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BioLab 이은열 교수
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 카테고리: 전체 > Plant Biology > Plant Tissue Culture
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Q. NAA녹이는방법이 궁금합니다
callus를 유도하기 위해서 NAA를 녹여서 사용하려고 하는데 사람들마다 말하는 게 달라서 어떤 사람은 NaOH로 녹이라는 분이 있고 어떤 분은 DW로 녹이라는 분이 있어서 어떤 걸로 어떤 방법으로 녹이는지 알려주세요 ㅠㅠ
회원작성글 plant phys..  |  09.22
Q. 조직배양중 callus의 형태
안녕하십니까, 특정 수목의 잎에서 callus를 형성한뒤 계대배양 하는 과정에서 흰 가루 같은 물질이 보여 오염 인줄 알았으나, 현미경을 통해 확대한 결과, 세포가 연장되어 이어져있고, 세포한개의 크기도  길쭉한 형태의 세포가 밀집되어 있는 것을 보았습니다. 이런 현상이 다른 페트리 디쉬에서도 벌어지고 있어서 질문드립니다. 배발생 캘러스 형태일까요? 아니면, 과수롸 현상인지, 이도 아니면, 오염된 것인지 여쭙고 싶습니다.   캘러스위에서만 자라고 있으며, 배지위로는 몇주가 지나도 뻗어가지 않고 있습니다. 많은 논문을 찾아보았으나, 이런 형태는 잘 보이지 않아 질문 올립니다.  읽어주셔서 감사합니다. 
회원작성글 안드로뫼다  |  09.05
Q. 페놀황산법
안녕하세요!   페놀황산법에 관해 문의드립니다.   glucose standard를 제작하여 페놀황산법을 통해 absorbance(ABS)를 측정하였으며, glucose의 농도는 0, 6.25 12.5 25 50 75 100 입니다.   하지만 보통의 경우 100의 농도에는 ABS 값이 3.000이 나오는데 이번에는 2.400이 나왔습니다..(만들어진 페놀이 오래되어 그런 것 같습니다...)   이런 경우 똑같은 페놀을 사용하여 시료들도 ABS를 standard와 함께 측정하였는데 평소의 경우와 같이 standard curve 추세선을 적용하면 될까요?   감사합니다.
회원작성글 applebanan..  |  08.24
Q. 희석배수
안녕하세요 전분(Starch) 함량을 측정하는 페놀황산법을 통해 흡광도를 구하였습니다.    여기서 희석배수가 문제인데 제 실험순서를 간략히 말하면  시료에 sodium acetate buffer 2.5ml > 중탕 > sodium acetate buffer 2ml > 효소 1ml >> 총 5.5ml입니다.    총 5.5ml에서 200µl + 증류수 800을 하여 최종적으로 1ml를 사용하며 또한번 여기서 200µl를 피펫팅한 후 페놀황산법을 진행합니다.   standard에 희석배수를 곱해야하는데 희석배수가 이 과정에서 어떻게 되는 걸까요?
회원작성글 applebanan..  |  08.19
Q. Buffer 뜻
기초적인 질문입니다. Buffer의 뜻이 무엇인가요..? sodium acetate buffer(0.2M)를 만들려고 하는데 sodium acetate(3M)에 비율을 맞춰 증류수를 넣어만든 것이 버퍼가 되는 건가요?    
회원작성글 applebanan..  |  08.18
Q. 초파리 무게가 궁금합니다.
초파리에 관한 실험을 하고 있는 고등학생입니다. 초파리의 무게가 궁금합니다. 사람과 비교했을 때 몇 배 정도 차이가 나나요??  그리고 제브라피쉬와 무게가 어느 정도 차이나나요?
회원작성글 지나가는 행인1  |  08.17
Q. sodium acetate buffer(0.2M) 만드는 법
안녕하세요. 페놀황산법 시 sodium acetate buffer관련으로 문의드립니다.  1. sodium acetate buffer(0.2M) 만드는 법을 찾아보았는데 증류수 500ml에 sodium acetate trihydrate 54.432g를 녹인다음 증류수 1500ml를 추가로 넣은 후 acetic acid glacil 용액을 통해 pH4.5를 맞춘다고 합니다. 처음부터 2000ml를 넣고 54.432g을 넣은 후 pH를 맞추면 안되나요? 아니면 실험순서가 잘못된 것일까요?   2. 또한 저에게 3M sodium acetate pH4.6 용액이 있습니다. 위에서 언급한 sodium acetate buffer(0.2M) 2000ml를 만들기 위해서 3M sodium acetate 몇 ml에 증류수를 몇 ml 넣으면 좋을까요?   감사합니다.  
회원작성글 applebanan..  |  08.17
Q. 3몰 용액을 0.2몰용액으로 바꾸기
안녕하세요 제목에서와 같이 0.2M sodium acetate buffer 2L를 만들기위해 3M sodium acetate 500ml에 증류수를 얼마나 첨가하여야 할까요?
회원작성글 applebanan..  |  08.10
Q. 2,4-D 스탁 솔루션 크리스탈이 생깁니다 ㅠㅠ
안녕하세요. 조직배양 호르몬 스탁 솔루션 제조중에 있습니다. 2,4-D 합성옥신을 사용하려고 스탁솔루션 제조중인데 50mg 2,4-D에 4-5ml 90%에탄올 넣고 살짝 따스하게 해서 결정이 다 녹은것을 확인했습니다. 그리고 급하게 온라인에서 산 순수수로 50ml로 최종 솔루션을 제조했는데, 냉장보관 하고 다음날 보니 결정이 생겨서 벽면에 붙어 있네요 ㅠㅠ   혹시 왜그런지 알 수 있을까요 구글링해봐도 제조방법만 나와있습니다ㅠㅠ 
회원작성글 SUN CO  |  06.26
Q. BC균 습도 관련
안녕하세요. 다름이 아니라 BC균들 접종 후 온도는 25도로 맞추어서 하고 있지만  습도는 어느 정도가 적정한지 아직 잘 모르겠습니다. 다른 분들은 어떤 방식으로 하는지 알려주새요ㅠㅠ
회원작성글 혜주가  |  05.03
Q. 희석계산
어떤 키트에 Reconstitute at 0.2 mg/mL in sterile,deionized water. Deionizd water. 라고 되어있습니다. 키트 용량은 100 ug이고 전량 다 사용할 시 0.5 ml 멸균증류수에 현탁하여 사용하면 되는게 맞나요?
회원작성글 mimi99  |  04.25
Q. 식물 조직배양 실험에서 습도를 증가시킬 수 있는 방법이 궁금합니다
식물 조직배양 실험을 진행 중인데, 실험을 진행하다보니 식물 조직의 생존률이 너무 낮아 소독 방법을 수정해가면서 진행하고 있습니다 하지만 소독방법에 문제가 있기 보다는 식물조직이 배양되고 있는 밀봉된  petri dish의 습도가 너무 낮아 시료가 잘 생장하지 못하는 것 같다는 피드백을 받았습니다. 혹시 배양하고 있는 petri dish 내의 습도를 올릴 수 있는 방법이 있을까요? 혹은 배지의 특정 조성 성분을 조절하면 밀봉된 petri dish 내의 습도를 올릴 수 있을까요?? 질문 읽어주셔서 감사드립니다
회원작성글 aligff  |  04.08
Q. 식물 잎 배양
African violet 잎을 배지에서 배양하려고 준비하는 과정에서 잎을 에탄올로 소독 시 너무 오래하면 탄력을 잃는다고 하더라구요 에탄올의 어떤 성분이 잎의 탄력을 잃게 만드는 것인가요?   그리고 배양 시 작은 잎이 큰 잎보다 활력이 더 좋다는데 그 이유도 알려주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 바이오팜  |  04.05
Q. MYA 배지 관련 질문 드립니다
연구 중인 균이 있습니다    일반적인 배지로는 자라지가 않아서 관련 논문을 찾아보던 중   MYA 배지에서는 자라는 걸로 나와 있더군요   근데 조건이 (15% g/L malt extract, 5% g/L yeast extract, and 15% g/L Agar)   이런 식으로 %로 나옵니다 그냥 g로 나오지 않고 %로 나오니   헷갈려서 도움이 필요합니다
회원작성글 죽업  |  04.04
Q. 식물조직배양
식물조직배양에서 벼를 배양할 때 N6D배지에서 배양할려고합니다. N6D배지의 어떤 성분 때문에 벼를 N6D배지에 배양해야 하나요?
회원작성글 바이오팜  |  03.22
Q. 원형질체 분리 실험 MS 질문
원형질체 분리 실험을 simple method for the isolation of plant protoplasts (ias.ac.in) 위 논문을 참고해서 진행하려 합니다. 원형질체 배양을 위해 p6에 있는 MS salts without NH4NO3가 필요하며, 구성요소는 KNO3 1900 | L-Glutamine 100 Casein hydrolysate 20 | myo-Inositol 2000 Glycine 2  | Nicotinic acid 0.5 | L-serine 0.1 으로 나타나 있습니다. 그런데 제가 찾은 가장 비슷한 구성요소를 가진 MS는 NH4NO3가 들어가 있으며 이것이 없는 MS는 찾기 어려웠습니다. Murashige & Skoog Medium (w/ Vitamins)-M4531 NH4NO3가 들어간 제가 찾은 것은 이것인데요.   위 제품에서 NH4NO3를 따로 분리하는 방법이 있는지,  아니면 위 경우에 사용할 수 있는 제품이 있는지 궁금합니다. 그리고 MS는 정확히 무엇인지도 궁금합니다
회원작성글 빙도운  |  03.16
Q. 액체배지 성분과 원형질체 질문
일반 고등학교 재학중인 3학년 학생입니다. 학교에서 실험 주제를 정해서, 준비를 하고 있는데 학교에 이런 실험을 해본 적이 있는 선생님이 없으시고, 과정이 쉽지 않아서 질문 드립니다. 원형질체를 분리하여 직접 배양 해보고, 이것이 성공하면, 직접 세포융합도 시도하려 합니다. 원형질체를 분리하는 재료는 A simple method for the isolation of plant protoplasts (ias.ac.in) 위 논문을 참고하였습니다. 첫번째 질문은, 위 논문 4p에 원형질체를 분리시키는 재료를 참고했는데, 농도만 표시되어 있고 L가 표시가 안되있어서 재료 준비할때 어려움이 있을 것 같습니다. 이럴때는 1L로 기준을 맞추면 되나요?   두번째 질문은, 위 실험에서 토마토 잎에 분해를 위해 Onozuka사의 Cellulase R-10을 처리했는데, 이것을 aladdin사의 Cellulase from Aspergillus niger로 바꿔서 사용해도 되나요? 추가적으로 논문에서 사용된 Novo사의 효소는 구할수 없고, Onozuka사의 효소는 학교에 요청하기에는 가격이 비싸서그런데, 대체품은 없나요?   세번째 질문은, 6p에서 Media에 기본적으로 MS salts가 들어가는 것을 확인하여, 성분이 가장 비슷한 Murashige & Skoog Medium (w/ Vitamins)-M4531 제품을 찾았습니다. 그런데 실험 설명에는 KH4NO3가 없어야 한다고 나와있는데, 제가 찾은 MS에는 전부 이것이 들어있었습니다. KH4NO3를 따로 제거하여 써야 하는 것인지, 그러면 그 방법은 무엇인지 혹은, 다른 MS를 사용해야 한다면 어떤 것을 사용해야 하는지 궁금합니다.   네번째 마지막으로, 원형질체를 만들고 세포합성을 하는 논문 중 한글 논문이나 제가 참고할 만한 논문이 있나요?? 혹은 다른 간편하고 상대적으로 저렴한 재료로 실험한 논문이 있을까요?
회원작성글 빙도운  |  03.15
Q. 캘러스 유도 배지 오염에 관해 질문 있습니다.
NB 배지를 이용하여 벼 종자에서 캘러스를 유도하려고 하는데 벼 종자를 배지로 옮기면 항상 벼 종자 주변이 세균으로 오염되어 첫번째 단계에서 계속 멈춰 있습니다. NB배지, 살균 증류수 전부 autoclave를 통해 멸균하고 클린 벤치에서 작업합니다. 사용하는 핀셋, 유리병 전부 autoclave 돌린 후 클린벤치에서 화염 멸균하여 사용합니다. 쌀 종자는 70% ethanol로 일 분, 1.5% sodium hypochlorite와 tween 20 혹은 triton X-100으로 30분 살균하고 증류수로 washing 후 종자를 배지에 놓습니다. 다만 마지막에 washing하는 증류수가 마르지 않은 채로 배지에 올립니다. 교수님도 원래는 filter paper같은 걸로 수분을 날리고 배지로 옮긴다고는 하셨는데 그냥 washing하고 바로 옮기라고 하셧습니다. 배지는 쌀 종자를 옮기지 않은 것은 일주일 지나도 세균 오염이 없는데 종자를 옮기면 계속 오염이 생깁니다. 제 짧은 식견으로는 세균으로 오염되는 영역이 항상 멸균 증류수가 퍼진 영역인데 멸균 증류수가 문제일까요? 
회원작성글 loopcha  |  02.07
Q. 식물조직배양시 mes 효과 문의
안녕하세요 식물체를 배양하고 있는데 배양중에 배지의 ph가 너무 많이 떨어지네요 ms배지를 mes 혼합 배지를 써보려고 하는데 mes 첨가가 배양중 배지의 ph 완충에 효과가 있는지 경험을 듣고 싶습니다 선배님들의 조언 부탁드립니다
회원작성글 밤꼬  |  2021.11.09
Q. 안토시아닌 인체 중금속 제거
안토시아닌이 인체 중금속 제거에 도움이 된다는 주제로 탐구를 하고 있는데 무슨 원리인지가 안 나와있네요ㅠㅠㅠ 그냥 중금속 제거 특성도 있다. 이렇게만 나오니까... 원리는 없나요?
회원작성글 개념원리  |  2021.09.03
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