Q. 30% sucrose에 mouse brain을 얼마정도 담가 놓아도 될까요?   mouse brain perfusion 직후, vial에 4% PFA를 넣어 mouse brain을 담가 놓았고,  다음날 4% PFA 대신 30% sucrose로 바꿔 담갔습니다. 이는 다음과정으로 Cryostat section하기 위한 준비과정입니다.   이때, 30% sucrose에 얼마정도 mouse brain을 담가놓아야 section하기에 최적의 상태일까요? 그리고 최대 몇일까지 30% sucrose에 담가놓아도 될까요? (최대 보관기간)?

소(bovine) 조직 내 물질을 분석하는데 검량선 그릴때 blank조직이 필요해서요.. 열심히 찾아보는데 서칭능력이 부족한지 안나오네요.ㅠ 진짜 어디 도축장 발품을 팔아야하는지..

폐동맥 고혈압 관련하여 in vivo 실험을 할때 우심실 수축기 혈압 (RVSP), 또는 폐동맥 혈압(PAP)이  반드시 들어가는 데이터인 것으로 알고 있는데요  측정 방법이 1. 정맥 통해서 심장으로 들어가도록 센서 있는 카테터 삽입 2. 심초음파 이용  3. 센서달린 카테터 혹은 니들을 우심실에 직접 삽입 이 3가지 방법 중에 하나인 것으로 알고는 있는데  어딜가도 자세한 방법이나 영상이 없어서요 ㅠㅠ 혹시 측정해보신 분 있으실까요?   

동물시험 논문 디자인이 잘 이해가 안되서 질문 드려요.. 해당 논문의 실험군은 시험물질을 15일간 섭취하다가 질병을 유발하고 추가로 1, 3일을 더 섭취 했구요, 대조군은 시험물질을 15일간 섭취하고 질병을 유발하지 않고 1, 3일을 더 섭취했습니다. 바이오마커는 면역관련 사이토카인이구요.. 이 논문에서는 왜 실험군 대조군 모두 시험물질을 섭취하는 디자인으로 만든건지 이유가 궁금합니다. 예방 효과?를 보려고 한 걸까요? 제가 그동안 봐온 논문은 시험물질을 먹거나 안먹거나로 실험군, 대조군을 나누는 것만 봤는데 해당 논문의 의미를 잘 모르겠습니다. 추가로 이 논문과 동일하게 수행되었으면서 동일한 사람이 쓴 선행논문이 있습니다. 그 논문은 시험군에 질병유발하고 1,3,5,7,15일을 면역지표를 보았고, 대조군은 아무것도 안하고 1,3,5,7,15일을 면역지표를 보았습니다. 이렇게 따로따로 논문을 내면 두 논문사이에 통계처리가 안되서 두 논문을 비교하는게 무슨 의미가 있을지 약간 의아합니다.  후행논문에서 선행논문과 비교하여 봤을때 시험물질의 섭취는 면역을 조절한다고 언급하더라구요. 이렇게 비교할 거였으면 왜 한 논문에 싣지않고 따로따로 출간한 걸까요...(?)   제가 질문드린 논문은 International Journal of Molecular Science에 발간되었고 선행논문은 Journal of Clinical Medicine에 발간되었습니다.  논문 수 늘리려고? 일까요?   아시는분 답변 부탁드려요....

mouse 에 i.p 로 1mg/kg 주입하려 합니다. 대부분 마우스는 20g 이고 토탈 200ul i.p 하려는데 물질을 녹이는 것은 1% DMSO 입니다.  최대 몇 mg까지 녹일 수 있을까요? (더 녹일 수 있다면 10mg/kg 로 변경하려 합니다. ) 고수님들 도와주세용,,,

안녕하세요. 제가 계산문제만 나오면 머리가 정지가 되서 정말 간절히 질문을 드립니다. 답변 달아주시면 참고하여 열심히 공부 하겠습니다. 질문 내용은 제가 마우스 6마리에 물질을 투여를 할 건데요. 마우스 한마리당 20g입니다. 물질은 500ul 씩 투여를 할건데, 투여 물질은 Mixture로써 농도를 VEGF-A 100ng/ml, 특정물질 33nmol/20g이 되게 투여를 하려고 합니다 (Working 농도) 6마리에 500ul씩 투여하려고 6*500ul (3ml)을 여유분으로 4ml로 total volume을 만들려고 하는데요. 현재 제가 가진 VEGF-A의 Stocking 농도는 (100ug/ml), 특정물질 (1mM)입니다. Mixture 4ml을 만들기 위해서 DW에 VEGF-A (100ug/ml), 특정물질 (1mM)을 얼마나씩 넣어야 VEGF-A 100ng/ml, 특정물질 33nmol이 되는지 꼭 좀 답변 해주시면 감사드리겠습니다. 농도희석 계산식은 Working 농도/Stocking 농도 x total volume하면 stocking 물질을 얼마나 넣어야 하는지로 알고 있는데요. 계산 적용이 잘 안될 정도로 기초가 없습니다... 꼭 좀 도와주시면 감사드리겠습니다...

심근경색 모델을 만들어야하는데 레퍼런스나 방법을 아시는 분 있으시면 공유좀 부탁드립니다. 감사합니다. 

안녕하세요 현재 학부4학년으로 어류관련해서 실험하고 있습니다. 흰다리새우 품종을 대상으로 실험중인데 현재 흰다리새우는 cell line이 없지만 병원체에 감염된 cell이 필요합니다. 감염된 조직을 마쇄하여 상등액을 취하면 cell 수득이 가능한지와 가능하다면 cell counting이 가능한가요?

안녕하세요   연구 중에 knock-out mice가 필요하게 되어서 주문을 하려고 하는데, 이 분야를 처음 다루다보니 아무 정보가 없어서 혹시 선생님들 알고계시는 업체나 주문 방법을 알 수 있을까 해서 질문등록합니다.   감사합니다.

Mouse testis 조직을 paraffin block으로 제작하려고 하는데 저희 실험실에는 장비가 없어서 업체에 의뢰를 하기로 하였습니다. 업체에 문의해보니 4%PFA에 고정상태로 업체로 보내달라고 하셨는데요. 제가 paraffin block 제작 자체가 처음이라서요. 아예 과정을 모릅니다. 조직을 적출하면 washing을 하고 4% PFA solution에 24시간정도 넣어두고 이후에 업체로 보내면되는건가요? 아님 중간에 무슨 과정이 필요한가요? washing은 어떤 시약으로 하며 4% PFA solution에 24시간을 두고 보내면 배송과정동안 시간이 지나는데 24시간 이상 4% PFA solution에 조직을 넣어나도 아무 상관이 없는건가요? 제가 아무것도 몰라서 여기에 이렇게 질물하게 되었습니다. 답변해주시면 감사하겠습니다 ㅜㅜ

안녕하세요.  Mouse의 순환교배에 대해 알아보고 있습니다. 순환교배에 대해 자세히 나오지 않아 질문 올립니다. 혹시 순환교배에 대해 자세히 알고 계신 분이 있으실까요? (Random 교배에 대해서 같이 설명 부탁드립니다. 감사합니다.)

Balb/c mouse에 약물 투여 후 심장 채혈하는데 일부 mouse 심장에 하얀 딱지 같은게 붙어 있는데 잘 떨어지지도 않고 딱딱한 느낌인데 이게 뭘까요? 사진이 없어서 아쉽긴 한데 nude mouse에서는 못 본 것 같고, 약물을 투여하지 않은 control group에서도 몇 마리 있었거든요. 혹시 이게 뭔지 알고 계신 분 있을까요?

안녕하세요 :-)  동물실험을 처음 해보는 학부 실험생입니다.. ㅜㅜ  지금 간 조직 H&E 염색을 진행하고 현미경으로 사진찍고 분석을 하려고 합니다. 여러 논문을 보고 혼자 공부하고 있는데 도저히 모르겠어서 브릭 선생님들께 여쭤봅니다ㅎㅎ 1. 간은 중심정맥을 기준으로 현미경 사진을 찍는 것으로 알고있는데 만약 중심정맥을 찾지 못하면 다른 부위로 해도 괜찮을까요?  2. 선행논문에서 무작위로 찍었다라는 말은 중심정맥을 기준으로 20x로 찍은 뒤 그 사진에서 무작위로 40x로 찍어야 된다는 말일까요?  3. 제가 이번 실험에서 보고싶은 건 간의 지방의 정도,, 염증을 보고 싶은데요!! 지방과 염증이 어느정도 나타났다 것을 다른 기준 없이 쥐들만 비교하면 되나요? suzuki score나 NAS score를 기준으로 분석하는 건가용?  4. 혹시 도움이 될만한 논문이 있을까요... ?    질문이 너무 두서없는 걸까봐 걱정이네요,,,  많은 가르침 주시면 감사하겠습니다!!  모두모두 새해 복 많이 받으세요 :-) 

flox-cre 시스템으로 tissue specific mouse를 만들었는데 실험할 때 WT이랑 해도 되는거 아닌가요? 같은 실험실에 다른 분이 Flox(Homo) mouse를 control로 사용해야한다고 하시는데 어차피 penotype은 같을텐데 싶어서요

안녕하세요. 마우스에 특정 물질을 투여하고 독성 평가를 하기 위해 준비중인 학생입니다. 독성평가를 할때 주로 간, 신장을 보는 걸로 알고 있는데, 간, 신장 이외에 비장, 심장, 폐에도 염증관련 독성 평가를 H&E staining을 통하여 보고자 하거든요. 지금 말씀 드린 장기들이 독성평가와 연관성 있는 장기인가요?

안녕하세요, brain OCT embedding 준비 중인 석사생 입니다.   아래와 같은 프로토콜로 진행하려고 합니다. 1. Perfused with 0.9% saline (NaCI) ç 20~30ml (4.5~5 min Perfusion 기계를 좌심실에 꽂고, 우심방 터트리기) followed by fixation with 4% paraformaldehyde in 0.1 M PBS ç 15ml Trans-cardiac perfusion of PFA prior to removal of the organ from the body. 2. Isolate the brain and wash it with 0.1M PBS (Cold PBS) 3. Post-fixed in 4% PFA (0.1M PBS) at 4°C for 24h. 4. Put the tissue in 15% sucrose in PBS (0.1M) until the tissue sinks (6~12h) at 4°C 5. Put the tissue in 30% sucrose in PBS (0.1M) until the tissue sinks (Overnight) at 4°C   è 물기 제거 필수. 6. PBS wash  7. Embed tissue in OCT. (Removal of the bubble.) è -80°C -조직에 OCT 뿌리기(OCT가 조직 안으로 스며들게) -mold labeling -mold/집게 등 다 차갑게 유지(드라이아이스 위에 두기) -mold에 OCT 조금 뿌리고 굳히기 -OCT가 뿌려진 조직을 mold에 똑바로 세우기 -mold를 적정하게 채울 정도로 OCT 넣기 -기포 없애기 -굳히기(너무 오랜 시간 동안 냉동하지 않게 주의하며, 90%정도 굳었을 때 꺼낸 뒤 -80°C) --------------------------------------------------------------------------------------------- 제 질문은 다음과 같습니다 1. 해당 프로토콜에 문제점이나 더 좋은 방안이 있다면 추천 부탁드립니다. 2. 저는 Mold를 드라이아이스 위애서 차갑게 만든 후에, OCT compound를 조금 넣고 굳힌 다음, 30% sucrose에서 꺼낸 brain(mold에 꽃기 전에 OCT로 먼저 분주)을 mold에 바로 embedding 하려고 합니다. 하지만 일부 프로토콜에서는 30% sucrose에서 꺼낸 뇌를 액체질소에 아이소펜탄을 이용하여 frozen시킨 후, OCT를 이요하여 embedding 하더라구요... -두 방법 모두 사용 가능한 것인지, -brain으로 IHC를 하려고 하는데 두 방법 다 가능하다면 어떤 방법이 더 적절한지, -액체질소 없이 드라이아이스로 할 수 있는 방법은 없는지 여쭙고 싶습니다.   미리 답변 감사합니다! ㅎ