안녕하세요~ 항상 유익한 답변 감사드립니다. flow cytometry 데이터에서,, 흔히 n=3~5로 실험을 합니다. ctrl과 treated군 이렇게 두 개를 비교한다고 할 때, 특정 cell population의 frequency를 dot plot으로도 나타내고, flow cytometry 데이터도 1개씩만 representative 로 싣습니다. 이 때 dot plot에서 평균값에 가까운 flow cytometry data를 싣다보면 ctrl과 treated에서 서로 다른 개체의 data를 써야하는 경우가 종종 있습니다.   서로 다른 개체의 data를 사용해도 문제 없는지 궁금합니다. 면역학 고수님들의 고견을 부탁드립니다 ㅠㅠ   미리 감사드립니다!

oct embedded 4um tissue section을 염색하려고  PBS에 slide를 20분간 넣고 oct removal을 진행했더니 조직 바깥쪽이 같이 떨어져 나가는데  무엇이 잘못된걸까요?  조직은 Formalin-OCT embedded brain tissue 입니다.

  와 이게 뭘까요? 분홍색.. 조직은 12개월 마우스 eWAT이구 H&E한 결과입니다.. 처음보는건데 이게 뭘까요?

현재 inflammation model을 만드는 실험을 하고있습니다..! 다만 제가 아직 부족한 닷인지 immune cell infiltration과 peyer's patches의 구분이 어렵습니다... 염증을 유도한 intestine 조직을 H&E staining을 진행했는데, 해당 부분이 infiltration이 일어난 부분이 맞는지, 아니라면 peyer's patches 부분인지 구분이 안 갑니다. 확실히 구분이 가능한 방법이 혹시 있을까 싶어 도움을 청합니다! 선배님들의 도움 기다리겠습니다. 감사합니다!

안녕하세요 지금 학부연구실을 다니고 있는 학생입니다. masson's trichrome 염색을 진행을 하고 있는데, 폐에서는 collagen 염색이 너무 안돼서 어떻게 해결을 해봐야할지 여쭤봅니다. 염색을 너무 적게하는가 싶은 생각이 들지만, aniline blue solution에 담구는 시간은 40분 정도 담궈 둔 상태에서 염색을 진행을 한 뒤, 그 후 D.W에 10회 tapping을 진행 한 뒤 1% acetic acid에 10분 가량 더 담군 후 dehydration 과정을 거치고 70%~자일린까지, 여기서 문제가 될만한 점이 있는지 아니면 수정을 해야할 점이 있는지 여쭤봅니다.

돼지피는 혈액형이 인간보다 많은 걸로 알고있는데 ABO시약을 돼지피에 넣는다면 하나라도 응집되는게 있을까요? RH+,- 여부도 알고싶네요

   CB에서 CD3를 아웃시켜주었습니다 분화 6일차에 CD56 값은 증가하였는데 웬 CD3가 생겨났어요 ㅠㅠ.. 실험 고찰을 적어야하는데 왜인지 감이 안잡힙니다 도와주세요 ㅠ.ㅠ

K562로 NK92 cytotoxicity calcein assay 했는데요   NK 효율 평균치 계산해보니 E:T ratio 10:1 = 90.8 5:1 = 88.6 2.5:1 = 76.8   이렇게 나왔는데 사수선배가 값을 보니 saturation된걸 알 수 있다는데 그게 무슨 말인거죵...? 그리고 10:1과 5:1 데이터 값이 별로 차이가 없다는건 NK가 자신의 역할을 다해서라는데 그건 또 무슨 말이죠 ㅠㅠ.ㅎ   당장 질문하고싶은데 자리에 안계시고 이제 주말이라 궁금해서 브릭에 올려봅니다ㅠㅠ 

보통 transfection하고 난 뒤에 media change를 해줄 때 chemical을 처리하나요? chemical 을 먼저처리하고 transfection을 하나요

안녕하세요 세포를 Confocal dish에 배양을 해서 Confocal을 찍으려고 합니다. 논문에서 Protocol을 보고 배우는 중인데 Confocal dish를 사용하면 coverslip으로 안덮고 찍으면 되는건가요??? PFA로 고정 후 DAPI 처리 후 그냥 찍으면 되는건가요??

파라핀 섹션으로 dab staining 을 하는데요~ 첨부사진과 같이 얼룩이 나타나는 현상이 있습니다. 처음에는 signal 인줄 알았는데, control tumor 조직이나 약물처리 tumor 조직이나 antigen retrieval 을 하나 안 하나 안티바디의 종류에 상관없이 무작위로 나타났다가 없다가 하더라구요.  wash 문제같기도 한데 똑같은 날 똑같은 tissue, 똑같은 protocol 로 염색을 해보면 2장중에 1장은 저런게 나타나는 경우가 자주 있습니다. 혹시 이유를 아시거나 이 문제를 해결하기 위해서 조언을 부탁드리겠습니다. 저만 이런 상황을 겪은건지도 궁금하네요

현미경 확인을 했는데 염색이 많이 씻긴건지 시간이 충분하지 않았는지 확신할 순 없지만 염색이 제대로 되지않았습니다.. 자일렌에 담궈서 마운팅 미디엄 녹여서 커버글라스 제거하고 다시 염색이 가능할까요? 콩고레드염색을 진행했고, 카운터스테이닝은 헤마톡실린으로 진행했습니다ㅠ

면역항암제인 키트루다 ,옵디모 처럼 anti PD-L1이 PD-L1에 결합할 때의 화학적 원리가 궁금해요  반대로 anti PD-1이 PD-1에 결합할 때의 적용돤 화학적인 이론들을 알고 싶어요 보고서 작성하려고 자료조사하는데 어려워서 도와주세용!! 추가로 anti pd-l1이 결합할때 염이 생성되는 것도 확실하게 이해를 못해서 이와 관련하여 아시는 분이 계시다면 무지한 저에게 큰 가르침을 주시길 바랍니다,,  

안녕하세요? Mouse cancer xenograft model 을 연구중인데요. Cancer cell injection 시 matrigel 을 이용해서 model을 만들고 있습니다. 이번에 cancer 조직에서 collagen 이나 tissue connective molecule들을 염색해서 보려는데 matrigel이 collagen IV와 laminin 이라는 성분으로 이루어져있다고 해서요. 물론 1주일 뒤면 없어진다고 해도 종양이 형성되면서 종양내에 collagen에 영향이 있지는 않을까 해서 여쭤봅니다. 혹시 sirius red나 trichrome 염색에서 matrigel 에 영향이 없을지 궁금해서요. 혹시 아시는분이 있다면 알려주세요.

별에 별짓을 해봐도 기포가 안빠집니다 살려주세요 푸ㅠㅜ 퍼마운트가 문제인건가요??  슬라이드에 커버도 세밀하게 하고 기포도 다빠진거같다 생각했는데 현미경으로 보면 이렇게 보입니다 그리고 조직 바깥쪽부분이 제일 많이있어요.. 어떻게해야할까요 푸ㅠㅜㅠㅜㅠ

 rabbit anti-chmp4c 2차 항체로 goat anti-rabbit cy5와 donkey anti-rabbit 405와 goat anti-rabit 488중 무엇을 쓸 수 있나요..? 무엇을 언제 써야하는지와 이유를 잘 모르겠습니다ㅠㅠ 세시간째 알아보는 중인데 답을 구하지 못하겠습니다..

  1차 항체로 mouse anti-GAPDH가 쓰인 경우 2차 항체로서 goat anti-mouse Alexa488과 donkey anti-mouse Dylight405모두 사용할 수 있나요?    

TUNEL staining 에서 고정된 샘플에 label 과 enzyme을 붙이고 incubation 하잖아요, 이때 염색약이 잘 붙는 온도가 incubation 온도에서 잘 붙고 결과적으로 형광을 잘 띄기 때문에 incubation 하는 건가요?  왜 RT에 두지 않고 incubation 하는 이유가 궁금하네요 고정한 세포이기 때문에 incubation 온도 영향이 세포에 미치진 않을 것 같은데...

  안녕하세요.  immunology 연구를 시작한지 얼마 되지 않아 궁금증이 있어 질문글을 올립니다. CD3 IHC 조직을 보는 중 CD3의 발현이 원형을 기준으로 되는것을 계속 볼 수 가 있는데, 저 원형을 기준으로 발현이 되는 이유가 무엇인지 알 수 있을까요?   

이번에 lymphocyte 와 splenocyte 에서 intracellular cytokine staining을 진행하게 되었는데요,보고자하는게 여러가지라, fixation 을 하고 여러가지를 분석해봐야할거 같아요. fix& perm후 surface staining 과 intracellular cytokine 을 보려하는데, fix 후 4도에서 얼마나 샘플들이 괜찮을까요? 또한 프로토콜들을 보니 surface staining 을 fix 전에 하길 추천하던데, fix 하고 해도 괜찮은지 궁금합니다.