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BioLab 이은열 교수
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 카테고리: 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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Q. 고체배지가 말랑거리는 이유
그 전이랑 똑같이 만들었고 잘 굳은 걸 확인하고 사용하는데 streaking 할 때 찢어지는 것도 아니고 약한 힘에 뭉개집니다. 왜 그럴까요? (냉장 보관)
회원작성글 ytaek  |  09.29
Q. monoclonal protocol 질문드립니다!
안녕하세요. 현재 mococlonal antibody 얻는 과정 실험 중입니다. fusion 후 96well ELISA Screening까지 했습니다. 문제는 그 다음 과정을 보여주실때 다른 프로젝트와 뒤죽박죽 보여주셔서 과정자체의 순서와 그 내용 또한 뒤죽박죽으로 기억이 납니다..ㅠ 혹시 비슷한 실험하시는 분.. protocol 알려주실 수 있을까요..??
회원작성글 기러기토마토  |  09.29
Q. TBHQ(삼차 뷰틸하이드로퀴논)적정량
TBHQ(삼차 뷰틸하이드로퀴논)에 대한 농도별 MTT assay를 진행 하려는 데요, 음료 속에 들어가는 TBHQ의 적정량이 얼마 인가요?
회원작성글 히힛헷  |  09.29
Q. 식중독균
병원성 미생물 Shigella - MAC 배지 Yersina enterocolitica - CIN 배지 Clostridium perfrigens - BAP배지 B.cereus - MYP 배지 에서 어떻게 자라는지 사진을 찾아보는데 안나와서 문제입니다.. 혹시 사진같은게 있으면 도와주세요.
회원작성글 ytaek  |  09.27
Q. Hela cell 에 이상한게 보여요..
안녕하세요 저는 Hela cell을 키우는데요 갑자기 cell에 이상한게 보입니다.. 실험실 친구들도 처음보는거라고 하던데 뭔지 아시는 분 있나요? subcultre 을 3 dish로 했는데 그 중 1 dish에서만 보입니다.. 주변 cell이 떨어지거나 죽지 않는 거 보면 컨탐은 아닌것같으면서도 너무 이상하게 생겨서 찜찜하네요..  cell이랑은 위치가 달라서 저 이상한거에 초점맞추면 cell이 초점이 안 맞아서 사진상으로는 저렇게 보입니다. dish 보면 육안으로도 뭔가 뭉쳐져 있어요.
회원작성글 쥐팤  |  09.27
Q. L929 cell 성장 형상 문의 첨부파일
세포독성 시험 도중 용출물로 교체해주고 나서 2일 후 세포 계수를 위해 현미경으로 확인했을 때 L929 cell의 성장한 형태가 아무 규칙 없이 무작위로 빽빽하게 자라는 control과 다르게 약간 벌집처럼 모양을 잡고 뭉쳐 자라있어서 혹시 어떤 경우에 해당 모양처럼 자라는지 아시는 분이 있을까 해서 올립니다.
회원작성글 demiann  |  09.26
Q. 유산균 배양
안녕하세요, 현재 원하는 플라스미드를 넣기 위해 L.plantarum (유산균) competent cell을 만들고 있습니다. OD값을 바꾸거나, electroporation 조건을 바꾸거나 여러가지 시도를 해보았으나 콜로니가 안떠서 답답한 마음에 질문 올립니다. 대부분의 프로토콜 상에서 buffer에 KH2PO4가 들어가길래 주문해서 buffer 조성도 바꿔볼 예정입니다.   혹시 유산균 competent cell을 만들어보셨거나, L.plantarum 다뤄보신 분 있으시면 프로토콜 공유해주시면 감사하겠습니다.. +electroporation 조건도 함께 공유해주시면 계신 곳으로 절하겠습니다...
회원작성글 슴비  |  09.26
Q. CD4 t cell activation에서 왜 plate bound anti-CD3e를 사용하는건가요?
실험하다가 궁금해서 질문 드립니다! CD4 t cell가지고 실험하고 있는데 activation이나 differentiation을 할 때 보통 anti-CD3e는 plate bound를 사용하고 anti-CD28은 soluble한 것을 사용하는데 왜 그런 건가요? Soluble한 anti-CD3e를 잘 사용하지 않는 이유라도 있는건가요?
회원작성글 ㅡ,ㅡ;;  |  09.26
Q. cell culture에 HEPES가 꼭 필요한가요?
세포은행에서 세포를 분양받아 키우고 있습니다. 세포은행의 culture method에는 HEPES가 포함되어있던데 제가 사용하는 배지에는 HEPES가 없습니다. 찾아보니 HEPES가 있으면 CO2 incubator가 아니어도 키울 수 있는 것 같더라구요 저는 CO2 incubator에서 키우고 있습니다. 그러면 HEPES가 세포가 자라는데에 큰 문제는 없나요? 혹시 필요하다면 배지에 따로 첨가해서 사용하면 될까요?   그리고 세포은행의 Saos2 세포가 검색하면 두 가지가 나옵니다. 그런데 이름은 똑같습니다. origin의 차이가 조금 있나 싶은데 우선 culture method가 다릅니다. 혹시 이 두 세포가 어떻게 다른지 아시나요..?
회원작성글 차몬드  |  09.24
Q. HaCaT cell을 분양 요청
안녕하세요 최근 피부 관련 실험을 하면서 HaCaT cell을 구매 하려하는데 국내에서는 구매 할 수가 없어서요  혹시 HaCaT cell을 가지고 계시면 분양 가능할까요? kibumsy@gmail.com으로 회신 부탁드립니다.  감사합니다.!!
회원작성글 비타민큐  |  09.23
Q. dg18배지 콜로니카운트 관련 질문있습니다 첨부파일
여기서 검은색이 있는 13개정도가 콜로니이고 나머지는 기포인건가요?
회원작성글 메로나99  |  09.23
Q. 35π에 seeding할 cell 수 계산이 가능한가요?
평소에는 35π dish, 2~2.5 x 10^5 seeding → O/N incubation(1일) → transfection 의 순서로 실험을 진행하였습니다.   그런데 이번에는 1일 O/N으로 incubation하던 것을 2일 동안 incubation하여 실험을 진행하고자 하는데요. transfection할 때 dish에 깔린 cell 수를 비슷하게 하려면 2일 incubation할 때는 처음 seeding을 얼마나 해야할지 고민이라 질문드립니다...   경험에서 비롯된 조언이나 cell 분열 속도를 가지고 역으로 seeding할 cell 수를 계산할 수 있는지 궁금합니다! cell은 bovine aortic endothelial cell(BAEC)을 사용하였습니다.
회원작성글 가우미  |  09.23
Q. C2C12 cell culture 분화 유도 확인 (사진) 첨부파일
c2c12 cell 양만 불리면서 유지하려고 키우는 중인데, high density로 키운 것 같아서 분화가 유도 된 건지 확인해봐야 할 것 같은데, 눈으로는 크게 잘 모르겠습니다.. 아래 사진 첨부하겠습니다 density (confluence) 별로 다양하게 찍어봤습니다
회원작성글 mintim99  |  09.23
Q. Raw264.7 물질처리 9시간 후 이상반응 문의 첨부파일
안녕하세요. Raw264.7 세포를 이용하여 생존율 확인하는 중  0.1ug/ml 농도로 물질처리 9시간 후 세포의 형태가 이상하여 질문드립니다. 48well plate 에 5x10^4 로 계산하여 seeding 하였고, 0.1, 1, 10 ug/ml 농도별 3반복씩 물질처리 하였습니다. 9시간 후 현미경 관찰 시 0.1ug/ml 농도 처리 3반복 well만 첨부한 사진처럼 변했습니다. 똑같은 plate가 하나 더 있었는데 그 plate 상 0.1ug/ml well은 멀쩡했구요.. 사진의 핵?막?같은건 뭐라고 판단하시나요.. 오염된걸까요..?    
회원작성글 펩시라임  |  09.22
Q. C2C12 cell culture confluency
안녕하세요. C2C12 cell을 저번주 금요일에 thawing down 해서 이틀 후에 확인하여 90% 정도 confluency가 찼을 때 split을 하고(vial은 안 만듦) 다시 이틀 후에 15cm dish로 subculture를 했는데 그 때는 처음보다 confluency가 더 많이 차 있었습니다.  제가 이 세포의 doubling time을 착각해서 confluency 가 너무 많이 찼을 때 계대를 했는데, 이미 분화가 시작 되어서 이 세포로 실험을 진행하지 못할까요..? 그동안 만들어둔 vial도 이제 분화 및 추출처리 실험에 사용하지 못하는 건가요?ㅠㅠ 그리고 differentiation 유도가 된지 안된지 잘 모르겠는데, 단순히 morphology 만 보고 알 수 있는건가요? 귀한 세포인데 큰 실수를 한것같아서 너무 조마조마합니다. c2c12 cell에 관한 자세한 조언 등등 부탁드립니다. 감사합니다.
회원작성글 mintim99  |  09.22
Q. antibiotics selection 시 media
G418 항생제를 통해 selection test를 해보려고 합니다. media에 G418을 농도에 맞게 넣은뒤 cell에 처리한다고 하는데 이때 ampicillin이 없는 FBS만 포함된 media를 사용해야하나요?? 아니면 ampicillin이 포함되어 있어도 상관없나요??
회원작성글 빙글뱅글  |  09.22
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