안녕하세요 선배님들   석박 3년차 중인 애기 석박입니다.   CRISPR-Cas9을 이용해서 특정 protein 서열에 tagging한 ESC를 제작하고자 하고 있습니다. 주로 HA나 FLAG을 사용하겠지만 두 tag 모두 organoid나 mouse에서 non-specific binding이 나타났다는 말이 있어서 더 좋은 tag을 구하고 있습니다.   목표로 하는 protein은 ICC, IP, WB 용도로 사용할 예정이라 적절한 Tag을 추천 받고 싶습니다. V5, MBP, GST, HALO 등 다양한 내용들이 있었지만 어느게 제가 사용하고자 하는 application에 적절할지와 우수할지 궁금합니다. 되도록이면 CRISPR-Cas9 HDR로 넣을 예정이라 짧은 seq이면 좋을 거 같습니다.   감사합니다

안녕하세요. 예시를 들어 단백질 관련 질문드립니다.   단백질은 아미노산이 50개 이상일 때, 단백질이라고 하죠 어떤 방법으로 아미노산 1,000 개를 이어붙이고, 순수한 상태로 보관했을 때 이 단백질은 자연적으로 분해가 될까요? cleaved 현상이라던지... 구조는 논외로 하겠습니다. 순수히 1차 구조(아미노산 서열)로만 의견 부탁드립니다. 4도에서 보관할 때와 37도(과하게 50도까지)에서 보관할 때, 37도에서 분해될수도 있나요? 분해효소가 없다는 가정하에?

E.coli가 아닌 다른  세균의 expression을 보려고 하는데, 구독 비용이 부담스러워서 고민중입니다.  1. BioCyc 대신 KEGG 를 사용하는 건 어떻게 생각하시나요? 2. A라는 pathway에 대한 정보를 알고자 할 때, 논문검색을 통해 찿는 것과 BioCyc에서 찾은 후 출처로 사용한 논문을 읽는 것 중 어떤 것이 더 효율적인가요? 3. 업데이트는 잘 되는 편인가요? 4. 구독 비용이 좀 되어서.. 저 또는 저희 실험실에서 구매하긴 좀 부담스러운데,  EcoCyc 을 사용하는 다른 lab이랑 Metabolomics 연구하는 lab이 있어서... 그 방 사람들에게 영업하고, 제가 다니는 대학 도서관에서 부담하는 방식으로 해 보려 하는데 괜찮을까요..? 5. BioCyc보다 저렴한 대체제가 있을까요..? 일단 KEGG 생각해보고 있는데 인터페이스가 초보자에게 친절하진 않은거같아서..

안녕하세요.  현 졸업논문을 작성하고 있는 석사 과정중에 있는 대학원생입니다.  다양한 실험 결과를 해석함에 있어서 metaboanalyst라는 프로그램을 접하여 결과를 내고 result를 작성하고 있는 와중에 벽에 부딪혔습니다..  주변에 도움을 받을 수 있는 곳이 마땅치 않아서 고민하다가 이곳에 Q/A 올립니다 ㅠㅠ    이러한 R2X, R2Y, Q2값을 작성하는 부분인데요. 저는 지금 PCA, PLS-DA 통계 결과에 대해서작성을 하고 있습니다.  구글에 서치해도 그 어디에도 구하는 방법이 안나오고 어떤 외국인 분도 어떻게 구해야하냐라는 질문에 R프로그밍을 돌리면 된다고하는데 저는 R프로그래밍을 할 줄 몰라서 혹시 metaboanalyst에서도  결과돌리면 바로 찾을 수 있는 것인지, 아니면 다른 계산법이 있는 것인지 제가 다른분한테 듣기로는 그 metabo사이트 안에서 결과ㅡㄹ 돌리면 얻을 수 있는 값이라는데 아무리 찾아도 안보여서요..  급하게 회원가입하고 질문 남깁니다.  혹여나 아시는 분 계신다면 도움을 요청드립니다 ㅜㅜㅜㅜㅜ    답변 주신다면 정말 정말 감사하겠습니다.   

안녕하세요. lc-ms 를 통한 metabolite 분석 중 내부표준법에 대해 질문드립니다. 분석 대상은 2가지이고 A,B라고 칭하겠습니다. 혈장 내 대사체 분석이므로 공혈청을 사용하여 analyte standard A, B를 serial dilution 하였고, ISTD (isotope label 된 internal standard) A,B 는 모든 샘플에 동일한 양를 넣어 Calibration curve 를 작성 후 analyte A/internal standard (ISTD) A에 대한 calibration curve 과 analyte B/internal standard (ISTD) B를 작성 후 정량 비교를 할 예정이었으나.. 2가지 isotope labelled standard 중 하나가 원인을 모르겠지만, 색이 변색이 되었습니다. 얼었을땐 노란색, 해동 후 검정색으로요....(이유가 뭔지 모르겠네요..) 품질에 문제가 있을 것 같아서 2가지 중 멀쩡한 ISTD A하나만을 사용하여 analyte A / ISTD A에 대한 calibration curve를 만들고 analyte B / ISTD A에 대한 Calibration curve 를 만들어서 정량분석을 진행하려고하는데... 제 생각에는 이론상 문제가 없을꺼같은데..혹시 괜찮을까요??? 어떤 논문에서는 하나의 ISTD 를 사용하여 두가지 대사체의 양을 확인하더라구요... 답변부탁드립니다..

protein assay 중 lysis buffer에 샘플을 풀어두었는데  실험을 바로 진행할 수 없게 되어서 보관해두었다가 1~2일 뒤에 BCA와 이후  실험을 진행하려는데 이전에 lysis buffer에 푼 샘플을 얼음에 두었다가 응어리가 생겼던 경험이 있어서  실온 (18도)에 보관할지 냉장고(4도)에 보관할지 고민입니다ㅠㅠ 조언 부탁드립니다! 

안녕하세요  저희가 WGS로 sequencing을 진행하는데요 궁금한 것이 있어 여쭤봅니다. 같은 sample인데 생산날짜가 다른 Library로 sequencing을 진행 했을때,  sequencing후의 데이터 분석시 문제점이나 차이점 등을 알고 싶습니다.   답변해주시면 많은 도움이 될 것 같습니다 :) 감사합니다.

 SIMCA 사용하면서 UV로 하라 Par로 하라 사람마다 다른 것 같은데  통계나 SIMCA 같은 교육을 따로 안 받고 사용하다 보니   의미하는 바를 잘 모르겠습니다.  UV나 Par를 설정하는 차이가 뭔가요?? 

다사 염색체는 보통 분리되지 않아 다른 일반 세포보다 큽니다.  다사염색체 의 일반적인 예시가 초파리 침샘 염색체인데  중간에 과정에서 침샘염색체를 고정할때 아세트산 용액을 사용하는데 왜 에탄올이 아니라 아세트산을 사용하는지 궁금합니다. (1) 또 염색할때 아세트 올세인 용액을 쓰는데 염색체에서 진하게 염색된 띠와 그렇지 않은 띠는 유전자 발현 양상이 어떻게 달라지나요? (2)  

BLAST 같은 경우는 Protein sequence로 homology search를 진행하여 결과를 주는 것으로 이해를 했는데, 혹시 peptide를 통해서 homology search 결과를 보여줄 수 있는 tool이나 방법이 있는지 알고 싶습니다!

혈액 응고와 관련된 실험을 진행하는데 혈액빼고 다 구했는데 혈액이 말썽입니다. 헤파린같은 약물로 항응고 처리된 혈액은 구할 수 있을 것 같은데 이를 원상태로 실험에 이용할 방법이 있을까요?

혈액 응고 실험하는데 동물혈액(피브린 없는거) 사서 피브린 직접 넣으면 똑같이 쓸 수 있너요?

초파리 침샘 염색체 관찰 실험을 할 때 유충의 영양상태에 따라 영양상태가 좋은 유충이 아닌 유충보다 관찰이 용이하다는 점 까지는 이해하겠으나, 영양상태에 따라 구조가 변하거나 하는 지에 대해 의문이 생겨 이렇게 질문 드립니다. 예를 들어 초파리 침샘 염색체 관찰 실험을 할 때 영양이 풍부한 배지에 기른 유충과 유충이 살아가기 위해 필요한 최소한의 영양만을 가진 배지에 기른 유충에서 침샘 염색체의 구조의 차이가 있나요? ㅜㅠㅠㅠ 아직은... 생물분야 지식이 부족해서... 이렇게라도 알아서 동아리원들을 따라가야겠다는 마음으로 글 올려봅니다. 혹시 아신다면 간단하게라도 좋으니.. 답변 해주시면 감사하겠습니다.

σ결합은 결합성일 때 g, 반결합성일 때 u를 붙이는데 왜 π결합은 반결합성일 때 g, 결합성일 때 u인지 궁금합니다.  

인종별로 유전자변이를 확인하고 싶은데요, 어느 데이터베이스를 보는 것이 좋을지 궁금합니다.

생물은 저서생물기반으로 하고있는데 쓰고있는 primer의 Tm값은 50-55도 입니다. PCR을 하는데 낮은 온도로 하니까 오히려 잘나오더라구요. 40도까지해습니다. 랩 선배나 PCR글을 자주보면 40-60도사이에서 고르라고 하는데 혹시 더 낮은 온도로 하면 잘나오지 않을까요? 한 30도로 해보신분있을까요?

채혈을 한 뒤에 인위적으로 혈당을 조절할 수 있는 방법에 어떤 것들이 있을까요? 고등학교 실험 과정에서 혈당을 변인으로 할 생각입니다.

프로트롬빈 검사 실험을 해보려하는데...  http://www.sysmex.co.kr/product/hemostasis/coagulation/ 이 사이트에서 다양한 시약들을 팔더라구요. 알아본 바에 의하면... Factor II, V, VII, X 랑 Fibrinogen이 PT 실험에 영향을 미친다고 알고 있는데, 이 사이트에서 무엇무엇을 사야하는 걸까요 실험 초짜라 어떤 시약이 어떤 역할을 하는 지 모르겠습니다. 제가보이겐 PT 관련 시약 Thromborel S랑 DaDe Thrombin Reagent(피브리노겐) 그리고 위에 영향을 미치는 Factor들이랑 헤파린 측정기 등등 필요한 건 많아보이는데, 무슨 역할을 하는진 잘 모르겠네요. 고등학생 수준에서는 너무 어려운 걸까요... 아무튼 이 사이트에서 무슨 시약을 사야할지 조언좀 부탁드립니다... + 그리고 이 시약들을 이용할때 인간의 혈액에다 해야하나요? 시중에서 파는 동물혈액은 다 섬유소가 빠져있어 못쓸거같긴하던데

proc anova data = one; class tre; model activity = tre; means tre / duncan; run;   위대로 SAS 분석을 진행했다고 하면 ANOVA로 통계처리를 한 다음, Duncan으로 유의성검정을 진행하였다고 보면 되는 건가요??

'유전자 발현'이라는 용어는 조직, 기관에 따라 세포의 기능을 달리 하는 관점에서의 발현과 억제를 나타내나요? 유전자가 존재하지만 진화하면서 불활성화되어 휴면상태에 있는 유전자를 활성화하는 것도 유전자 발현이라고 표현하는지 궁금합니다 생명 쪽 지식이 많이 부족한 고등학생이라 잘 구분이 안가서 여쭤봅니다 ㅠㅠ +) 다른 종과 공동 조상이었을 시기에는 특정 유전자가 존재하다가, 진화 과정에서 그 유전자 발현이 억제되어 현재에는 불활성화되어 있다면, 이를 후성 유전의 사례라고 볼 수 있나요? (제가 이해하고 있는게 맞는지 궁금해서요!!)