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BioLab 이은열 교수
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 카테고리: 전체 > Chemical biology > Extraction/Concentration
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Q. Protease 역가 계산 질문드립니다.
안녕하세요. protease assay 효소액 88ml중 120ul 채취하여 사용하였습니다. 실험방법은 효소액 120ul와 azocasein 480ul를 80분 동안 반응시킨 후 20% TCA용액 600ul로 섞고 원심분리하였습니다. 그리고 위 용액중 100ul와 sodium carbonate 500ul, Folin-Phenol 버퍼 100ul를 30분 동안 반응시켜 660nm에서 흡광도를 측정했습니다.   이때 역가 계산은 (시험용액 중 티로신양(ug/mL) x 88ml x 1.2ml)/80min x 0.12ml 로 계산하는게 맞나요?
회원작성글 gythakssmd..  |  09.22
Q. 물질합성시 추출
제가 요즘 ethyl acetate와 water를 활용하여 추출을하고있습니다. 반응 용매는 dmf라서, 반응후 건조를 시키지 않고 바로 water를 충분히 가하여 물층으로 보내어 제거합니다. 추출후 ethyl acetate에 magnesium sulfate를 가하여 드라이하는데, 아무리 충분히 넣어주어도 회전증발기를 돌리고 나면 여전히 liquid가 남아있습니다. 넣어주는 magnesium sulfate의 양이 부족한 걸까요? 혹은 가해준 water가 충분하지 않아 dmf가 유기층으로 온것일까요?  
회원작성글 얏콩  |  09.16
Q. 옥수수 바이오 에탄올 실험 설계
350mL의 탈이온수를 500mL 삼각 플라스크에 넣고 195oF(90.6oC)로 가열   1단계의 뜨거운 물을 옥수수 가루 100g이 들어 있는 다른 플라스크에 천천히 넣고 계속 저으면서 교반하는 핫플레이트에 놓는다   옥수수 가루의 온도가 75 – 85 도인 경우 100 µL의 GC-358 알파 아밀라아제 효소를 추가   15분 동안 계속 저어주고 이 시간 동안 온도를 83.3C – 85oC로 조정   83.3 – 85oC 사이의 온도를 유지하면서 옥수수 가루를 계속 저어줌. 플라스크를 열에서 제거하고 다음 날까지 실온으로 식힌다.   건조 효모 2g을 넣은 후 0.5mL의 G-zyme 480(글루코아밀라제)(10% 용액)을 추가   실온에서 72시간 발효 후 증류하여 에탄올 추출   실험을 다시 설계해봤습니다... 탈이온수 대신 증류수를 사용해도 괜찮을까요?
회원작성글 qwe851  |  09.14
Q. 옥수수 바이오 에탄올에서의 효모 사용
제분: 옥수수를 가루 또는 가루 형태로 분쇄  (전분은 당 분자의 긴 사슬로 구성된 탄수화물임) 액화: 혼합물을 만들기 위해 옥수수 가루에 물을 첨가하고 알파 아밀라아제 효소를넣어서 가열(90도)한다. (혼합물을 가열하여 긴 전분 분자를 더 작은 조각으로 부숴줌. 효소 알파-아밀라아제는 전분 분자의 분해를 촉진(또는 가속화)하기 위해 추가됨.) 당화: 옥수수 반죽을 식힌 뒤 글루코 아밀라아제 효소를 넣는다. (전분 분자 조각은 포도당으로 분해됨.) 발효: 효모라고 하는 단세포 미생물이 혼합물에 첨가.  옥수수 반죽은 40~50시간동안 발효시킴. 효모는 포도당에서 에너지를 얻어 결과적으로 에탄올이 생성됨. 증류 및 탈수: 발효 과정의 산물은 10-15% 에탄올이므로  혼합물을 걸러내고 탈수하여 순수한 에탄올을 생성함.   이렇게 실험설계를 해보았는데 발효과정에서 활성과립효모를 사용해 발효를 해도 괜찮을까요?
회원작성글 qwe851  |  09.13
Q. 고1 망고, 바나나 껍질 에탄올 추출 실험 관련 질문드립니다
안녕하세요. 고등학교 과학탐구실험 중 에탄올 추출법을 사용하여 망고와 바나나에서 항균 및 항진균 효과를 가진 물질을 추출해 내려고 합니다. 조사를 통해 알게 된 정보를 정리하는 과정에서 질문들이 많이 생겼는데 답변해주시면 감사하겠습니다..!🥺 1. 망고 껍질 추출물을 에탄올 추출법을 사용해서 얻으려고 합니다. 그런데 동결건조기가 학교에 없는데 동결건조를 하는 대신에 망고 껍질을 그냥 으깨서 에탄올에 넣어도 되나요? 2. 참고한 논문의 실험 방법을 보면 24시간 동안 교반하는 과정이 있는데 교반기가 없어서 어떤 다른 과정으로 대체할 수 있을까요? 3. 망고 껍질 추출물을 얻는 내용에 대해 참고한 논문은 시료를 얻기 위하여 “시료 중량대비 70% 에탄올 10배의 양을 가하여 실온에 서 24시간 교반하여 추출한 후 상등액과 침전물을 분리하여 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다”고 했는데 침전물에 다시 에탄올을 추가하여 교반한 후 추출하는 것이 아니라 상등액을 교반기에 넣고 다시 추출하는 것을 반복해야 하는거죠? 4. 감압여과를 하는 대신에 깔때기와 거름종이를 사용하여 여과해도 괜찮을까요? 5. 에탄올 용액을 농축하려면 어떻게 해야 하나요? 6. 바나나 껍질에서 퀴논 추출물을 얻을 때 메탄올 말고 에탄올을 사용해도 차이가 없을까요? 찾은 자료에 의하면 메탄올로만 추출되는 것들이 있다고 들었는데 위험하니까 다른 물질로 대체할 수 있는지 알고싶어요. 7. 바나나에서 퀴논 추출물을 얻는 방법인데 맨 마지막 단계에서 쓰인 DSMO를 증류수로 대체해도 될까요? 바나나 껍질 추출 방법 1. 산화된(갈색으로 변한) 바나나 껍질을 분리한다. 2. 껍질을 공기건조(air-dry)한다. 3. 완전히 건조된 껍질을 작은 조각으로 분쇄한다. 4. 분쇄된 껍질(50g)을 메탄올 용매(200ml)에 3일 동안 담가둔다. 5. 여과지(filter paper)를 사용하여 여과한다. 6. 추출물을 농축시키기 위해 회전 증발기를 사용하여 메탄올을 60ºC에서 압력하에 증발시킨다. 7. 10% dimethyl sulfoxide(=10ml DMSO, 90ml water)에 용해시켜 3% 농도(3g/100ml)로 제조한다.
회원작성글 seohyun06  |  09.12
Q. 녹말 바이오 에탄올 실험 질문드립니다.
(옥수수 가루, 설탕, 이스트, 물)재료를 잘 섞은 후 옥수수 가루가 발효될 때 교반이 최소화되도록 용기를 밀봉후 2주간 발효 옥수수 가루가 발효됨에 따라 효모는 원래 포도당 분자에서 이산화탄소를 지속적으로 제거함 혼합물의 포도당을 아세틸 알데히드로 전환 한 다음 에탄올로 전환 혼합물의 최상층에는 물과 에탄올의 혼합물이 포함됨. 유체를 분리하기 위해 혼합물을 증류하고 증기를 액화하여 에탄올을 분리.   해당과정으로 녹말작물 바이오 에탄올을 만들수 있을까요? 위 과정이 아니더라도 바이오 에탄올 실험 진행시 옥수수 혼합물을 제조할때 익은 옥수수를 사용해도 되는지도 궁금합니다.         (https://www.youtube.com/watch?v=uuxQtKEDaQM) 실험과정 참고한 영상입니다.
회원작성글 qwe851  |  09.09
Q. 바이오 에탄올 실험에서의 sucrose 사용
옥수수를 사용한 바이오 에탄올을 만드는 과정에서 옥수수 분말, sucrose, 효모, 물을 넣어 옥수수 분말 용액을 만들어 발효시키려고 하는데 sucrose 대신 설탕을 사용해도 괜찮을까요?
회원작성글 qwe851  |  09.07
Q. 용액 만들기, 몰농도 계산 관련
생명과학을 처음 배우는 학생입니다 di solution 이나 Methylene blue solution 농도에 대해서 나와있는 경우 solution 앞에 붙은 단어가 용매인건가요?
회원작성글 Eji  |  09.04
Q. carmine powder 녹이는 버퍼 다른게 뭐가 있을지 궁금합니다.
안녕하세요 선생님들 박사과정중인 학생입니다. carmine을 solution으로 만들고 이걸 먹여서 동물실험에 쓰려고 하는데 논문을 보면 carboxylmethyl cellulose에 mix해서 쓰라고 하는데 혹시 다른 버퍼로 녹여서 쓰신분이 있는지 궁금합니다.
회원작성글 밥먹을시간  |  09.02
Q. 식물의 잎에서 약 성분 정도를 확인하는 방법...
안녕하세요 폐의약품 관련 연구를 진행하고자 하는 고1 학생입니다. 강낭콩을 키우면서 대조군을 설정하고, 실험군에는 강낭콩과 약을 바로 옆에 같이 심거나, 약을 녹인 물을 강낭콩에게 줘서 대조군과 실험군의 생장 속도 차이를 비교해 보려고 합니다.. 이때 식물이 자란 후 각 식물들의 잎이나 줄기 등으로 식물 속에 있는 약 성분의 농도를 확인하고 싶은데, 마땅한 방법이 생각나지 않고 검색해도 나오지 않습니다. 도와주세요 ㅠㅠ
회원작성글 city of st..  |  09.02
Q. 간단한 몰농도 계산 질문
  실험초보입니다. 1M HCl을 가지고 0.1M HCl 을 만들려고하는데 넣을 1M HCl 양보다 증류수를 10배 더 넣어서 묽히는게 맞나요? ex. 1M HCl 20ml + DW 200ml -> 0.1M HCl   
회원작성글 dksrud  |  09.01
Q. 소화제 성능 비교실험관련 질문입니다 첨부파일
안녕하세요. 저는 화성반월고등학교에 재학중인 정민식이라고 합니다. 제가 이 질문을 작성하는 것은 다름이 아니라 제가 과학탐구실험시간에 진행한 소화제 성능 비교실험에서 궁금한것이 있었기 때문인데요. 저희가 알부민 용액이 없어서 대신 계란흰자를 사용했습니다. 하지만 저희가 희석을 하지 않아 계란흰자의 점도가 많이 남아있었습니다. 계란흰자를 3개의 시험관에 나눠 담고 단백질 분해를 확인하기 위해 뷰렛용액을 넣었습니다. 그뒤, 서로다른 2개의 소화제를 빻고 증류수에 섞은 소화제 용액 2개와 증류수 1개를 3개의 시험관에 각각 넣었습니다. 그런데 전에 말했듯이 계란흰자의 점도가 많이 남아있던 터라 용액과 계란흰자가 섞이지 않아 유리막대로 저어보고 시험관을 흔들기도 했습니다. 그뒤 시험관을 체온 즉 37도씨와 비슷하게 유지하기 위해 항온기에 10분동안 넣어두었습니다. 그뒤 실험결과를 확인하기 위해 시험관을 보니 계란흰자가 젤리처럼 응고되었습니다.저희는 왜 계란흰자가 젤리처럼 응고되었는지 궁금합니다. 답변 적어주시면 정말 감사할 것 같습니다. ps. 저희가 저희대로 추측을 해볼때 단백질 변성 혹은 시험관을 흔들고 유리막대로 저은 것으로 인해 머랭이 쳐졌을거라고 생각합니다. 시험관을 흔들었을때 거품이 많이 생겼었습니다.
회원작성글 정민식  |  08.31
Q. 비드에 항체-항원 붙힌 후 TMB로 농도별 색 확인
안녕하세요,  제가 자성비드에 항체, HRP, 항원을 순서대로 conjugation하여  TMB로 항원 농도별 색 확인을 하는데, 색이 나와야할 고농도에서는 색이 안나오고 , control 혹은 저농도에서 푸른 색이 발현 됩니다.  세정이 문제인지, 아니면 다른 source가 문제인건지 혹시나 관련 실험에 대하여 아시는 분 계실까 싶어 글 올려봅니다 ..   세정은 항원 붙힌 후 PBST로 3회, HRP 붙힌 후 PBST 2회, PBS 1회 세정하여줍니다.  비드 용매는 PBST에 block ace를 사용하고 나머지(항체, HRP, 항원) 용매는 전부 PBS 사용합니다 . 아 비드 작용기는 tosylate 입니다 .
회원작성글 오늘뭐먹지  |  08.30
Q. 식물 잎에서 특정 성분을 추출하기 위해서는 어떻게 해야 하나요 ㅠㅠ
폐의약품의 식물에 대한 영향을 알아보는 고1입니다. 식물에 약을 녹인 물을 계속 줘서 식물의 생장에 대한 연구와, 식물이 성장한 후에 식물의 잎에서 약 성분을 추출해보는 실험을 하고자 합니다. 약 성분을 추출하는 실험 방법을 인터넷에서도 도저히 못 찾겠어서 질문 올립니다ㅠㅠ  
회원작성글 city of st..  |  08.30
Q. 알긴산나트륨과 클로로필a 결합
아세톤으로 추출한 클로로필a를 알긴산나트륨과 결합시킨 후 비드를 형성하려고 하면 알긴산나트륨에 추출한 클로로필a를 넣고 에멀젼화 시켜야하나요? 아니면 그냥 넣고 섞기만 해도 되나요?
회원작성글 luxxuria  |  08.28
Q. 염산염에 관한질문
1.경구약을 먹게되면 각종 성분들이 대부분 a염산염 b염산염 처럼 염산염이 붙는데 이성분들이 물에 녹게되면 a(+) hcl(-)가 되는건가요? Hcl도 h(+) cl(-) 이온화가 되는건사요? 물에녹인후 ph측정을해봐도 산성이 아니라서 더욱 헷갈리네요. 2. Hcl염을 만들기 위한 과정은 몇가지 논문도 보고해서 알겟는데 hcl염을 제거하는건 중화반응으로 제거하는건가요? 1번질문에서 hcl(-)상태로 존재한다면 중화반응시키는게 불가능한거 아닌가요? 3. 실험에서 물이 필요하거나 물생성이 일어나는 반응이라면 굳이 free-base 상태로의 추출과정은 생략하고 a염산염수용액으로 처리해도되는걸까요?
회원작성글 G694677  |  08.25
Q. 바이오 에탄올 관련 질문 드립니다
옥수수 가루를 만든 후 증류수를 붓는다. 액화효소(글루코 아밀라제)를 넣어 90도로 액화 한 후 셀룰로스를 당으로 분해한다. 그런 다음 60도에서 (베타 아밀라제)를 집어 넣어 분해공정을 거친다. (옥수수가 가진 세포벽을 분해해 알코올 생산에 용이한 단당류로 전환) 1시간동안 당화과정 거침 32도에서 활성건조효모 넣어 배양   이렇게 계획을 수립해 봤습니다, 문제는 베타 아밀라제를 구하는 건데 아직 고등학생이라 시약이 너무 비싸 구하지 못할 것 같습니다.. 베타 아밀라제를 대체할만한 효소가 있을까요?
회원작성글 qwe851  |  08.24
Q. 고등학생 - calibration curve 이렇게 하면 되나요?
녹말 calibration curve 그리려고 하는데요   blank - 증류수 / 2번 cell - 녹말 1mg/mL / 3번 cell - 녹말 2mg/mL / 4번 cell - 녹말 3mg / mL / 5번 cell - 녹말 5mg/mL   이렇게 해보려고 하는데 괜찮을까요
회원작성글 캐츠  |  08.23
Q. 고등학생- calibration curve 조언 부탁드려요!!! ㅠㅠㅠㅠ
안녕하세요, 실험 중에 녹말의 calibration curve를 그리는 과정이 필요해서 질문드립니다 calibration curve 그릴 때 x축의 녹말 농도는 어떤 값으로 설정해야 하나요? 그리고 몇 개를 한 후에 curve를 그리는 게 타당한가요?
회원작성글 캐츠  |  08.23
Q. unit 질문
소화효소제에서 1포에 아밀레이스 500,000 unit 이 있다는데 여기서 unit 단위가 뭔가요?
회원작성글 캐츠  |  08.23
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