[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
커스텀텍
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
BioWave  Vol.25, No.2 (2023년 2월) 오픈
전체보기 안전점검 LABox
 카테고리: 전체 > Plant Biology
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
Omics Chemical biology Bioinformatics Laboratory Equipments
Buffer/Reagent Bioethics Etc.
카테고리 전체보기펼치기
질문/투표/프로토콜 등록
Q. dna sample 제작에 관련하여 질문이 있습니다.
안녕하세요 실험에 관심이 많은 고등학생입니다.   최근 동아리에서 브로콜리 추출 실험을 하였는데요. 방법은 브로콜리를 막자사발로 갈고 Lysis와 반응 시킨뒤 에탄올과 만나게 하여 dna를 얻었습니다. 추가실험으로 이 dna를 전기영동하려 하려고 합니다. 그러려면 위의 dna를 스핀다운하고 에탄올과  분리시키고 멸균수로 녹여 사용 하는것으로 알고 있습니다. 여기서 질문이 두가지 생기는 데요  1.위 과정~전기영동 과정까지 spin column을 사용해도 되나요?(여과목적으로) 2. 위 과정으로 전기영동을 할 수 있을 까요? (겔로딩이랑 프리메이드 아가로스겔은 구입하였지만 제한효소는 구입하지 못했습니다.)
회원작성글 ryul7957  |  2020.12.12
Q. 1/2MS 배지 pH가 너무 낮아져요!
현재 8개월 동안 계대배양해온 형질전환체가 모두 죽었습니다ㅠㅠㅠ   배지를 교반기 위에서 1/2MS, 3% sucrose, 그리고 0.3% gelrite 농도에 맞게 성분을 첨가한 뒤에 pH 측정기로 5.8까지 맞추었습니다.  오토클레이브를 한 뒤 petri dish로 분주 후 소량 남은 고형화되기 이전의 배지를 리트머스 종이에 올려보니 5.2~5.6 사이로 보여집니다... 고형화된 배지위에 리트머스 종이를 올려보았을 때에도 5.0~5.4정도로 보였습니다.  식물 형질전환을 하고 아그로박테리아를 제거하기위해 cefotaxime을 첨가 한 배지에서는 4.6~5.0정도로 보였습니다.  제가 배지를 잘 못만들고 있다는 것인데 왜 그렇게 pH가 낮아지는지 이해가 되지 않습니다... 선배님들께서 알고 계신 노하우를 전수해주시면 감사하겠습니다!!
회원작성글 실험실뵹아리  |  2020.12.08
Q. dna 추출 실험 관련하여 질문드립니다.
안녕하세요 실험에 관심이 많은 고등학생입니다. 최근에 동아리에서 브로콜리 dna추출 실험을 하였는데요, 급속 냉동 브로콜리의 경우 dna추출이 안되었고 생 브로콜리는 엄청 잘 되었습니다. 몇번을 해도 같은 결과가 나오더라고요. 여기에서 질문이 있습니다. 냉동이 브로콜리에 어떠한 영향을 주었기에 추출이 되지 않는 건가요?
회원작성글 ryul7957  |  2020.12.05
Q. 이미 말라버린 식물을 표본 만드는 법
전에 표본 할려고 가져온 식물sample을 밀봉 상태로 놔두다가 이미 입체적으로 말라버렸는데, 이걸로는 표본 만들 방법이 아예 없는건가요?
회원작성글 djdbgp  |  2020.12.03
Q. protoplast isolation 할 때 sucrose gradient 과정 중...
안녕하세요.  오늘 protoplast를 처음 다뤄본 대학생입니다. protoplast isolation 할 때 sucrose gradient를 했더니 중간에 protoplast ring이 생기고 밑에는 터진 cell들이 가라앉았습니다.  여기서 궁금한 점은 보통 cell이 터지면 centri 과정에서 위로 뜨지 않나요?     이때 사용한 sucrose는 21% 였으며, centri는 50xg로 7분 돌렸습니다. 그리고 한가지 더 여쭤보고 싶은것은 ring이 smear하게 나왔는데 centri 속도를 높혀야 할까요? 
회원작성글 djdbgp  |  2020.12.01
Q. elisa standard curve 질문입니다.
standard 8개로 지정하고 elisa 실험 진행후 od값 나온거 가지고 엑셀로 standard curve그렸는데요 r2값도 0.9991이고 각각 standard 튀지않고 잘나왔다고 생각했는데 r2값 위에 나오는 방정식에 대입해보면 실제 농도와 약간 오차가 생기는데 제가 실험 처음이라 맞는건지 모르겠네요
회원작성글 게임맨  |  2020.12.01
Q. 식물 성분 추출법
안녕하세요. 고1 학생입니다. 융합과학전람회를 준비하는 과정에서 식물의 성분을 추출하게 되었는데, 그 방법을 알려주신다면 감사하겠습니다. 최대한 자세히 답변해주시길 부탁드리겠습니다.
회원작성글 🐳달리🐳  |  2020.11.25
Q. progress curve, kinetic, sigma plot 관련 질문 제발요..
  enzyme kinetic study를 이용하여 ligana 종에서 α-glucosidase inhibitory 분리 분석한 논문을 주제로 발표를 준비하고 있습니다.. 타 전공이라 열심히 준비하고 있으나 너무 이해가 가지 않습니다ㅠㅠ 다음과 같은 식으로 이런 결과를 도출한 내용인데..  제발 이해되도록 설명 한번만 해주시면 안될까요? 각각의 값이 무엇을 나타내는지만 알려주세요ㅠㅠㅠㅠ제발..  
회원작성글 지토오  |  2020.11.24
Q. Gibson Assembly 질문 있습니다. 첨부파일
안녕하세요. 독일에서 석사논문 과정에 있습니다. Populus tremula, alba를 주재료로 실험 중입니다. 제 프로젝트 중에 Poplar sex master switch gene의 regulator를 프로모터 부분에서 확인하는 파트가 있습니다. 이걸 위해서 전체 유전자하나를 프로모터 포함해서 gDNA에서 PCR로 증폭(Phusion pol)하고 싶은데 거의 두달째 골치를 먹고 있습니다. 증폭이 너무 안되어서 gDNA의 GC 구성이 많아서 그런가 생각해봤는데 전체 gene의 32.67% 만 차지하고 있습니다. 제 생각엔 많은건 아닌거 같은데 많은거 인가요? 사용하는 프라이머의 GC가 너무 낮은거는 말이 되는게 for 45%, rev 55% GC가 함유되어 있습니다. GC를 더 많게 다시 프라이머를 짜야할까요? 1kb가 안되는 증폭은 두 프라이머 각각 잘되고 있습니다. (이때까지 amplification한 fragments 사진을 첨부했습니다. 색깔 막대기들이 성공한 애들이고 작게 회색으로 있는 네모들이 엑손들 입니다. 원하는 전체 Gene은 #3178+3176 입니다.) 이미 존재하는 fragment를 주형으로 사용한다는 생각은 미처하지 못하였고, Nested primer PCR은 최근에 사실상 처음들어 봤습니다. 이상적인 프라이머의 경우 GC가 얼마나 함유되있는게 좋은건가요? 저희는 보통 Primer3 웹사이트에서 디자인하기 때문에 제 스스로 결정한적은 아직 한번도 없습니다. 듣기로는 프라이머 첫, 끝 시퀀스는 G나 C로 하면 좋다는데 꼭 그래야하나요? P. tremula genome 경우는 이미 popgenie 웹사이트에 있기도 하고, 저희 연구소에서 Nature Plant에 등재한적이 있어서 그때 MiniOn sequencing으로 database를 만들었습니다. P. tremula genome 염기서열은 의심없이 바로 사용 할 수 있습니다. 여기까지 PCR을 만약에 해결했다면, pGEM-T Easy Vector로 클로닝하고 나중에 T-vector로 클로닝한다음 Poplar로 아그로 형질전환하는 아주 간단한 프로세스를 거치겠지만, 만약 그러지 못한다면...하고 고안해낸게 Gibson assembly였습니다. PCR을 한번에 성공 못시켰으니 이 gene을 앞, 뒤 두 파트로 나눠서 PCR한 다음, 그 둘을 이어부치는 실험을 하려고 합니다. 이때, backbone vector가 필요한데, 수퍼바이저 의견은 굳이 E. coli vector를 써야하나? 바로 아그로의 Binary T-vector로 가면 안되나 하는 것입니다. Thermofisher에 따르면 10kb 까지는 아무 vector나 괜찮다라고 해서...혹시 선배님들중에 Gibson assembly를 T-vector랑 해보신 분이 계신지 여쪄보고 싶었습니다. 주절주절 길었지만 잘 읽어주셔서 정말 감사합니다. 선배님들의 의견이 제 실험들에 정말 많은 도움이 되고 있습니다. 타지에서 실험하고 있지만 선배님들이 계셔서 정말 든든합니다! 다시 한 번 정말 감사합니다!!!
회원작성글 독일유학생  |  2020.11.22
Q. 식물 박사님들께 질문있습니다!!!
Poplar (P. tremula)를 갖고 실험하고 있습니다. Male tree에게 없는 gene을 Agrobacterium transformation으로 넣으려고 하는데, PCR로 전체 gene을 증폭하는게 쉽지않아 두파트로 나누어서 Gibson assembly를 하려합니다. 근데 Back-bone vector를 어떤걸로 해야할 지 잘 모르겠습니다. 인터넷에 있는 자료는 전부 commercial plasmid를 이용했는데, 저랑 수퍼바이저는 T-vector를 이용하고 싶습니다. 혹시 경험이 있거나 아이디어 있으면 공유할 수 있을까요? 감사합니다.
회원작성글 독일유학생  |  2020.11.21
Q. 솔잎에서 오일추출을 위한 용매추출법
에탄올을 이용한 유기용매추출법을 통해 솔잎에서 오일을 추출하려 하는데 회전식증발농축기로 농축을 하는데 농축이 되지 안아요 에탄올을 다 날리려 하는데 혹시 다른 방법이 있을까요?
회원작성글 jo nesbo  |  2020.11.18
Q. rice의 auxotrophic mutant에 관해 문의드립니다.
현재 벼에서 이용할 수 있는 auxotrophy는 무엇이 있나요? 또한 Arabidopsis와 같이 벼에서 만들어진 auxotrophic mutant가 있나요? 
회원작성글 wpdjf  |  2020.11.09
Q. 식물 원료 용매 추출법 유기용매 관련
여러가지 실험 논문들에서 식물성 원료를 추출할 때 메탄올이나 에틸아세테이트 등으로 추출하고 항산화능, 향균활성을 보는데 이들은 인체에 사용 못하지 않나요? 그렇다면 메탄올 추출을 진행하는 이유와   메탄올 추출물이 사용되어질 수 있는 범위와 식품, 화장품, 의약외품에서 사용허가된 유기용매를 알려주세요ㅜ
회원작성글 홍치  |  2020.11.09
Q. 식물 큐티클 층 에탄올 추출
동백나무와 소나무의 큐티클을 얻기 위해 에탄올 추출법을 사용하려고 합니다. 에탄올 추출시 추출물에 함유되어 있는 물질과, 큐티클 성분은 어느정도 포함되어 있는지 알고 싶은데, 관련 자료나 정보가 있을까요?
회원작성글 judike  |  2020.11.08
Q. 형질전환 실험 중 궁금한 점이 있습니다! 부탁드립니다!!
1. DH5a를 competent cell로 쓰는데 LB broth에 overnight culture한뒤에 다시 cell을 LB broth에 1%로 접종해서 2시간 배양한다고 합니다. 왜 굳이 2번 배양하는 것인가요?  2. 동결보존시에 10% glycerol을 넣는데 왜 하필 10%인가요? 3. competent cell에 vector를 넣어준뒤에 42도씨에서 1분 30초간 heat shock을 하는데 왜 하필 42도인가요?  4. heat shock을 하면 세포막의 인지질층에 틈이 벌어지고 vector가 세포내로 들어갈 수 있게 되고 다시 얼음에 넣어두면 인지질층이 닫히면서 안정화되는것이 아닌가요? 5. 원심분리시에 RPM과 시간은 어떻게 정하는 건가요? DH5a를 접종한 LB broth를 5000RPM/10min으로 원심분리하는데 이 RPM과 시간은 어떻게 정해지는 걸까요? 모르는 것이 너무 많네요ㅠㅠ 찾아봐도 원하는 답이 없어 이곳에 질문해 봅니다 도와주세요!
회원작성글 diamond  |  2020.11.03
Q. 잎 디스크 광합성 실험
잎 디스크 광합성 실험을 해 보려고 합니다. 이 실험은 나뭇잎을 펀치로 뚫어서 여러 개의 디스크를 만든 뒤, 주사기에 넣고 음압을 가해 해면조직에 물이 들어가게 하여 가라앉게 하고, 이를 다시 베이킹 소다를 넣은 물에 넣어 햇빛에 노출시켜주는 실험입니다. 이 잎들이 햇빛,물, 이산화 탄소에 노출되었으므로 광합성 작용이 일어나면서 해면조직에 산소가 차오르게 되고, 결국 위로 떠오르게 됩니다. 이로써 광합성의 조건을 확인할 수 있습니다. 이 실험은 보통 살아있는 식물(시금치, 브로콜리 잎, 케일 등)의 초록 잎을 펀치로 뚫어서 바로 실험을 진행하더라고요. 그런데 지금이 겨울이라 주위에  초록 잎이 살아있는 양지식물이 없어서 마트에서 시금치를 사서 진행하려고 하는데, 마트에서 파는 것들은 대부분 적어도 딴지 2~3일은 되었을 것이라고 생각합니다. 그런데 이렇게 딴지 2~3일 정도 된 식물에서도 광합성이 일어날 수 있을까요??
회원작성글 snu  |  2020.11.03
Q. 논문공부중인데 complementation에 대해서 이해가 안가는 것이 있습니다
막 입학해서 공부중인 새내기입니다  논문에서 depletion 시킨 유전자에 대해서 complementation 시킨다고 나와있었는데요 뒤에 덧붙여서 inactive mutant라고 나와있어서 이 부분이 이해가 안되네요 저의 생각으로는 knock down이나 knock out 시킨 mutant에  complementation을 시키면 기능이 회복된다고 알고있는데  회복은 됐으나 inactive하다? 앞뒤가 맞지않는것 같아서요  설명을 부탁드려요 
회원작성글 soonlok  |  2020.10.28
Q. 애기장대 mutant line구입 과련해서 변이에 대한 검증이 되있는 곳이 있을까요?
안녕하세요. 애기장대 변이체를 가지고 실험을 계획중인 석사과정 학생입니다. ABRC에서 대부분의 유전자의 변이체들을 판매하는 것을 확인했습니다. 그런데 보면 그중 대다수가 어떤 큰 프로젝트를 통해 T-DNA나 transposon insertion등으로 만들어진 개체들 같더라고요. 아마도 몇몇 라인들은 실제로 타겟 유전자가 재기능을 하지 못하는 지 확인되지 않았을 것이라는 생각이 들어서 믿고 구입할 수 있을지 염려가 됩니다. 같은 유전자의 여러 변이체 라인을 구입하면 좋겠지만 원하는 background품종에서 단일 유전자에 변이가 생긴 것은 구매의 폭이 상당히 좁은 경우가 많은 것 같아요.. ㅠㅠ. 혹시 다른 연구자들이 이런 자원센터에서 구입한 애기장대들에 대한 코멘트를 남기고 기록하는 곳이 있을까요? 아니면 다른 방법으로 목적 유전자가 재기능을 하지 못한다는 걸 알 수 있을까요??? 
회원작성글 후_추  |  2020.10.26
Q. 인삼뿌리 RNA 추출 미스테리
  인삼 뿌리에서 RNA 추출과 관련된 논문 서치를 해보면 서울대 농대와 경희대학교에서는 Q사의 plant RNA 추출 kit를 써서 2 ㎍의 RNA를 얻었다고 하는데 동일 KIT로 뽑아도 수율이 거듭 낮게 나옵니다.    colume형 kit이기 때문에 손을 타지도 않을텐데 이 미스테리를 어떻게 해결하면 좋을지 막막합니다.  kit의 lysis buffer를 알아봤을때 polysccharide는 CTAB으로 polyphenol은 PVP로 잡는다고 알고있는데 어느부분을 놓치고 있는지 모르겠습니다.   혹시 인삼 뿌리에서 RNA 추출 경험이 있으신분 조언을 주실 수 있다면 꼭 부탁드립니다. 감사합니다
회원작성글 진주린  |  2020.10.08
Q. total flavonoids 와 total polyphenols 함량에 관한 질문입니다.
제가 식물 추출물의 total polyphenols을 gallic acid를 기준물질로, total flavonoids를 catechin으로 분석의뢰 하여 분석을 완료하였습니다.   제가 알고있는 상식으로는 total polyphenols함량이 total flavonoids 함량 보다 높게 나와야하는 것으로 알고 있지만 저의 결과값중에는 total flavonoids 함량이 높게 나온 식물 추출물이 있었습니다. 그래서 검색해본 결과로는 기준물질에 의해서 나온 값이기 때문에 이런 수치가 나올수 있다는 정보를 확인 할 수 있었습니다. 하지만 정확한 이 결과를 discussion 할만한 reference 가 없다는 것입니다. 혹시 이런 경험이 있으신 선배님이 계신다면 reference 추천좀 부탁드리겠습니다. ㅠㅠ..
회원작성글 조성욱`1  |  2020.10.07
이전  11 12 13 14 15 16 17 18 19 20  다음
실험 회원 등급이란?
실험Q&A 회원등급안내
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크 광고