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BioLab 이은열 교수
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 카테고리: 전체 > Immunology > Immunocytochemistry
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
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Q. 돼지피에 ABO형 시약을 처리한다면 응집될까요?
돼지피는 혈액형이 인간보다 많은 걸로 알고있는데 ABO시약을 돼지피에 넣는다면 하나라도 응집되는게 있을까요? RH+,- 여부도 알고싶네요
회원작성글 흔한수시러  |  08.06
Q. CD3를 없애주었는데 분화6일 째에 생겼습니다...?
   CB에서 CD3를 아웃시켜주었습니다 분화 6일차에 CD56 값은 증가하였는데 웬 CD3가 생겨났어요 ㅠㅠ.. 실험 고찰을 적어야하는데 왜인지 감이 안잡힙니다 도와주세요 ㅠ.ㅠ
회원작성글 카리나  |  08.03
Q. cell saturation
K562로 NK92 cytotoxicity calcein assay 했는데요   NK 효율 평균치 계산해보니 E:T ratio 10:1 = 90.8 5:1 = 88.6 2.5:1 = 76.8   이렇게 나왔는데 사수선배가 값을 보니 saturation된걸 알 수 있다는데 그게 무슨 말인거죵...? 그리고 10:1과 5:1 데이터 값이 별로 차이가 없다는건 NK가 자신의 역할을 다해서라는데 그건 또 무슨 말이죠 ㅠㅠ.ㅎ   당장 질문하고싶은데 자리에 안계시고 이제 주말이라 궁금해서 브릭에 올려봅니다ㅠㅠ 
회원작성글 카리나  |  07.15
Q. transfection 할때 chemical 처리
보통 transfection하고 난 뒤에 media change를 해줄 때 chemical을 처리하나요? chemical 을 먼저처리하고 transfection을 하나요
회원작성글 연근싫다  |  06.06
Q. Confocal dish 사용법을 모르겠어요
안녕하세요 세포를 Confocal dish에 배양을 해서 Confocal을 찍으려고 합니다. 논문에서 Protocol을 보고 배우는 중인데 Confocal dish를 사용하면 coverslip으로 안덮고 찍으면 되는건가요??? PFA로 고정 후 DAPI 처리 후 그냥 찍으면 되는건가요??
회원작성글 쩝쩝석사과정  |  05.20
Q. IHC-P dab 염색 질문 첨부파일
파라핀 섹션으로 dab staining 을 하는데요~ 첨부사진과 같이 얼룩이 나타나는 현상이 있습니다. 처음에는 signal 인줄 알았는데, control tumor 조직이나 약물처리 tumor 조직이나 antigen retrieval 을 하나 안 하나 안티바디의 종류에 상관없이 무작위로 나타났다가 없다가 하더라구요.  wash 문제같기도 한데 똑같은 날 똑같은 tissue, 똑같은 protocol 로 염색을 해보면 2장중에 1장은 저런게 나타나는 경우가 자주 있습니다. 혹시 이유를 아시거나 이 문제를 해결하기 위해서 조언을 부탁드리겠습니다. 저만 이런 상황을 겪은건지도 궁금하네요
회원작성글 철철대왕  |  05.12
Q. 조직염색 커버글라스 씌운후에
현미경 확인을 했는데 염색이 많이 씻긴건지 시간이 충분하지 않았는지 확신할 순 없지만 염색이 제대로 되지않았습니다.. 자일렌에 담궈서 마운팅 미디엄 녹여서 커버글라스 제거하고 다시 염색이 가능할까요? 콩고레드염색을 진행했고, 카운터스테이닝은 헤마톡실린으로 진행했습니다ㅠ
회원작성글 오제이  |  05.03
Q. Anti Pd-l1이 pd-l1과 결합할때 화학적원리나 화학적현상을 알고 싶어요
면역항암제인 키트루다 ,옵디모 처럼 anti PD-L1이 PD-L1에 결합할 때의 화학적 원리가 궁금해요  반대로 anti PD-1이 PD-1에 결합할 때의 적용돤 화학적인 이론들을 알고 싶어요 보고서 작성하려고 자료조사하는데 어려워서 도와주세용!! 추가로 anti pd-l1이 결합할때 염이 생성되는 것도 확실하게 이해를 못해서 이와 관련하여 아시는 분이 계시다면 무지한 저에게 큰 가르침을 주시길 바랍니다,,  
회원작성글 오르가노  |  01.06
Q. Mouse xenograft cancer model 에 matrigel 을 사용시 조직 collagen 염색에는 문제가 없나요?
안녕하세요? Mouse cancer xenograft model 을 연구중인데요. Cancer cell injection 시 matrigel 을 이용해서 model을 만들고 있습니다. 이번에 cancer 조직에서 collagen 이나 tissue connective molecule들을 염색해서 보려는데 matrigel이 collagen IV와 laminin 이라는 성분으로 이루어져있다고 해서요. 물론 1주일 뒤면 없어진다고 해도 종양이 형성되면서 종양내에 collagen에 영향이 있지는 않을까 해서 여쭤봅니다. 혹시 sirius red나 trichrome 염색에서 matrigel 에 영향이 없을지 궁금해서요. 혹시 아시는분이 있다면 알려주세요.
회원작성글 tunahead  |  2021.11.29
Q. Immunohistochemistry 관련
안녕하세요 IHC 실험 중 궁금한게 있어 글을 남기게 되었습니다. 저는 rabbit에서 autophagy를 확인하려고 하는데 antibody가 대부분 rabbit poly나 rabbit mono더라구요. 그래서 protein blocking을 하고 해보려고 했습니다. 10% FBS로 30 min blocking, 3% BSA로 30 min blocking 이렇게 두가지 방법으로 해보았는데 blocking이 잘 되지 않아서요.. 고수님들 혹시 방법이 있을까요..? 알려주시면 감사하겠습니다.. 아니면 혹시 rabbit에서 가능한 LC3와 p62 antibody가 있다면 알려주시면 감사하겠습니다..
회원작성글 wlsgur524  |  2021.11.23
Q. 마운팅 별에별짓을해도 기포가 안빠집니다.. Mounting Permount 마운팅 첨부파일
별에 별짓을 해봐도 기포가 안빠집니다 살려주세요 푸ㅠㅜ 퍼마운트가 문제인건가요??  슬라이드에 커버도 세밀하게 하고 기포도 다빠진거같다 생각했는데 현미경으로 보면 이렇게 보입니다 그리고 조직 바깥쪽부분이 제일 많이있어요.. 어떻게해야할까요 푸ㅠㅜㅠㅜㅠ
회원작성글 살려줏세여  |  2021.10.13
Q. immunofluorescence 궁금한 점 여쭤봅니다ㅠㅠ 첨부파일
 rabbit anti-chmp4c 2차 항체로 goat anti-rabbit cy5와 donkey anti-rabbit 405와 goat anti-rabit 488중 무엇을 쓸 수 있나요..? 무엇을 언제 써야하는지와 이유를 잘 모르겠습니다ㅠㅠ 세시간째 알아보는 중인데 답을 구하지 못하겠습니다..
회원작성글 장추벌레  |  2021.10.04
Q. immunocytochemistry 2차 항체 질문 드립니다.
  1차 항체로 mouse anti-GAPDH가 쓰인 경우 2차 항체로서 goat anti-mouse Alexa488과 donkey anti-mouse Dylight405모두 사용할 수 있나요?    
회원작성글 장추벌레  |  2021.10.04
Q. TUNEL 에서 incubation 하는 이유
TUNEL staining 에서 고정된 샘플에 label 과 enzyme을 붙이고 incubation 하잖아요, 이때 염색약이 잘 붙는 온도가 incubation 온도에서 잘 붙고 결과적으로 형광을 잘 띄기 때문에 incubation 하는 건가요?  왜 RT에 두지 않고 incubation 하는 이유가 궁금하네요 고정한 세포이기 때문에 incubation 온도 영향이 세포에 미치진 않을 것 같은데...
회원작성글 리차드파커  |  2021.09.26
Q. CD3 IHC 조직 질문
  안녕하세요.  immunology 연구를 시작한지 얼마 되지 않아 궁금증이 있어 질문글을 올립니다. CD3 IHC 조직을 보는 중 CD3의 발현이 원형을 기준으로 되는것을 계속 볼 수 가 있는데, 저 원형을 기준으로 발현이 되는 이유가 무엇인지 알 수 있을까요?   
회원작성글 Heather  |  2021.09.04
Q. FACS Sample fixation 관련해서 궁금한 것이 있습니다.
이번에 lymphocyte 와 splenocyte 에서 intracellular cytokine staining을 진행하게 되었는데요,보고자하는게 여러가지라, fixation 을 하고 여러가지를 분석해봐야할거 같아요. fix& perm후 surface staining 과 intracellular cytokine 을 보려하는데, fix 후 4도에서 얼마나 샘플들이 괜찮을까요? 또한 프로토콜들을 보니 surface staining 을 fix 전에 하길 추천하던데, fix 하고 해도 괜찮은지 궁금합니다.
회원작성글 아이고야  |  2021.09.02
Q. Antibody 선정 질문좀 드릴게요
제가 Raw 264.7 macrophage cell line을 염색하고자 합니다. 2가지 target protein에 대해서 염색을 하려고 하는데요, 이 경우 서로 다른 2종의 anti-target protein antibody를 선정해서 서로 다른 파장때의 2차 antibody를 쓰면 되는걸로 알고 있습니다.   제가 궁금한 점은 지금부터인데요. Raw 264.7 은 Mus musculus 종인데요,  쥐속에 속하는 동물종이더라고요. 근데 문헌들을 참고했을 때 대부분  서로다른 protein A, B에 대해 mouse와 rabbit 의 다른 종의 1차 antibody를 골라 실험을 했더라고요. 제가 궁금한점은, Raw264.7 이 쥐에서 유래한 세포인데, 1차 antibody도 host가 mouse 인걸로 사용해도 반응하는건가요?   제가 알기로는 reactivity와 host species는 달라야 한다고 알고 있습니다. Mus musculus와 mouse는 다른 동물종일까요?
회원작성글 시작임님  |  2021.07.28
Q. 면역염색 제발 도와주세요
안녕하세요 면역염색을 처음하는 학생입니다. 면역염색 기본 프로토콜+키트 프로토콜을 따라하고 있는데 전혀 결과가 안나와서 질문드립니다. 먼저 저는 파라핀 블럭의 쥐 귀조직을 이용한 면역염색을 하고 있습니다 Q1.antigen retrival과정에서 저는 10x citrate acid sigma꺼를 1x로 희석해서 사용하고 있습니다. 전자레인지를 이용하는데 기본 프로토콜을 보면 5분정도 미리 끓여놓고 나머지 10분동안 슬라이드를 넣고 끓인 후 30분 실온에서 식히라고 써있습니다. 저희 전자레인지는 w를 조절하는게 없는 일반 전자레인지인데 용액을 넣고 1분 30초를 돌리면 용액이 폭발하듯이 끓어서 넘쳐버려서 거기서 멈추고  슬라이드를 넣고 중간중간 열어 용액을 보충하면서 돌렸는데 완전 폭발하듯이 넘쳐서 3분30초만 돌렸더니  조직이 다 없어져버렸습니다.. 뭐가 문제일까요..? 용액을 돌릴때 뚜껑을 닫아서도 해보고 열어서도 해봤는데 폭발하듯이 용액이 넘치는 건 똑같습니다. 저는 유리 coplin jar를 이용해서 하는데 플라스틱이 아닌게 문제일까요? 기본과정 시간을 조절하려고 하는데 꼭 보글보글 끓는 정도까지 돌려야되나요?? 이 과정이 중요한 역할을 하는 건가요??폭발하듯이 넘치는 과정에서 조직이 떨어진 거 같습니다... Q2.citrate acid 용액이 오기 전에는 0.05% trypsin in pbs를 사용했는데 결과적으로 dab염색이 안되더라고요 그래서 용액을 주문한건데 항원부활과정에서 조직이 사라져 아예 다음 과정을 나아갈 수 없습니다. 0.05% trypsin in pbs는 용액을 jar에 넣고 끓기 전까지만 돌린 후 슬라이드를 넣고 37도의 oven에서 30분간 넣어 둔 뒤 다음 과정을 진행했습니다.   사수도 없고 이 실험실에서 처음하는 거라 누구한테 여쭤볼 사람도 없습니다.. 고수님들 제발 도와주세요ㅜㅜ    
회원작성글 ain  |  2021.07.21
Q. cell staining 시 DAPI+ FITC+phalloidin
한 셀에서 발현하는 두가지 종류의 유전자를 염색하고싶습니다. 다피는 기본으로 보고 비교하려는 유전자 두개를 그린과 레ㅔ드로 보려고하는데 한개는 FITC, 다른 하나는 phalloidin 으로 보려고 합니다 10% 포르말린으로 고정시키고ㅗ 염색 시킨후에 다피마운팅 솔류션으로  마운팅예정입니다. 중간에 염색과정을 좀 알려주시며 ㄴ감사하겠습니다
회원작성글 뿌압뿌양빠앙  |  2021.03.29
Q. 피톤치드 같은 물질이 항바이러스역할도 할까요?
피톤치드가 자연 향균물질이라고 알고 있는데 그러한 자연 향균물질이 코로나바이러스에도 효과가 있을까요? 효과가 있다면 잔연 향균물질 이용해서 코로나바이러스 대항해서 손세정제나 스프레이만들어보려고 해요
회원작성글 생0  |  2021.03.11
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