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 카테고리: 전체 > Laboratory Animals > Animal Models
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질문/투표/프로토콜 등록
Q. db/db genotyping 문의드립니다.
db/db mice genotyping 문의드립니다~ LepR 와 Neo primer를 이용해서 Hetero, db/db, WT 을 확인하려고 하는데요. 여러가지 annealing온도로 돌려보았을 때, 56도에서 비교적 밴드가 선명하게 보이는 걸 확인했습니다. 근데 밴드가 비교적 선명하게 보인다고 해도 구분할만큼의 선명도는 아니라서 문의드립니다. 1. 다른 db/db genotyping 문의들을 봤을 때 ,PCR 수행후, Rsa1제한효소를 처리해서 확인하는 방법을 사용하는 것으로 보이는데, 제가 하는 방법도 괜찮은 건가요? 2. 밴드가 희미하게 뜨기 때문에, annealing온도를 많이 바꿔보았고, 그나마 57도에서 밴드가 확인이 되었는데, annealing온도 이외에 바꿔볼 수 있는 조건이 무엇이 있는지, 있다면 어떻게 바꾸는 게 좋을까요? 답변주시면 감사드리겠습니다 ㅠㅠ  오랜시간 해결이 되지 않아서 이렇게 문의드립니다. 감사합니다.
회원작성글 student EH  |  2020.09.03
Q. 탈모 동물 모델 실험 질문입니다.
안녕하세요.   Androgen dependent 탈모 동물실험을 하려고 하는데,  제가 찾아본 논문에 의하면  Testosterone을 vehicle (ethanol/propylenglycol 90:10)에 녹입니다.   여기서 prophylen glycol을 어떤 grade로 사용해야 하는지 여쭤봅니다.   또한, 실험 해보신 분들 중 위의 vehicle 말고, 다른 vehicle을 사용하셨다면, 뭘로 사용하였는지도 궁금합니다.   감사합니다
회원작성글 CNUVET  |  2020.08.25
Q. C57BL6/J mouse에 stz 재투여시 질문이 있습니다..
안녕하세요. 질문이 있습니다.. 1형당뇨 유발을 위해 50mg/kg으로 5일간 투여를 해서 당뇨를 유발했는데요. 공복혈당이 거의 유도가 안된 수준으로 나와서 재투여를 하려고 합니다.   100mg/kg 정도로 단회 투여 한번 정도로 하고 하는게 맞을 지.. 똑같이 50mg/kg으로 5회 투여를 하는 것이 맞을지..   아니면 다른 방법이 있는지.. 좀 도와주십시오..ㅠ
회원작성글 지구왕  |  2020.08.24
Q. 당뇨병질환모델 mouse 종류를 알고 싶습니다.
안녕하세요. 오늘도 연구를 위해 고생하시는 모든 연구원분들께 감사인사드립니다. 다름이아니라. db/db로 당뇨병 연구를 진행하려하는데, db/db 그리고 japan KK mouse(인슐링 비의존성 당뇨모델) 말고 당뇨 질환 모델의 mouse 알고계신 분 있으실까요?
회원작성글 오뜨  |  2020.08.22
Q. STZ-nicotinamide로 당뇨유발 시 nicotinamide는 아무거나 써도 되나요?
안녕하세요.   Streptozotocin과 nicotinamide로 mouse에서 당뇨를 유발시키려 할 때   nicotinamide는 Sigma 제품 중 아무거나 써도 되나요?   Sigma 제품인 건 알겠는데, Sigma 것도 다양하게 있어서 질문드립니다..    
회원작성글 nodneb  |  2020.08.21
Q. 마우스 현명하게 정리 하기.
마우스가 번식을 많이해서 케이지가 모자랄 정도 입니다.   종류가 여러가지 인데, 지노타이핑하고 결과 나오는 데로 더 이상 번식 하지 않게 암수 구분해서 라벨 후 정리 하고 있습니다. 개체수가 많아지면 불필요 한 것은 그냥 죽이는 것이 깔끔 할까요?   번식을 굳이 할 필요도 없고, 관리만 힘들어져서요.   보통 이런 경우 어떻게 정리 하는 것이 현명 할 까요?
회원작성글 동물연구  |  2020.08.03
Q. Huh7 이나 HepG2 세포의 tumor 형성이 잘되는지요?
HCC 세포인 Huh7, HepG2 세포의 SQ tumor나 orthotopic tumor가  잘 형성되는지 궁금합니다. 혹시 두 세포간의 tumor 형성능력의 차이가 나는지도 경험이 있으신분의 결과를 듣고싶습니다. 
회원작성글 amorfati_K..  |  2020.07.24
Q. mice로 MCAO 중입니다 첨부파일
안녕하세요, 10주령 c57bl/6J로 MCAO 중입니다.. MCAO 후 하루 뒤에 ICV injection을 해줘요.. 네.. 쥐들에게 데미지가 엄청 크죠.. MCAO나 ICV injection이나.. 아무튼 이 찍찍이들을 수술 후 7일간 살려서 MRI를 찍어야 하는데요.. 쥐가 너무 잘 죽습니다.. 혹시 프로토콜 점검이나 살리기 위한 좋은 팁 있으면 조언 부탁드립니다..ㅠㅠ   다음은 저의 수술방법입니다. * 수술 직전 마취된 상태에서 케토프로 진통제를 주사해줍니다. 말이나 소의 Recommand 용량만 나와있기에 참고해서 100g 당 3ul 들어가야하는 것으로 기준을 잡았습니다. 약물 원액을 100ul/10,000ul 로 희석한 뒤 마리당 56~76ul를 injection 해줍니다.. (이때도 한번 더 saline으로 희석해서 56~76ul/200ul 을 injection 합니다) 주사는 그냥 간편하게 목덜미에 피내주사 하고 있습니다. * MCAO 수술시간은 절개에서부터 봉합까지 24분? 정도 걸립니다. 정말 빠르게 하면 17분까지 줄일 수 있고요. (그렇다는 말은 occlusion 까지 걸리는 시간은 15~21분이라는 의미입니다) * doccol 실 602134 로 90min간 occlusion 후 reperfusion을 시켜줍니다. * 수술 후 3시간 ~ 6시간은 heating pad에 올려두고요 (사실.. 사람용 작은 장판판을 따로 구비해두고 케이지를 그 위에 올린 뒤, 케이지 내부 온도를 34~38도로 맞추어둡니다) * 수술 후 매일 4~7시간에 한번씩 들어가서 (보통 하루에 3번 들어가는 것 같아요) 체온이 떨어진 애들은 위의 heating pad나 열을 내는 램프를 통해 체온을 뎁혀주고요. 시간없을 때에는 20분 정도 밖에 못할 때도 있지만, 대개는 2시간 정도..? 체온이 올라갈 때까지 해줍니다.. 그렇게 체온을 올려놓으면 기력이 좀 회복되지만 거의 죽을 때즈음인?? POD5일즈음 되면 체온을 올려놓아도 스스로 체온을 회복하지 못하고 몸이 식습니다..(^^,, 그것때문에 일부러 밥도 든든히 주는데..하..) *  위에서 만든 진통제를 수술 당일부터 3일동안 한번씩, 총 3번 주사해주고 있습니다. 보통 56~60ul 정도로 들어가는 것 같습니다. 항생제는 따로 사용하지 않고 있습니다. * 경색이 온 애들은 대부분 스스로 식사도 못해 사료를 그라인딩하여 직접 섭취해주고 있습니다.하루에 두번 정도..? 위내투여는 해봤다가, 사료가 침전되고 액체속에서의 고체로 다시 뭉치는 경향이 있다보니 존대에 압력이 걸리더라고요, 그래서 쥐한테도 좀 많이 위험해서 그냥 주사기 바늘 빼고 마우스 입에다가만 흘려넣어주고 있습니다. 그렇게 하면 사료 농도도 진하게 해서 투여할 수 있어서 좋은 것 같습니다. * 보통 이렇게 하면 POD4~5일까지는 대개 사는 것 같습니다. 생명을 거의 붙잡아놓는 수준인데.. 체중을 재어보니까 26g짜리 쥐가 POD5~6일에 14g~15g까지 빠집니다.. 경구투여까지 해주는데도요..     5마리 수술해서 POD1에 2마리 죽고, POD5 새벽에 1마리 죽고, POD6 새벽에 정말정말 아끼던 1마리가 죽었네요.. 하..^^,, 나머지 한마리는 POD1부터 그냥 엄청 건강해서 통통 뛰어다니고 이소룡처럼 마구 싸돌아댕기며 이것저것을 해보려는 쥐에요, 수술 전보다 끊임없이 손에 잡히는대로 먹어치워요.. 돼쥐.. 아 가끔 이런 쥐들이 있는데, 솔직히 놀랐어요, 수술전에 체중은 25g이라면 POD7에 쟀을때에 28g..? 다른 아픈 쥐들은 14,15,16g 인데.. 와우   아무튼 경색 왔다고 생각한 쥐들이 전부 죽어버려서 현타가 오네요.. 이렇게까지 했는데 ..^^^.. 뭐를 잘못한걸까요..? 핳핳 경색이 잘와도 너무 잘와서 죽어버리네용 occlusion time 90분에서 더 줄이고 싶은데 저렇게 간신히 부여잡은 쥐들 데이터가 몇마리 이미 나와버려서 교수님이 허락 안해주실 것 같아용 뭐가 잘못된걸까,, 나는 최선을 다했는데 쥐들은 살려고 노오력을 안하네요   다른 분 말씀으로는 POD1에 많이 죽고 점차 쥐들이 시간지나면서 회복된다는데.. 저도 물론 POD1이 고비이기는 하지만 저는 점점 시간 지날수록 애들이 죽어가네요.. 하루가 다르게 체중도 마구 빠지고.. (심지어는 체중 잰지 4시간 뒤에 재봤을 때에도 순식간에 체중에 빠져있더라고요.. 하긴.. 하루만에 2~3g이 빠지는 애들인데요..실시간으로 빠지겠지..)   왜그럴까요?ㅠ 왜 저는 시간 지날수록 애들이 회복되고 살아나는게 아니라 죽어나갈까요? 경구투여를 너무 자주하면서 손타서 죽은걸까요, ㅠㅠ 체온 뎁히느라 heating pad에 자주 꺼내놓아서 그런 것일까요.. 항생제를 주지 않아서일까요.. 그냥 냅둬야 하나,, 죽을 애들은 죽어랏 라는 심정으로..   도와주세요..ㅠㅠ.. 흑.. 진짜 농담조로 저 놈들이 내 VIP 환자라고 하는데.. 그 VIP환자가 계속 죽어나가니 현타가 옵니다.. 정말 이렇게까지 해야하는 실험인걸까.. 아니면 다른 사람들은 이렇게까지 안해도 MCAO 잘만 하는데 나만 그런건가..? ㅠ 이런 생각들로 너무 우울해집니다..
회원작성글 =ㅅ=  |  2020.07.14
Q. 고지방식 컨트롤 사료
HFD 모델링하려고 합니다. 논문에서는 보통 곡물사료를 컨트롤로 사용했는데 업체에서는 정제사료를 권합니다. 이게 맞는거 같긴한데 가격이 사악하네요. 경험있으신 분들의 의견 구합니다.
회원작성글 BICOCO  |  2020.07.14
Q. 동물실험 투여 시약 만들기
계산 초보 입니다. 마우스 6마리를 마리당 0.3 ml를 매일 하루 한번 복강 주사 하려고 합니다 약 39일 동안 입니다. 1.4-DCQA 를 3ug/ml 농도로 투여 하려고 합니다. 희석은 생리식염수로 합니다. 어떻게 계산하면 될 까요?
회원작성글 동물연구  |  2020.07.08
Q. target gene O/E cell in vivo growth
저희 랩에서 target하는 유전자를 O/E 한 세포를  vector only 세포를 CTL로 해서 mouse 에 injection을 하였는데 현재 injection한 지 13일째인데, 100mm^3이 안되고 있습니다. 항생제를 처리해서 키워서 그런 것일까요?   세포주가 4T1이라 엄청 agressive한 세포주인데도 CTL experimental 모두 굉장히 더디 자라고 있어서 차이를 비교하기가 어렵습니다.   이유가 뭔지 아시는 분들 계실까요?   감사합니다.  
회원작성글 새슬  |  2020.06.30
Q. 마우스 실험관련
안녕하세요.  제가 동물실험을 처음으로 하게 되었는데, 마우스 구매부터 질문이 생겨서 동물실험을 많이 하신 분들께 질문드립니다. 업체에 직접 연락을 했는데 연락이 오지 않아 이곳에 질문을 남깁니다. 제가 질병마우스 모델을 구매해야 하는데요, 일단 마우스 모델은 정해졌습니다.    * 레퍼런스를 찾아보니 판매하는 곳이 Jackson laboratory나 MMRRC 을 가장 많이 이용하는 것 같았는데, MMRRC 이 곳도 마우스를 판매하는 회사가 맞나요?    * live mouse가 아닌, frozen tissue로 구매하고 싶은데, 위 업체들에서 그렇게 조직만 떼어서 판매 하는지요?   * Frozen tissue만 떼어서 구매할 수 있다면, age/sex등 조건을 두고 tissue 구매가 가능한지요?   * Frozen tissue만 떼어서 구매할 수 있다면, 마리당 가격은 보통 어느정도 인가요? 물론, 조건마다 다르겠지만 대략적인 가격이 궁금합니다. (예, 3-50만원/마리)     감사합니다.
회원작성글 왕쥐  |  2020.06.03
Q. mouse lung cancer stage에 대해 질문드립니다.
현재 mouse lung cancer model을 연구하고 있습니다. b16f10 cell을 주입해서 2주 3주 4주 각각의 H&E모델을 만들었는데 mouse lung cancer stage를 나누는 기준을 알 수 있을까요? 논문들을 찾아봤더니 early mid advanced 로 나뉘어져있는 것 같던데 사람에 비해서 나누는 기준같은 것이 잘 안나와있어서요 ㅠㅠ
회원작성글 AwesomeDri..  |  2020.06.02
Q. CT26 tumor model의 전이
혹시 CT26 cell line으로 BalB/C mouse 에 피하종양 생성 후, lung meta- 확인한 경험이 있으신 분 있나요? paper search 를 해보니 주로 lung metastasis model 만들 때 CT26 cell 을 i.v로 투여하고, s.c 모델에서는 전이가 잘 안일어난다고 하던데,,,, 제 실험에서는 s.c model 에서도 lung으로 전이가 되더라구요. 혹시 ref.를 알고계시거나 경험 있으신분 의견 부탁드립니다.
회원작성글 이예이  |  2020.05.26
Q. LMO - NOG mice, 유전자
NOG 계통명 : NOD.Cg-PrkdcscidIl2Rγgtm1 Sug/JicKoat : IL-2 receptor gamma chain을 knock out시킨 C57BL/6J-IJ-2R 마우스를 NOD/Shi-scid 마우스와 역교배시켜 개발한 immunodeficiency mouse 다음에서, 1. LMO 정보 입력하는데, 숙주생물체, 삽입유전자, 공여생물체 란이 있는데 다음에 해당하는 것은 무엇인가요? 2. NOD, SCID는 아는데 나머지 뒤에 붙는 Cg-Prkdcscid, tm1 Sug/JicKoat , Shi-, 6J-IJ-2R들은 다 무엇인가요? 논문에 보면 knock out, in, transgenic mice 표기에 어깨글자로 표기하는 것들이 많은데 볼줄 모르겠어요ㅠㅠㅠ 3. 역교배를 시켰다는 말은 자식이랑 다시 부모랑 교배 시킨건가요? 맞다면, 왜그렇게 하는거죠?
회원작성글 과학쪼렙  |  2020.04.23
Q. ApoE4 mouse 또는 Astrocyte cell line 으로 실험하시는분 계신가요!?
안녕하세요 !! 제목과 같이~ ApoE4 KI mouse 또는 Brain Astrocyte cell line (human and mouse) 으로 실험하시는분 계신가요!? ㅠㅠ 여러가지 지식적인 면에서 좀 여쭤보고 싶은 것들이 있습니다. 만약에, 계시다면.... 댓글에 메일주소를 남겨주시거나... zk61326@naver.com 여기로 연락 부탁드리겠습니다. 도와주세요 ㅠㅠ....
회원작성글 지나가는사람  |  2020.04.22
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