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BioLab 박소정 교수
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Q. 처리 물질 적정 농도 구하기
세포실험시 특정 range에서 세포독성이 없다는 것을 MTT assay를 통해 안 후 다음 step으로 처리 물질의 적정 농도를 어떻게 구해야하나요?
회원작성글 SoliDeo  |  12.06
Q. SDA 배지 조성 관련 질문 있습니다
SDA 배지 조성에 대해 찾아 보니 어떤 곳에서는 dextrose, peptone, distilled water가 , 어떤 곳에서는 Peptic digestion of animal tissues와 Pancreatic casein digestion이 있다고 하는데 배지 제조사별로 조성이 다른 건가요?
회원작성글 dpdrmfjffl..  |  11.30
Q. 피부건강(건기식) 양성대조군 Hyaluronic acid 도움요청드립니다.
안녕하세요 브릭 선생님들 :) 피부건강(건기식) 양성대조군 Hyaluronic acid (히알루론산) 도움요청드립니다.   식약처 가이드 피부건강 주름/보습에서 히알루론산[주름(개별인정),보습(고시형)]인 것을 확인하여 건기식 목표 In vitro, In vivo 모델에서 히알루론산을 Positive control(양성 대조군)로 걸고 실험을 진행해보려고 합니다.   피부건강 히알루론산 실험 선행논문을 찾아 시약을 구매하려고 하는데 제 Searching 능력이 부족해서 히알루론산 선행논문을 찾기에 어려움을 갖고 있습니다.  제가 찾았던 논문들은 히알루론산을 구매한 것 보단 직접 생산했던 논문들이 많았고, 히알루론산을 구매하려고 직접 시약들을 알아보니 MW에 따른 판매가 너무 다양해서 피부세포 양성대조군으로 어떤 MW를 구매해서 실험을 진행할지 어려움을 겪고 있습니다.   혹시, 피부건강 실험을 진행하면서 히알루론산을 구매해서 사용하신 경험이 있거나, 알고 계신 논문이 있다면 지혜를 구하고 싶습니다. 도움을 주신분께 스타벅스 기프티콘을 꼭 사례드리겠습니다. 미리감사드립니다!!   [참고했던 선행논문들입니다] Hyaluronan oligosaccharides promote excisional wound healing through enhanced angiogenesis. Preparation and Characterization of Hyaluronan Oligosaccharides for Angiogenesis Study. Bioactive reagents used in mesotherapy for skin rejuvenation in vivo induce diverse physiological processes in human skin fibroblasts in vitro – a pilot study.
회원작성글 꿈많은청년  |  11.26
Q. 피부주름 AP-1, MMP-1 관련 질문드리고 싶습니다
안녕하세요 선생님들 HaCaT Cell에 UVB를 처리하여 피부주름 실험을 진행하는 꿈많은 대학원생입니다.   피부주름 실험을 하면서  UVB를 처리한 세포에 제가 처리하는 추출물 A를 처리했을 때 Western 실험과 Luciferase실험을 통해 MMP-1 발현 및 MMP-1 transactivation Level 감소량을 확인했습니다   AP-1 관련 확인하기위해서 UVB를 처리한 세포에 제가 처리하는 추출물 A를 처리했을 때 AP-1 Transactivation(Luciferase)과 p-c-Fos, p-c-Jun Western Level에선 샘플 처리군에서 증가했습니다..   MMP-1관련 인자는 줄이는데, AP-1 관련인자를 증가시키는 데이터를 앞에두고 논문을 찾고 공부를 하고있지만 뾰족한 해결책이 보이지 않아, 브릭 선생님들의 지혜를 구하고자 글을 작성하게 되었습니다.   미리 감사드립니다. 꼭 지혜를 나눠주세요!!
회원작성글 꿈많은청년  |  11.25
Q. 질소탱크 질소 부족
저는 질소탱크에 질소가 18센티정도이면 충전을 하는데 확인하는 기간이 길어져서 ㅜㅜ 질소가 7센티 남았거든요 ㅜㅜ 그럼 질소에 안담겨있던 셀들은 다 죽었을까요?ㅜㅜ 
회원작성글 oneday  |  11.25
Q. 엔도톡신 회수율 관련 질문드립니다.
엔도 회수율이 적게 나오는 몇가지 이유가 있을까요?
회원작성글 루루리랄라  |  11.23
Q. BAY 11-7082 작용 기전
안녕하세요..... 실험 초보입니다....... 제가 일전에도 BAY 11-7082의 구체적인 작용기전을 물어봤었는데........... 명확한 답을 얻지 못해서요....................... 대답해주신 분께서 BAY 11-7082가 IkB-alpha의 인산화를 억제하며 인산화의 억제는 상류의 kinase와 결합한다고 말씀해주셨는데 여기까지는 BAY 11-7082가 IKK와 결합해서 IkB의 인산화를 억제하여 결국엔 NF-kB 이합체가 분리가 안 돼서 억제되는 건 알겠는데요......... 조금 더 구체적으로 나아가서 IKK 구조의 어느 부분에 BAY 11-7082가 binding 된다던지의 그런 좀 deep한 부분을 알아야 해서요...... 암만 찾아봐도 안 나오는 것 같아서요 ㅜ 아시는 분은 부탁드려요....
회원작성글 남홀  |  11.21
Q. FACS 분석 의뢰 할 수 있는 외부 업체 소개 좀 해주실 수 있으신가요?
FACS 분석 의뢰 할 수 있는 외부 업체 소개 좀 해주실 수 있으신가요?   FACS 장비가 없어서 외부 업체에 의뢰를 맡기려고 하는데 업체 소개 해주실 선생님 계신가요~?
회원작성글 CLAS연구원  |  11.21
Q. RPMI media 찌꺼기 첨부파일
FBS 10%와 P/S 1%를 넣은 complete media를 사용 중입니다. 오늘 media를 확인해보니 하얀색 작은 찌꺼기가 떠다니는 것을 확인하였습니다. 현미경으로 관찰해보니 사진과 같이 보였습니다. Media를 사용할때 항상 새 pipette aid tip을 넣어 사용하거나 tube에 덜어서 사용하는데 혹시 contamination이 일어난걸까요? 최근들어 RPMI Media로 배양 중인 cell의 성장 속도가 느려지긴 했습니다.
회원작성글 나굴  |  11.20
Q. Firefly luciferase의 재반응(?) 이 가능한가요 ??
 안녕하세요, 추워지는 날씨에도 불철주야 연구하시느라 고생이 많으십니다.  저희 연구실에서 수산생물에 대하여 luminescence를 활용한 in vivo imaging을 셋업하고 있는데요, Luciferase를 발현하는 vector를 injection한 후 3일정도 후에 D-luciferin을 접종해서 imaging을 하고자 했습니다.    그런데 예상과는 다르게 imaging이 잘 안되어서요.. Substrate의 농도설정, 투여경로등 다양한 변수들이 있겠지만 정말로 luciferase의 발현이 안되는지 or imaging protocol의 변경이 필요한지 확인하고 싶습니다.    그래서 해당 Luc2 expressing vector가 접종된 생물의 tissue homogenate를 사용해서 Luciferase assay를 해서 발현여부를 확인하면 어떨까? 하는 생각이 들었습니다. 여기서 제가 궁금한 점은 이미 Substrate와 반응한 luciferase가 새로운 substrate를 만나도 luminescence가 발광될까?? 하는 의문이 들었습니다.   luciferase가 substrate와의 재반응이 가능한가요 ?? 
회원작성글 Anchovy  |  11.19
Q. cell seeding 계산법
안녕하세요. 이번에 실험실 들어간 완전 쌩초보입니다 다름이 아니라 cell counting 후 seeding 계산법을 모르겠어서요..   셀 펠렛을 4ml의 배지로 풀어준 후  20ul 트리판 + 20ul 셀 섞어 셀로미터 미니? 로 측정한 결과 T= 395 2.33x10^6 15 L= 377 2.22x10^6 15 D= 18 1.06x10^5 13.6 V= 95.4% total= 8.88x10^6 이라는 값이 도출됐는데요 (원하는 농도?값?은 1x10^6입니다.) 프로그램이 계산해준대로 여기서 450ul 따서 T175 flask에 seeding후 남은 7.88x10^6 개는 stock했습니다. 편리를 위해 7.88 뒤 0.88 의 값만큼 버리려고 하는데 0.88의 값을 계산 못해서 도와주셨어요.. ㅜㅜ 쌤 말씀으론 0.88이면 396ul 이니 그만큼 버리라고 하셨는데 어떻게 해야 396ul의 값이 나오는지 모르겠습니다.. 사실 저 위에 T175 flask에 450ul 넣는것도 컴퓨터가 값을 계산해줘서 아는거지 어떤 공식으로 도출되는 값인지 모르겠어요.. 도움주실 똑똑이 연구원분들 부탁드립니다...ㅠ_ㅠ
회원작성글 짬냥이  |  11.18
Q. NO는 반응이 있는데 ELISA(IL-6, TNF-a)에서 반응이 없어요.
안녕하세요! 항염증 관련 실험을 하고 있는 사람입니다. 저는 NO assay를 통해서 염증반응이 완화되는지 1차 스크리닝을 하고 ELISA 실험을 진행하고 있습니다. 그 이유는 TNF-a나 IL-6같은 사이토카인이 iNOS를 통해 NO를 형성하기 때문입니다. 그런데 NO assay에서는 sample에 의해 농도의존적으로 NO가 감소하는 반면,  ELISA(IL-6, TNF-a)에서는 농도의존적으로 떨어지지 않고 감소하다가 올랐다가 다시 감소하는 모습을 보입니다. (IL-6와 TNF-a의 경향성은 동일합니다.) 동일한 sup.으로 NO와 ELISA를 2회 반복 실험했음에도 동일한 결과를 보여 혹시 이런 경우를 본적이 있으신 분이 있을까하여 글을 남깁니다. 혹시 이런 경험이 있으신 분이 있다면, trouble shooting을 어떻게 하셨는지 답변 부탁드립니다. 현재 저는 기존 24well에서 6well로 변경하여 재실험을 진행하고 있습니다. 긴글 읽어주셔서 감사합니다.
회원작성글 지농  |  11.17
Q. plate 곰팡이가 피었을때
plate에 도말하였는데 colony와 같이 곰팡이가 피었습니다.   곰팡이가 핀것은 처음이라... 도말할때 오염이 되서 발생한것일까요?   곰팡이가 핀 plate에 생성된 colony를 사용해도 되는걸까요?
회원작성글 학헉학도생  |  11.14
Q. 8 well chamber slide seeding
안녕하세요 immunostaining을 위해서 8 well chamber slide에다가 cell을 seeding을 진행 하였는데   아무래도 well이 작다 보니깐 얘네가 뭉쳐서 seeding이 되더라고요.. 혹시 이와 같이 작은 well에 seeding 할 때 안 뭉쳐서 seeding 하는 법이 있을까요..? 그냥 평소 양보다 적게 seeding 하고 자랄 때까지 기다리는 게 답일까요 ㅜㅜ?   6 well은 seeding 하고 흔들면 어느정도 흩어지지만 8 well chamber 같은 경우엔 너무 작아서 흔들어도 소용이 없네요ㅜㅜ    좋은 답변 부탁 드려요ㅜㅜ
회원작성글 쿵쿠따리쿵쿠따  |  11.10
Q. 농도계산 부탁드립니다.
안녕하세요.    1uM일 때 몇 mg/ml인지 계산과정을 알고 계신분은 알려주시면 감사하겠습니다.   몰질량은 392.464g/mol입니다.   x mg *(mmol/392.464mg)=1mmol    이렇게 계산하는게 맞을까요? 
회원작성글 강산이  |  11.08
Q. 세포에 약물 처리 농도 계산 질문드립니다.
powder로 약물 제공하는 곳에 세포에 약물 처리시 최적농도를 문의 드렸더니 아래와 같은 정보를 알려주셨습니다. "0.2% dmso 미디어의 최종농도입니다." 어떻게 제조하라는 뜻 인가요? powder로 된 약물 분자량은 400 입니다. 세포에 10uM로 처리하려합니다. 
회원작성글 SoliDeo  |  11.08
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