안녕하세요. 선배님들 이번에 NASH 동물모델 실험을 디자인해야하는데,  질문 1. NASH 모델에서는 지방간도 보지만 간에서 Fibrosis를 확인하고 싶은데 fibrosis를 확인 할 수 있는 염색법이 있을까요??   바쁘신 와중에 정보공유를 위해 답변을 달아주시는 선배님들께  항상 감사합니다.    

mutagenesis 실험 중인데, 결과가 이상하게 나와서 문의 드립니다. 예상데로라면 8Kb에 떠야하는데 NEB 방법데로 했을 때는 아예 끌리듯이 나왔고 Agilent 방법데로 했을 때는 non-specific 이 뜹니다.   어떤 분은 둘 다 모두 아예 PCR이 안된 것 같다고 하시고 어떤 분은 annel을 20분까지 늘려보라하시는데   뭐가 맞는지 몰라 올려봅니다.   target size는 8Kb입니다

의약품 용출시험에서 물, ph 1.2, 4.0, 6.8시험액을 사용하는 이유가 무엇인가요? 신체 ph와 관계가 있는건지 궁금합니다

안녕하세요    sample을 만들고 단백질 정량을 충분히 하여 70v로 loading하고    transfer를 2시간을 하였고 pbst로 washing하고 5% skim milk로 1시간 blocking하고   washing 하고 확인하였는데 actin이 잘 나오지가 않습니다.     문제는 정량문제인듯한데....   어디서부터 다시해야할지 모르겠습니다.   BCA로 다시 STD curve그리고 처음부터 sample prep을 해야할까요? 아니면 loading 이나 다른 부분에서 문제가 있는걸까요?   washing은 10분간격으로 3회  모든 시약은 당일 제조  1차 Ab 1:3000 2차 Ab 1:5000

안녕하세요. 현재 쥐 골수에서 세포를 분리하여 100mm petri dish 에서 GM-CSF 추가해서 6일간 배양한 후 동동 떠있는 세포 혹은 PBS pipetting 시 떨어지는 세포 (losely adherent cells) 만 모아서 사용하고 있습니다. 그러고 나서 24 well (tissue culture)에 배양 하였는데 dendritic cells 들이 떠있는 세포들도 있지만 바닥에 딱 달라붙어서 20mM EDTA+PBS 에 30분 incubation 후에 pipetting 해도 떨어지지 않더라구요... 이후에 이 세포들을 대상으로 FACS 분석 예정이여서 최대한 surface marker 를 손상시키고 싶지 않은데...  Cell scraper, TryPLE, Cell dissociation buffer 중에 어느 방법이  surface marker 손상을 최소화하되 잘 떨어질까요??? 그리고 Petri dish에서 배양하라고 나와있는데 혹시 culture dish에 배양해도 관계가 없을까요??? 

안녕하세요.   샘플을 동일한 농도로 희석하고 항산화 실험(ABTS/DPPH)을 진행하였습니다. ABTS는 증류수로 희석하였고 샘플:ABTS 양은 20:180, 반응시간 1~2분, DPPH는 메탄올로 희석하였고 샘플: DPPH 양은 160:40, 반응시간 30분 입니다. 농도가 증가함에 따라서 항산화활성이 증가하는 추세를 보였습니다. 다만, 결과값이 DPPH에 비해서 ABTS 값이 절반정도 낮게 나왔습니다.  참고문헌을 찾아보니 대부분은 ABTS가 더 좋은 결과를 나타내길래 반복실험을 여러번 해보았지만 DPPH가 더 좋다는 동일한 결과값이 나옵니다...! 혹시 관련된 참고문헌 혹은 이유를 아시는 분은 답변 부탁드리겠습니다. 감사합니다. 

    안녕하세요  검색해도 잘 안된다는 말이 있어 혹시 몰라 여기에 물어봐요    12% gel coomassie 염색해서 staining 한 후에 10% acetic acid에 보관중이예요 이 gel을 PVDF에 옮기는게 가능할까요?  산에 담겼던건 잘 안된다는 말도 있어서;;;  고수님들 좀 도와주세요 ㅠㅠㅠㅠㅠ 해보신분 제발요~~ 

안녕하세요 lc-msms 분석하다가 질문드립니다. LC-MS/MS에서 precursor ion peak를 보면 질량수 옆으로 동위원소가 1씩 늘어나는 피크들을 보고 해당 피크가 1가  이온 피크인것을 알 수 있다고 알고있습니다.   그렇다면 프리커서 이온 피크만 봤을때 해당피크가 2가 이온 피크라는것을 한눈에 알 수 있는 방법이 있을까요?  2가 이온일시 옆으로 늘어나는 질량수가 1이 아닌 다른 값을 가지나요?   답변부탁드립니다ㅠㅠ

guanosine 5'-monophosphate disodium salt hydrate   sigma제품   Molecular Weight:  407.18 (anhydrous basis)   100mM로 만들고 싶은데 방법 좀 부탁드려요 ㅠ

Cell line 이름으로 해당 세포주에 대한 정보를 검색하려고 하는데 논문 사이트, ATTC, 한국세포주에 검색해도 안나오더라고요 혹시 이런 경우는 어디서 검색하나요?

안녕하세요 ! 3T3-L1 세포로 항비만 효능을 보고 있는 대학생입니다. BCA이용해서 정량 했지만,,, 분화셀과 저농도 샘플 셀등 지방이 많이 생기는 셀에서만 베타액틴이 약하게 뜨더라구요. 몇 번째 정량인지 모르겠습니다... 최대한 지방을 제거해도 계속 동일한 결과만 뜨네요  이러한 이유와 해결할 좋은 방법 알려주시면 감사하겠습니다. ..  

orthotopic HCC mouse model제작중입니다. hepa1-6(neo-luc) cell을 간에 주입하여 간암모델 제작 후 컨트롤군과 약물 주입군을 비교하는 실험중입니다. 실험종료후 샘플링을 위해 개복하면 간암종양이 간조직안에서 자라야 하는데 간밖에 복막 아래에 자라있습니다... 세포이식수술할 땐 간조직으로 잘 들어가서 하얗게 변하는것까지 확인했는데 새어나와서 자란 것 같아요... 간에 세포가 잘 안착이 안되는거 같습니다. 논문들 찾아보면 MCD diet나 high-fat diet로 NASH, NAFLD를 먼저 유발시킨 뒤 암세포를 주입하여 암모델 제작하는 프로토콜도 많이 있고, 그냥 암세포주 바로 주입하는 논문들도 많이 있더라구요! NASH를 먼저 유도시킨 뒤 암세포 이식하면 더 잘 안착될까요,,? 경험있으신 분들의 조언을 구합니다!!!  

세균 염색 중에 사진과 같은 현상이 자주 일어날 수 있다고 하는데 어떤 경우에 저렇게 되는 건가요? 현미경으로 염색 관찰했을 때 저렇게 나타난 경우가 없어서 질문 드립니다.

colony 키워서 dna prep후 double digestion 1hr했습니다. 두개 엔자임중 1개가 working안한것일까요?1exp 2019년인데 사용 위에 두꺼운 밴드는 무엇일까요? 안잘린 것인지 pseudo colony인지요? 1kb size marker사용.

안녕하세요. 미생물전기화학시스템 전공자 박사과정생입니다. 흔히 환원전극으로 사용되는 Pt carbon 촉매에 바인더로 사용되는  Nafion™ perfluorinated resin solution 5 wt. % in lower aliphatic alcohols and water, contains 15-20% water 시약이 단종된 사실 알고 계시나요? ㅠㅠ 대체품을 찾으려는데 알아본 대체품도 성능이 탐탁치않습니다.  관련 실험 하시는 분들. 대체 바인더 시약 찾으신 분들. 정보 공유 주실 수 있나요? 

emb 배지에서  염료로 쓰이는 메틸렌블루와 이오신 염료 두 가지 모두 gram(+)를 inhibitor(억제)시킨다고 알고 있는데  어떤 원리로 억제시키는 건지 아는 분 있으면 설명부탁드립니다.