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 카테고리: 전체 > Laboratory Animals > Histology/Pathology
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Q. 대장암 모델의 대장 위치에 따른 차이
안녕하세요. 대장암 모델을 연구하고 있는데, 처음이다 보니 다른 연구자 분들의 의견이 듣고 싶어 질문하게 되었습니다.   제가 AOM/DSS 로 유도된 마우스를 희생하여 조직병리와 단백질 분석을 수행하려고 합니다. 대장 위치 proximal, mid, distal colon에 따라 단백질 분석 결과가 달라지는지 궁금합니다. 대장암 모델은 처음이라,, 조직병리는 암 발생이 가장 많이 된 부위를 분석하면 될 것 같은데, 단백질은 확신이 들지 않네요. 의견 부탁 드립니다. 감사합니다.
회원작성글 조미  |  02.08
Q. mouse liver H&E 분석방법
안녕하세요 :-)  동물실험을 처음 해보는 학부 실험생입니다.. ㅜㅜ  지금 간 조직 H&E 염색을 진행하고 현미경으로 사진찍고 분석을 하려고 합니다. 여러 논문을 보고 혼자 공부하고 있는데 도저히 모르겠어서 브릭 선생님들께 여쭤봅니다ㅎㅎ 1. 간은 중심정맥을 기준으로 현미경 사진을 찍는 것으로 알고있는데 만약 중심정맥을 찾지 못하면 다른 부위로 해도 괜찮을까요?  2. 선행논문에서 무작위로 찍었다라는 말은 중심정맥을 기준으로 20x로 찍은 뒤 그 사진에서 무작위로 40x로 찍어야 된다는 말일까요?  3. 제가 이번 실험에서 보고싶은 건 간의 지방의 정도,, 염증을 보고 싶은데요!! 지방과 염증이 어느정도 나타났다 것을 다른 기준 없이 쥐들만 비교하면 되나요? suzuki score나 NAS score를 기준으로 분석하는 건가용?  4. 혹시 도움이 될만한 논문이 있을까요... ?    질문이 너무 두서없는 걸까봐 걱정이네요,,,  많은 가르침 주시면 감사하겠습니다!!  모두모두 새해 복 많이 받으세요 :-) 
회원작성글 Dvs  |  01.06
Q. mouse paw decalcifiation이 너무 안 됩니다....
arthritis 연구를 위해 mouse paw H&E를 해야 하는데요.   이를 위해 Sigma 사의 decalcification solution lite도 써보고 10%와 20% EDTA Solution도 써보고 10% formic acid도 써봤습니다. (총 7일부터 14, 21일 동안 decalcifying해봤으나, 전부 딱딱해 paraffin section에 실패함, 2~3일에 1번씩 용액 교체함)   아무 것도 mouse paw를 탈회시키지 못 하네요 ㅠㅠ... joint는 성공했는데 paw가 문제입니다.   아니면 paw dissect에 문제가 있던 걸까요?? 따로 방법이 있을까요? 저는 발톱을 자르고 발 전체의 skin을 벗겨냅니다.  근육이 일부 남아있는 상태에서 탈회를 시키는데, 근육을 완벽히 벗겨내야 할까요? 근육을 제거하면 염증 보기 어려울 것 같아 제거하지 않았습니다만... decalcification에 성공하여 mouse paw를 완벽하게 H&E하신 분이 있을까요? 있으시다면 protocol공유가 가능할까요?? 부탁드립니다!!  
회원작성글 개굴빈  |  2022.12.30
Q. dehydration 후에 흐르는 물 wash
prep 한 뒤에 30% sucrose에서 dehydration 한 뒤에 wash한다는 생각으로 흐르는 물에 20분 정도 두었는데 생각해보니 이렇게 되면 탈수한 조직에 영향이 있지 않나 라는 생각이 갑자기 들어 꺼냈습니다. 혹시 어떤 영향이 있을까요? 탈수된 조직에 다시 물이 들어갈 수도 있나요?
회원작성글 별헤는밥  |  2022.12.19
Q. tissue fixation
조직을 prep한 뒤에 2주 정도 30% sucrose에 보관했다가 4%PFA에 하루 두었는데 다시 30% sucrose에 1주일 정도 보관할 수 있을까요? 원래 4% PFA 먼저 하루 둔 뒤에 sucrose에 넣는걸로 알고있긴 한데...
회원작성글 별헤는밥  |  2022.12.08
Q. 동결 절편 제작 프로토콜 검토
안녕하세요 동결 절편 제작을 하려고 방법을 찾아보던 중에 검토받아보고자 질문 남깁니다.   1. 장기 절단 2. 고정(10% NBF) 24시간 3. 10% sucrose/0.1 M PBS 4도씨 4시간 4. 15% sucrose/0.1 M PBS 4도씨 4시간 5. 20% sucrose/0.1 M PBS 4도씨 하룻밤 6. 동결포리 (드라이아이스) 7. crystat 절편 8. 냉풍건조 실온 1시간 9. 세정 5분간 3회   이러한 과정으로 진행하려고 하는데 궁금한건 20% sucrose 처리 후 세척과정은 따로 필요하지 않은건지 궁금해서 질문 남깁니다.  감사합니다.
회원작성글 라디칼  |  2022.11.21
Q. tissue processing 관련하여 문의드립니다.
rat brain으로 paraffin block을 제작하려고 하는데 처음 해보는거고 물어볼 사람이 없어서 이곳에 질문을 남기게 되었습니다ㅜ 인터넷에 올라온 여러 protocol을 참고해서 진행중인데 탈수과정에서 '70% 에탄올 1시간 ➡️ 80% 에탄올 1시간 ➡️ 95% 에탄올 1시간 30분 ➡️ 100% 에탄올 1시간 30분 ➡️ 100% 에탄올 1시간 30분' 이렇게 하라고 되어있는데 여기까지 하면 퇴근 시간이 되서요... 100% 에탄올에서 overnight 해도 괜찮을까요...? 그리고 다음 과정이 '크실렌 + 100% 에탄올 1대1로 1시간 ➡️ 크실렌 1시간 ➡️ 파라핀+크실렌 1대1로 2시간 ➡️ 파라핀 1시간 ➡️ 파라핀 overnight' 이라고 되어있는데 파라핀 과정을 생략하고 바로 embedding 해도 될까요?? 파라핀을 녹일 곳이 마땅치가 않아서요ㅠㅠ dry oven은 없고 water bath는 있는데 이걸로도 가능할까요?ㅠㅠ
회원작성글 탈탈털어  |  2022.11.16
Q. 조직 병리 실험 대행 업체 아시는분 계실까요?(슬라이드, IHC)
조직 병리 실험 대행 업체를 찾을려고 합니다   혹시 경기도 서울 주변으로 업체를 아시고 계신분 있으실까요?   고수님들의 많은 관심 부탁드립니다.
회원작성글 행운13  |  2022.09.22
Q. 4% PFA 조직 고정 후 조직 처리 전 보관
Skeletal muscle을 H&E 목적으로 prep해서 4% PFA에 24 시간동안 고정할 예정입니다. 이후 70% EtOH에 8시간 정도 보관 후 tissue process를 하려하는데 70%EtOH에 보관 후에 tissue process를 해도 되나요?
회원작성글 별헤는밥  |  2022.09.05
Q. trichrome staining
skeletal muscle의 development를 비교해보려 하는데 H&E를 하려다가 Trichrome staining이라는 것을 알게되었는데 이 염색방법도 근 섬유의 단면적을 비교할 수 는 있겠더라고요 혹시 H&E가 아니라 Trichrome staining으로 skeletal muscle을 본다면 이유가 있을까요?
회원작성글 별헤는밥  |  2022.08.18
Q. mouse의 tumor 생성 정도에서 weight loss 여부가 중요한 이유가 궁금합니다.
mouse에서 특정 cell의 inoculation 여부에 따라 tumor의 생성 정도를 비교하는 실험입니다. 이때, 왜 mouse간의 weight loss가 관찰되지 않는 것이 중요한지 궁금합니다.   *원문: Based on the above findings, we conducted peritoneal dissemination model experiments using OCUM-2MD3 cells to evaluate the role of S-CAFs in the development of peritoneal dissemination in vivo. The peritoneal tumors of OCUM-2MD3-inoculated mice treated with S-CAF-CM for 30 days were significantly larger than tumors from the other two groups, and weight loss was not observed (Figures 5A and S6A).
회원작성글 옵몽이  |  2022.07.21
Q. hemorrhage (clot)이 생긴 brain을 포르말린으로 고정할 수 있나요?
안녕하세요,   Subarachnoid hemorrhage (SAH)를 rat에게 유발 중입니다.   만든 뒤에 brain을 포르말린 (4% PFA)에 고정하는데요,   brain을 skull에서 분리하여 포르말린 통에 넣으면 뭔가 clot에 붙은 혈액이 미세하게 포르말린에 희석되는 느낌이에요.   그리고 포르말린 통에서 건져낼 때에도 clot이 잘 분리되어서 조심히 다뤄야 하고요.   그래서 쥐 머리 통째로 (brain을 분리하지 않고) 포르말린에 담궈버릴까 생각하고 있는데요,   혹시 괜찮은 방법일까요?
회원작성글 =ㅅ=  |  2022.07.13
Q. 마우스 근육세포 diameter 첨부파일
안녕하세요 근감소증 마우스 모델로 실험중인 연구원입니다. 근육조직 고정 후 H&E염색한 사진인데요, 근육 세포(muscle fiber, 근육 섬유)의 diameter을 측정하고자 하는데 근육 세포가 원이 아니고 타원형이나 다각형을 띄고 있으며 사진과 같이 장축과 단축의 차이가 큰데 어떤 것을 diameter라고 하는지요? 근육 실험 관련하여 유경험자분들 알려주시면 감사하겠습니다.
회원작성글 jeongjjang..  |  2022.05.09
Q. tissue sectioning 실험 buffer 관련 질문드립니다.
    안녕하세요. 처음으로 마우스 실험을 진행하다보니 궁금한게 있습니다. 마우스 실험 후 부검하여 조직을 확보한 후에 paraffin section을 진행하여 H&E staining 단계를 진행하려고 합니다. 마우스 실험 후 각 tissue를 formaldehyde fixation을 진행하고, 아래의 프로토콜을 이용하여 조직을 준비하였습니다. 현재 70% ethanol에 있는 상태 입니다.  https://med.nyu.edu/research/scientific-cores-shared-resources/sites/default/files/nyu-histocoresample-prep-paraffin.pdf   제가 직접 sectioning을 진행할 수가 없어서 다른 기관에 의뢰를 하려고 하는데, 그쪽 기관에서는 포르말린에 고정되어있는 조직을 보내야한다고 합니다. 70% ethanol을 제거하고 바로 포르말린에 다시 넣어도 괜찮을까요? 아니면 xylene으로 넣어서 보내야할까요?   답변 부탁드립니다.      
회원작성글 신우리  |  2022.04.06
Q. 파라핀 섹션을 했는데, 이상해요 첨부파일
안녕하세요.  제가 이번에 근육을 가지고 파라핀섹션을 했는데요.  근육을 분리하여 4% formalin에 1일 정도 fixing하고 수세를 2일정도 한 후에 processing기계에 넣어서 프로세싱 돌린 후에 꺼냈을 때 겉 색이 푸르스름한 빛을 보였고, 유난히 쪼그라든 모습이였습니다. 원래 이런가요?  모양이 못생겼지만 그래도 혹시나 하여 이후에 parrafin 블락을 만들어서 썰어봤는데 내부에 갈라짐이 심했습니다.  이럴 때 어떤 과정을 바꿔보아야 할까요?     
회원작성글 꺄아악013  |  2022.03.22
Q. Tumor tissue H&E staining
안녕하세요. 마우스 등에 DU145 prostate cancer를 이식해서 xenograft 마우스 모델을 만들었습니다. 이후 tumor tissue를 sampling한 후, H&E statining을 하였는데,  아래 사진과 같이 blood vessel 또는 gland 같은 것들 발견되었습니다(하얀색 dash line) 정확이 어떤건지 잘 판독이 되지 않아 문의드립니다! 그리고 동일한 실험에서 세포주만 HepG2 Hepatocarcinoma로 바꿔서 했는데, 아래와 같이 비슷한 morphology가 관찰되더라구요.. 이것도 혹시 뭘 의미하는지 알려주시면 감사하겠습니다!
회원작성글 대학원생인가노예인가  |  2021.12.02
Q. 마우스 미생물 모니터링 서비스
실험용 마우스를 몇마리 키우려고 합니다. 자주는 아니어도 1년에 한두번은 미생물 모니터링을 했으면 하는데요, 구글에 검색해보니 가이드라인은 많이 나오는데 직접 할 상황이 아니라..ㅠㅠ 출장방문하셔서 시료 채취부터 분석까지 전부 해주시는 업체가 있을까요? 가격은 대략 어느 정도인지 아시는 분 계시면 답변좀 부탁드립니다.
회원작성글 괜찮아  |  2021.11.10
Q. mouse small intestine에서의 goblet cell이 많다는 것은 무엇을 의미하나요,,?
mouse small intestine에서의 goblet cell이 많이 관찰되었는데  이는 무엇을 의미하는 것인가요??
회원작성글 고라파덕  |  2021.11.04
Q. H and E mounting 이후 문제
hh and e mounting 이후에 조직이 저렇게 검은색으로 변하는데, 몇번을 해도 똑같습니다.. 무엇이 문제일까요
회원작성글 초파리사랑  |  2021.10.22
Q. 쥐 고환과 부고환을 잇는 날세관 (efferent ductule)을 cell-culture
안녕하세요, 혹시 어떤 조언이라도 받을 수 있을까 해서 이렇게 질문합니다. in-vivo 쪽으로는 경험이 없는데요, 쥐 고환과 부고환을 잇는 날세관 (efferent ductule)을 cell-culture 어떻게 하는지, 혹시 구매할 수 있는 곳은 있느지 여쭤봅니다~ 조언 감사합니다. 
회원작성글 gpcr1004  |  2021.10.21
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