[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
서린바이오사이언스
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
BioWave  Vol.25, No.2 (2023년 2월) 오픈
전체보기 안전점검 LABox
 카테고리: 전체 > Immunology > Immunocytochemistry
Mol. Biol.-DNA Mol. Biol.-RNA Mol. Biol.-Protein Immunology
Cell Biology Microbiology Plant Biology Laboratory Animals
Omics Chemical biology Bioinformatics Laboratory Equipments
Buffer/Reagent Bioethics Etc.
카테고리 전체보기펼치기
질문/투표/프로토콜 등록
Q. ICC나 IHC 잘 하신는 분? (BSA 이외의 serum 첨가)
blocking buffer를 만들때bsa를 추가하는 것으로 blocking 역할을 하는 것으로 알고 있습니다.저는 blocking의 목적으로 bsa만 넣으면 되는줄 알았는데다른 연구실의 프로토콜을 보니 blocking buffer에 Horse serum을 넣는 것이었습니다.0.1% BSA에 추가적으로 2%나 horse serum을 넣더라구요...antibody의 host나 species를 확인했을때 겹치는 것이 없어서backgroud issue는 생각을 하지 않아도 되었습니다만이렇게 serum을 두 가지나 넣어야 할 이유가 있나요?
회원작성글 DK51  |  2017.11.20
Q. paraffin block을 section하는데 자꾸 조직부분이 section이 안되네요 ㅠ 첨부파일
안녕하세요 최근에 파라핀 블락을 우리 실험실에서 만들게 되었는데 초보다보니 잘 안되네요 ㅠ고수님들 보시고 뭐가 잘못됐는지 알려주세요파라핀 블락을 자르면 파라핀 부분은 문제없이 잘립니다그런데 조직부분은 자꾸 구멍이 나거나 조직부분이 찢어지네요 ㅠㅠ도대체 뭐가 잘못된걸까요?블락을 만들때 뭔가 실수를 한건지.. 아니면 섹션할때 잘 못하는건지 ㅠ너무 힘이듭니다부디 조언부탁드립니다
회원작성글 dodhr21  |  2017.10.11
Q. H&E staining시 조직이 갈라지는데 문제를 잘 모르겠습니다.
  H&E staining시 조직이 갈라지는데 문제를 잘 모르겠습니다.조직은 비장이며, 파라핀섹션한 샘플입니다. 조금씩 밀린듯한 조직상태입니다.선생님들 답변 부탁드립니다.ㅠ
회원작성글 하모샤  |  2017.09.25
Q. 쥐 혈액에서 CD4, 8 등을 flowcytometry 해야하는데 실험을 담당해주는 외주 업체가 있나요?
 쥐에서 면역 측정 실험을 하려고 하는데, 모든 실험을 처음부터 다 할 수 없을 거 같아서 외주업체가 있는지 알아보고 있습니다. 
회원작성글 오두막  |  2017.09.21
Q. 실험 관련은 아니지만 논문읽다가 LPS-B cell관련해서 궁금한 점이 있어서 질문합니다!
 Lipopolysaccharide activation of murine splenocytes and splenic B cells increased the expression of aryl hydrocarbon receptor and aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator위 논문의 abstract만 읽었는데 splenocyte에 LPS를 분주하면 AhR이랑 ARNT mRNA 크기가 증가했다고 이해했습니다. 근데 크기가 증가한 AhR과 ARNT mRNA가 B cell의 활성화를 증가시키는건가요??
회원작성글 ksj32307  |  2017.07.12
Q. trichrome stain 방법
 masson`s trichrome stain을 처음 진행하는 학생입니다.폐조직의 collagen 침착을 확인하려고 하는데 초기 조직 section을 xylene이나 alchol이 포함된 solution 안에서 1h 정도 60℃ 오븐에  보관후에 사용하라고 하는데 xylene 을 희석해서 사용하는 비율을 얼마정도 하면 괜찮은지 알수 있을까요?
회원작성글 Dykj  |  2017.03.19
Q. ICC 위해 4%PFA로 고정한 cell을 장기간 보관해야 하는데요..^^;
ICC 위해 4%PFA로 이미 cell을 고정했는데, 사정이 생겨서 장기간 보관해야 하는데요, 잠깐 찾아보니 장기간 보관시는 Methanol 고정후 얼리는게 좋다고 나오는것 같아서 질문드려요.이미 PFA로 고정후 PBS에 담가서 4'C보관하고 있는데, 이걸 다시 메탄올 고정해서 얼려도 될까요? 그리고 만약 된다면, 메탄올 고정 후 바로 suction하고 말려서 -80도에 얼려야 하는건가요? 아니면 PBS 워싱하고 PBS에 담궈서 얼려야 하는건가요?선배님들의 조언 기다리겠습니다.감사합니다.
미미  |  2017.03.02
Q. 면역효과실험 관련 질문
이번에 대식세포 증식능, NO 증식능, 사이토카인 증식능을 실험하게 된 고등학생인데요!세포를 RAW 264.7 을 쓰기로 했고 정말 실험에 대해서 아는 게 많이 없는 학생입니다....1. 사이토카인 증식능을 관찰하기위해 ELISA 키트를 사용하려고 하는데 어떤 키트를 써야 할까요? 2. raw 264.7 배지를  MTT, griess, ELISA 방법에서 RPMI 1640을 사용하면 될까요?3.대식세포 증식능을 MTT방법으로 측정하려고 하는데 phosphate buffered saline가 필요한데 멸균생리식염수를 쓰면 된다고 하는데 희석된 멸균팩 형태와 캡슐형 중에 어떤 걸 써야할까요?4. 혹시 실험할 때 필요한 배지에 대해 아시는 정보가 있으시다면 알려주실 수 있을까요!
회원작성글 seill  |  2017.01.10
Q. 알레르기 실험에서 NF-kB의 핵내이동 관찰 문제 첨부파일
안녕하세요. ICC를 처음 셋팅하는 학생입니다.실험목적은 RBL-2H3에서 알레르기를 유발하여 일어나는 NF-kB의 핵 내 이동을 제 시료가 억제하는지 관찰하려고 합니다.웨스턴 상으로는 알레르기 유발후 NF-kB가 cytosol에서 핵으로 이동하는 것을 관찰했고, 시료가 이를 억제하는 것도  확인했습니다.근데 ICC를 통해 컨포칼로 관찰했을 때는 NF-kB가 핵으로 이동하는 경향이 안보여서 답답합니다.알레르기 유발하는 시약의 농도와 시간 문제 때문인가 해서 웨스턴상에서는 DNP-IgE와 DNP-HSA의 농도도 높여서 해보고, 알레르기 유발 시간도 10,20,30,40,50 분별로 체크했을때, 50분까지 핵속의 NF-kB p65 밴드가 증가한 것을 확인했습니다. (일반적으로 논문에선 알레르기 유발 후 30분후에 NF-kB를 찍는다고 합니다.) 하지만 ICC에서는 알레르기 유발 후 30분, 60분, 많게는 90분까지봐도 NF-kB가 여전히 cytosol에 있더라구요.제 실험 프로토콜은[Cell에 DNP-IgE (100 ng/mL)로 자극 (overnight)그 후에 워싱후 시료처리 (천연물) 1시간 30분 그 후에DNP-HSA (1 ug/mL) 처리 후 30분]셀 워싱후 4% paraformaldehyde로 10분 고정워싱 후 0.25% triton X-100 으로 10분간 permeabilization그리고 3% BSA in PBS로 1시간 블로킹 후상온에서 1차 Antibody 2시간 그 후에 2차 Antibody (-Alexa fluor 568)그 후 DAPI 염색 20분그리고 커버글라스 씌워 찍습니다.사진을 첨부하였습니다.사진상으로는 알레르기 유발군에서 핵안에서 NF-kB가 관찰되는 것처럼 보이는 셀들이 몇 개 있지만 일부만 그럴 뿐, Con과 크게 다르지가 않더라구요.어떤 점이 문제일까요? 주변에 물어볼사람도 없고 혼자 세팅하려니 답답한점이 많습니다ㅠㅠ선배님들께서 조언해주시면 정말감사하겠습니다.
회원작성글 지코바사와  |  2016.12.14
Q. 적절한 2차 antibody 질문드립니다. 첨부파일
1.  CD16/32 (green)+ Iba-1(red)2.  CD206 (green)+ Iba-1 (red)(double IF stain 할 예정입니다)에 사용 될 적절한 2차 antibody 질문드립니다.Goat anti Rat lgG (secondary Ab, Alexa Fluor 488) 이 맞을까요.. ab 구입하고 하려니 정확히 해야할 것 같아서요ㅠㅠ 1차 안티바디 3개 데이터시트 올려드립니다.도와주세요데이터시트에 있는 Host 랑 description 이랑 같은걸 뜻하는 건가요?  
IHC  |  2016.11.29
Q. 형광현미경 첨부파일
LABox #Fluorescence
rat brain IF stain 해서 CD68+DAPI 488파장에서 보고있습니다. 사진이 아래와 같이 DAPI를 보고 필터바꾸고 넘어갈떄 (2초)잘 잡히던 cell 모양이 필터가 완전히 바뀌고 나면 그냥 부옇게 초록색 바탕이 되어버립니다. 뭐가 문제인지 잘 모르겠어서 질문드립니다. 
micro  |  2016.11.23
Q. PI , DAPI stain
TUNEL 형광 염색의 마지막 프로토콜이PI 염색이 있습니다.보유하고 있는 형광현미경이 red 파장을 자 잡지 못해 DAPI로 하려 는데 상관이 없을까요?둘의 정확한 차이가 뭔지 알려주시면 감사하겠습니다.  (경로, 작용과정 등)
replay  |  2016.11.17
Q. rat liver paraffin block
rat liver 를 파라핀 블럭을 만들어 section 하려 하는데파라핀 카세트에 꽉 찰 만큼 커서 embedding 시 liver 잘라야 할 것 같습니다.조직의 막을 관찰하는 목적인데 어떤 식으로 잘라야 할지 문의드립니다. 
hello  |  2016.10.19
Q. 조직보관용액
안녕하세요혹시 frozen section 해서 염색에 조직을 쓰기 전까지 조직보관 용액을 사용하시는 분이 계실까요??조성은 glycerol , Ethylene glycerol, D.W, Na2HPO4, NaH2PO4 입니다.혹시 계시다면 다른 조성으로 얼마만큼 비율로 사용하시는지 궁금합니다.  
IHC 정복  |  2016.10.18
Q. IF (CD68+DAPI) stain 사진 첨부파일
제가 rat brain IF stain 을 해고 tile scan 한 사진의 일부입니다.사진 처럼 조직에 구멍? 이 난 것 처럼 보이는게 정상인가요 ?도움 얻고자 질문 드립니다. 
hello  |  2016.10.14
Q. 파라핀 블록 제작 과정
안녕하세요H&E stain 을 위해 파라핀 블록을 제작 하려 합니다.옛날에 어렴풋이 봤던 과정이 잘 기억이 나질 않아서요..파라핀 embedding 전에 어떤 과정을 거치는 지 알려주시면 감사하겠습니다.탈수 (dehydration)-투명(cleariing) 을 몇 시간? 몇 일 진행해야 하는지요
IHC 정복  |  2016.10.11
Q. frozen brain section 기한
약8달 된 frozen brain 샘플을 지금 section하여 stain 해도 될까요?육안으로 보기에는 brain 색깔 빼고는 잘 모르겠어서 질문드립니다. 
한주희  |  2016.10.05
Q. 면역조직염색 간접법과 직접법
제목처럼 면역조직염색 중 간접법과 직접법에 대해서 알고싶습니다..
회원작성글 이젠그랬으면좋겠네  |  2016.10.03
Q. paraffin block 제작시에 paraffin을 굳히고 떼는과정에서 문제
조직을 파라핀에 2시간- 2시간 담궈둔후 굳히고카세트를 떼면 기포같은 것들이 있습니다.콩기름이 끓어서 그런것일수도 있다고하는데요기포가 안생기게 할 방법이있을까요
기포  |  2016.06.23
Q. Immunohistochemistry(면역조직화학) 실험이 이해가 안됩니다.
-종양 절편들을 3um 두께로 절단하였고, PGRN, Ki67, CD34 등과 같은 일차항체와 함께 배양하였다.-음성대조군으로서 일차항체 대신에 정상 생쥐 혹은 토끼의 IgG를 사용하였다. -이어서 각 절편들은 HRP 염소 항-토끼/ 생쥐 IgG 폴리머 (Maixin, Fuzhou, China)와 함께 배양했다.-최종적으로 두명의 독립적인 연구자에 의해 동시에 분석이 실시되었다.-염색된 세포들의 퍼센트를 400x배율에서 5개 무작위 필드에 대하여 기록하였다.이런 방법으로 면역조직화학 실험을 하는데Q1. 이 실험 방법으로 면역조직화학을 이해하고 싶어요. 면역조직화학에 대해 이 실험 방법을 이용해서 알려주세요Q2. IgG가 뭔가요? 왜 일차항체 대신 IgG를 사용한거죠?Q3. HRP 염소 항-토끼/ 생쥐 IgG 폴리머 (Maixin, Fuzhou, China)가 이차 항체인가요? HRP 염소 항-토끼/ 생쥐 IgG 폴리머 (Maixin, Fuzhou, China)를 쓰는 이유가 따로 있는건가요?Q4. 꼭 400x 배율에서 무작위로 기록해야 하는 건가요?모르는게 너무 많네요ㅠㅠㅠㅠ답변해 주시면 감사하겠습니다
회원작성글 I히아신스U  |  2016.05.20
이전  01 02 03 4 05 06 07 08 09 10  다음
실험 회원 등급이란?
실험Q&A 회원등급안내
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크 광고