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Q. |
랫드, 마우스 케이지 관리 리스트 |
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안녕하세요, 동물실험실에서 일하고있어요.
랫드랑 마우스 케이지 청소 등 할 때 관리 리스트 작성해서 관리하시는 분들 있으실까요?
리스트 어떤식으로 이루어져 있는지 알려주시면 감사하겠습니다..!
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콩콩삐 | 01.30 |
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Q. |
Water saturated n-butanol 제조 |
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TLC전개를 위해 Water saturated n-butanol을 제조하고자 합니다.
n-butanol과 3차증류수를 1:1비율로 혼합한 후 분리된 수층 제거 (해당 과정 2회 반복)하여 맨위층의 용액만 회수하였으나 용액이 saturated 되지 않은 것처럼 보입니다.
제조 결과는 아래와 같습니다.
무슨 문제때문인지 아시는 분 계실까요 ㅠㅠ
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Levilactob.. | 01.27 |
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Q. |
centrifuge tube 용량 질문 |
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안녕하세요! 질문 하나 드립니다..!
centrifuge conical tube 최대 어느 정도 용량으로 넣고 사용 가능할까요?
competent cell 제조하려 하는데 50ml conical tube에 50ml을 넣고 원심을 해도 될지 의문이어서 여쭤봅니다..
tube 용량 꽉 채워 원심 해도 되는지 궁금합니다
답변 기다리겠습니다 감사합니다!
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오아이 | 01.27 |
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Q. |
phspho protein 웨스턴 블럿 잡band |
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phosphorylated protein 웨스턴 블럿시 nonspecific band가 찾고자하는 band를 구분할 수 없을만큼 많이 생기면 어떻게 해결해야하나요..? phospho protein이라 skim milk를 사용할 수 없어서 5% BSA로 blocking, 항체처리를 하고 있는데 blocking 시간을 늘려보기도 하고 항체 농도를 바꿔봐도 진전이 없습니다ㅠ |
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Labtor | 01.27 |
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Q. |
웨스턴블롯 젤이 너무 안굳어요 |
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그전까지는 이런적 없는데 stacking gel을 넣고 한10~15분뒤에 보면 다 사라져 있어요.. 분명 그전이랑 똑같이 만들었는데 최근에 계속 이런 일이 생기는데 왜그런걸까요ㅠㅠ?
혹시 아시는분들 알려주세요..
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고고씽 | 01.27 |
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Q. |
안녕하세요 Campylobacter를 배양하려고 하는데요 질문이 있습니다 |
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현재 저희 실험실 deep freezer에 캠필로박터 stock이 있어서 이걸로 배양하려고 하는데요 실험 하기전에 동정 맡겨보려고 합니다
제가 궁금한 것은 식품공전을 보니까 modified campy blood free 한천 배지, abeta-hunt blood 한천배지, preston 한천배지 등등에서 분리배양한다고 되어있는데 NA배지에 배양하면 안되나요..?
NA 배지가 대부분의 미생물 배양할 때 사용한다고 하는데 캠필로박터는 호염성이고 미호기성세균이라 좀 까다로워서 안될지 궁금해서 여쭤봅니다
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초보원생 | 01.27 |
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Q. |
cell cycle 분석을 위한 PI staining시 control에 sub G1 문제 |
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제가 cell cycle stage분석을 위해 PI staining을 하는 중인데,
문제가 G1 peak 왼쪽에서 대조, 실험군 모두 균일한 20%의 population을 보이고 있습니다. 처음에는 제가 cell 관리를 잘못하여 실제 sub G1 population인가 하였지만, brdu-7aad kit로 염색하였을 때에는 sub G1 population이 보이지 않는 것으로 보아서는 실험단계중에서 문제가 생긴 것 같은데 도저히 모르겠어서 질문합니다..
일단 프로토콜은
1. trypsin으로 cell harvest 후 PBS wash ( 1200 rpm, 상온 )
2. cold PBS 500 ul로 resus.
3. -20도에 보관해둔 75% 에탄올 3ml을 vortexing하면서 (기계에 따라 강도가 다르지만 가장 약한 세기로 합니다) 떨어뜨려 fix 후 4도씨에 최소 2시간 incubation
4. 에탄올 원심분리로 제거 후 cold PBS 2ml로 wash * 2 ( 1500 rpm, 4 도)
5. RNase A가 들어있는 PBS 500 ul (100 ug/ml)로 resus 후 37도 water bath에서 30분 incubation
6. PI가 들어있는 PBS 500 ul (50 ug/ml, 최종농도 25 ug/ml) 추가 후 상온에서 15~30분 incubation 후 바로 detection
입니다.
추가로 결과 첨부하겠습니다. FSC-A/SSC-A, FSC-H/FSC-A gating 후 PE channel에 대한 histogram입니다.
고수분들의 도움을 요청합니다.. 읽어주셔서 감사합니다.
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jsjsjs1212 | 01.27 |
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Q. |
세포해동 |
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학부생입니다. ㅜㅜ오늘 교수님이 세포 해동 하시는걸 보여주셨는데, 너무 훅 지나가서 스스로 정리 해봤습니다. 이상하거나 틀린 부분이 있나요?
1. HaCa T 8&9 cell을 tank에서 꺼낸다
2. water bath에 packing이 물에 잠기지 않게 cell을 녹여준다
3. media 소분 해주기50ml
4. HaCa T세포 와 media를 15ml 튜브에 1:3 or 1:4로 넣는다 - cell stock 안에 보존액과 불순물을 washing 하기 위해
(배지 만들기)DMEM 에 fbs 10퍼 항생제 1퍼
45:5:0.5
4. 세포를 푼 15ml 튜브를 centrifuge 돌린다. 1분 1500rpm
5. 그동안 배양할 dish에 해동날자와 세포이름 계대횟수를 적어준다.
6. 15ml 튜브를 suction 하여 cell만 남긴다.(거품부터제거한다)
7. pellet에 media를 넣어 섞어준다.
8. dish에 9ml media 를 넣는다
9. 7에서 섞은 cell들을 1ml dish에 옮긴다
10. 뚜껑에 튀지않게 잘 섞어준다 |
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몽몽뭉뭉 | 01.27 |
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Q. |
JNK 질문이요 |
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안녕하세요
p-JNK를 보고 JNK를 확인하려니 JNK1 안티바디와 JNK2 안티바디가 각각 있네요
이럴땐 어떤걸로 토탈을 확인해야할까요?
고맙습니다
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졸려요 | 01.27 |
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Q. |
시퀀싱에서 점돌연변이가... |
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시퀀싱보낸 plasmid서열에서 점돌연변를 발견했는데 CGG가 AGG로 바꼈습니다. 워블법칙덕분에 아미노산이 둘다 아르기닌으로 번역되는 걸로 확인해 운이 좋았지만, 이 plasmid안의 insert DNA는 codon optimization을 진행했던거라서 번역과정에서 영향이 있지는 않을까 걱정되는데..... 그냥 써도 되나요?
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대학원생(진) | 01.27 |
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Q. |
금나노 합성 실험  |
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항산화 효과가 있는 식물자원을 우려서(속슬렛 추출법) 염화 금산을 환원시키는 실험을 했습니다. 원래 생성된 금나노입자가 크면 푸른빛, 작으면 붉은빛으로 알고 있는데 이 사진에서 그 중간 색깔은 아직 입자가 생성되지 않은 건가요? 아님 아주 미세한 입자인 건가요?
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다시말미잘 | 01.27 |
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Q. |
H2O2농도별 IC50 |
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안녕하세요
질문이 있어서 이렇게 글을 남깁니다.
IC50값을 구하고 western 해보려고 H202 treat하고 cell harvest해야하는데
어떻게 양을 맞추엇 만들어야할지를 몰라서요 ㅠㅠ
lM stock solution (1ml) : 102ul + 898ul
0 / 0.1 / 0.5 / 1 / 10 / 30 / 100 / 300 / 1000 (uM) 입니다....
어떻게 구하면 될까요?ㅠㅠ
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Skskghfh | 01.27 |
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Q. |
직선성 실험 |
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안녕하십니까 직선성 실험에 대해서 여쭤보고 싶은것이 있습니다
직선성이 나왔다고 판단하는 기준은 무엇인지 궁금합니다.
기울기가 1이 나왔거나 이런걸로 판단하는건가요???
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뉴진스 | 01.27 |
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