를 특정 채널의 height로 읽어야하는데 area로 읽어야하는지 정확한 해석법을 요청드립니다. 
회원작성글 꼬꼬와톡  |  2020.07.07
Q. HPV의 변이 원인
HPV에 관해 조사하다가 의문이 생겼습니다. HPV(인유두종바이러스)는 DNA 바이러스입니다. 그런데 조사 결과 현재 228종류의 아형(subtype)이 존재한다고 합니다. 코로나 바이러스는 RNA 바이러스인데, 그것보다 변이가 적은 것 같습니다. DNA 바이러스인 HPV의 변이가 RNA 바이러스보다 많은 이유가 무엇인가요? 그리고, HPV의 분류는 L1 단백질의 차이에 의해 결정된다고 알고 있습니다. 보다 근본적으로, HPV의 변이 원인이 무엇인가요?(그냥 환경에 적응한 결과인가요?)
회원작성글 김콩콩이  |  2020.06.24
Q. Flowcytometry 할때 항상 cell number 맞춰 찍어야하나요?
요약하면 질문은 두가지입니다. 1. cell number를 꼭 동일하게 맞춰야할까요? 2. 선생님들께서는 실험하실때 늘, 일일히 cell number를 count하시나요? ------------------------------------------------------------------ flow cytometry 세팅하시던 분이 계셨는데.. 나가셔서 자문구할곳이 없어 이렇게 글 남깁니다. 그 분께서 알려주신대로 루틴하게 cell number=10^6, titer는 대략 1:100~1:200 을 사용했습니다. 그러다가 이제서야 Ab sheet를 자세히 보게됐는데 의문이 생겼습니다.   10^6 이라고 제시된 sheet도 있지만, 10^5~10^8 이라고 광범위(?)하게 나온 sheet도 있었습니다..   물론 면역학을 배울때 Ag-Ab 비율이 적당해야 'equivalence '라 최고 효율을 나타낸다고 배워서 titer가 중요한건 이론상으론 알겠는데, 10^5~10^8 은 range가 큰 것이 아닌가, 혹시 실전에서는 equivalence는 큰 영향을 미치지 않는것인가 하는 생각이 들었습니다.   mouse실험을 할때 주로 flow cytometry 분석을 하고있는데요 peritoneal cell 같은 경우는 지금까지 10^5~10^8 안에 들어왔습니다. 그러면 굳이 매번 counting 없이, isolation한 cell을 그대로 staining 진행해도 될까요? cell counting 하는데 시간이 많이 지체돼서, 혹시 굳이 counting을 안해도 된다면 시간단축을 할 수 있지 않을까 싶었습니다.   선생님들께서는 매 실험마다 counting을 하셔서 수를 맞추는지 궁금합니다.  
회원작성글 아바라  |  2020.05.10
Q. pancreatic lymphnode 분리
약물 처리 후 NOD 마우스의 pancreatic lymph node에서 cytokine 변화나 FACS로 면역세포들의 분석을 하고자 합니다. 한번도 해보지 않은 실험이여서, pancreatic lymph node 적출부터 난관이네요. spleen을 당겨서 췌장을 보면, 췌장 끝 부분에 lymph node가 하나 보이던데, 이 lymphnode 하나만 분리하면 RNA isolation(qPCR용)이나 혹은 FACS 분석을 위한 세포수가 충분히 나오는지 궁금합니다. 아니면 같은 그룹의 pancreatic lymphnode를 pooling 하여 실험을 해야 한다면, 몇마리 정도(몇개의 lymphnode)가 필요한지 알려주시면 감사하겠습니다. 인터넷에 아무리 찾아도 마우스당 몇개의 pancreatic lymphnode가 있는지, 어디에 위치하고 있는지 나오지 않아서 이렇게 글을 올립니다.
회원작성글 대학원생  |  2020.04.08
Q. BMT 후 확인 방법
안녕하세요? donor의 bone marrow가 recipient로 transplantation 후 적절하게 들어갔는지와 얼마나 분화되었는지 알고자 합니다. 어떤 방법이 있을까요? 참고로 XY 치환 방법은 사용할 수 없습니다.
회원작성글 mystery  |  2019.10.28
Q. 실험용 동물 혈액 구입 관련 해서요~
실험 중에 사람혈액으로 실험을 진행하기에는 무리가 있어   동물 혈액을 구입하여 연구를 진행하고 싶은데요. (platelet분리 적혈구 분리등)   회당 500ml 이상 동물혈액을 지속적으로 얻을 수 있는 방법이나 판매처가 있을까요?   일반적인 판매처에서 파는 양으로 턱없이 부족한것 같아서요~
회원작성글 매케이  |  2019.08.21
Q. 바이러스 확인방법
잎새버섯을 재배하고 있습니다 재배 방법을 연구하여 기존방법과 다른 새로운 잎새버섯재배 방법을 개발하여 잎새버섯을 생산하게 되었는데 비염은 먹는 즉시 목에있는가래가 삭가시고 비염이 상당히 좋아지고 포진 바이러스 진물은 버섯을 바르는 즉시 진물이 없어지고 그대로 낫습니다 이것을 증명해야되는데 시험기관 의뢰방법이나 또 좋은접근방법중 부탁드립니다
회원작성글 잎새버섯  |  2019.07.28
Q. B16-ova
B16-ova 를 인식하는 T는 tumor를 인식하나요 OVA sequence를 인식하나요
회원작성글 쩜념  |  2019.07.19
Q. PDA배지 곰팡이균
천연추출물의 여드름균에 대한 항균성이 있는지 검증하는 실험을 하고 싶은데 여드름균이 곰팡이균에 속하니까PDA 배지를 사용하여 곰팡이균을 배양하고 추출물을 덧바르면 되나요?
회원작성글 셈셈셈  |  2018.10.22
이전  1 02 03  다음
실험 회원 등급이란?
실험Q&A 회원등급안내
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
진스크립트 광고