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Q. chlorophyll extraction 후 absorption 그래프 해석 첨부파일
학부생입니다  개구리밥을 사용하여 엽록소 추출을 했고 분광광도계를 이용하여 흡광도를 측정하는 실험을 진행하였습니다 하나는 light 또 하나는 dark condition에서 약 2주간 petridish에 약 20개체를 분리 후 키워주었고 개구리밥을 막대사발로 으깨준 후 96% ethanol을 1:10의 비율(개구리밥 무게 g: 에탄올 ml)로 엽록소 추출을 하였습니다 그 후 spectrophotometry를 돌려 그래프를 그리니 그림처럼 나왔습니다   1. dark condition한 이유는 무엇인가요? 2. dark condition의 흡광도가 왜 이렇게 높은 것일까요? - Beer 법칙에 의하면 abs=-logT이므로 최대 2가 나오는 것인데 3 이상이 나왔을까요?
회원작성글 가랑비처럼  |  11.25
Q. 현미경 으로 동물조직을찍을때
현미경에서 동물조직을 찍을때, DAPI와 594 red signal을 확인을 해야하는데요. 컨트롤(약물을 처리하지 않은 샘플)을 우선 찍으려고 아이스피스로 봤을때 잘보이는데, 현미경컴퓨터상에서는 흐리게 보여 레이저 파워를 조절한다면, 그 다음 대조군(약물처리한 샘플)에서는 DAPI 레이저 조절를 하면 안되는건가요? 차이를 비교하려면 어떻게 조건을 잡아야하는지 궁금합니다. ㅠㅠ 초보라 많이 어렵네요
회원작성글 초코파티  |  11.25
Q. 초순수 제조장치 국산 제품 구입처
원래 Milli-Q direct 사용 중인데 소모품 비용이 너무 비싸서 아예 저렴한 국산 제품으로 갈아타려고 합니다..ㅠ 휴먼과학 말고도 괜찮은 제품 있거나 사용하시는 제품이 국내산이면 공유 부탁드립니다ㅠㅠㅜ
회원작성글 젤리빔  |  11.25
Q. 질소탱크 질소 부족
저는 질소탱크에 질소가 18센티정도이면 충전을 하는데 확인하는 기간이 길어져서 ㅜㅜ 질소가 7센티 남았거든요 ㅜㅜ 그럼 질소에 안담겨있던 셀들은 다 죽었을까요?ㅜㅜ 
회원작성글 oneday  |  11.25
Q. ethylacete 시약 농도
저희가 가지고있는 EA 가 85% EA로 가지고 있어 100% EA에 DDW를 0.1% 희석해서 사용하라고 논문에 나와있어서요 1L 기준으로 EA 얼마 와. DDW 얼마를 넣으면 되는지 계산법을 알수있을까요?
회원작성글 얼마안남았다  |  11.25
Q. protein 농도 만들기
human recombinant IFN-γ와 같은 protein을 사서 실험을 하려고 할때 사진에서처럼 농도(20ng/ml, 767U/ml 등등) 이렇게 만드려면 계산을 어떻게 해서 만들어야 하나요?ㅠㅠㅠ 1mg으로 오면 이걸 1ml에 녹여서 1mg/ml로 만들고 희석하면 ng/ml로 만드는게 맞나요? 근데 U/ml은 어떻게 할지 모르겠어요...unit?정보도 안나와있고
회원작성글 개똥이야  |  11.25
Q. SDS-PAGE 밴드 휘어짐
최근 한달 사이에 PAGE를 내리면 두번째 사진처럼 양 끝쪽 밴드들이 더 많이 내려가 ∩ 모양으로 결과가 나오고 있습니다. 젤 퍼센트도 같거나 비슷하고, 버퍼도 동일하고, 러닝할 때 전압과 시간도 동일합니다. 유일하게 달라진 건 샘플버퍼를 새로 만들어서 썼다는건데 혹시 샘플버퍼 때문에 이런 문제가 생길 수 있나요? 체감상 샘플버퍼 바꾼 이후로 이런 문제가 생기는 것 같긴 하네요   정상일 때. 두달전까지만 해도 전부 이런식으로 잘 내려왔어요 최근에는 다 이렇게 양 끝이 휘어서 내려오고 있습니다  
회원작성글 ckk  |  11.25
Q. 산가 지시약 만드는법,,
안녕하세요 수산화칼륨을 결정으로 가지고 있는데요 이것을 가지고 0.1N 수산화칼륨 에탄올 용액을 만들고자 하는데 어떻게 만들어야하나요ㅠㅠ 도와주세요ㅜㅜ
회원작성글 youngranii  |  11.25
Q. fibroblast cell contamination 일까요..? ㅠㅠ 도움부탁드립니다 첨부파일
안녕하세요 이제 석사를 시작하지 얼마안된 학생입니다.. 다름이 아니고 ccd 18co cell 을 키우고있는데 셀들 주변에 아주작은 거뭇거뭇한게 여러개 보이네요... ㅠㅠ  그리고 확대해보면 몇몇 작은 하얀색 덩어리가 꿈틀거리면서 다니는게 보입니다.  혹시 오염인지 그리고 오염이라면 어떤오염인지 알수있을까요..? 선배님들의 답변 감사하게 듣겠습니다
회원작성글 나르  |  11.25
Q. transwell -migration assay 많이 해보신 분 답변 부탁드립니다! 첨부파일
transwell 후 crystal violet으로 staining해서 이미지를 확인했는데 염색이 떡진 것처럼 원래 세포 모양과는 다르게 너무 이상하게 나왔습니다.. 처음 셀 깔고 현미경으로 볼 때는 셀이 있는 걸 분명 확인했는데 염색은 이렇게 되어서 이유를 모르겠어요..ㅠㅠㅠㅠ 혹시 이런 식으로 나오셨던 분 없을까요?  일단 세포는 ID8이라는 Murine ovarian cancer cell입니다. 아래는 ATCC에서 가져온 ID8 Culture 시 사진이에요.. 실험 자체는 cell seeding 후 12시간 처리 -> 4% PFA solution으로 10분 fix -> PBS washing 2번 -> 0.05% crystal violet으로 30분 staining -> PBS washing 2번 -> 면봉으로 unmigrated cell 제거 -> Dry 후 촬영 순서로 하였습니다. 아시는 분은 답변 부탁드립니다! 감사합니다
회원작성글 .gh  |  11.24
Q. 시약 %계산 방법
실험실에 있는 ethanol이 85%인데 논문에서 100% ethanol 기준으로 DDW를 0.1%만 넣으라고 나와있어서요 1L를 기준으로 85% ethanol을 몇 ml 과 DDW를 몇 ml을 넣어야되는지 계산 방법좀 알수있을까요?
회원작성글 얼마안남았다  |  11.24
Q. ampicillin배지에 transformation cell을 키웠는데 satelite가 많이 나와요...
전기천공법으로  plasmid를 transformation하고 다음 날 확인했는데, 크고 하얀 콜로니 주변으로 자잘한 콜로니들이 에워싸듯이 몰려있거나 아예 하얀 콜로니들을 뒤덮고 있었습니다. 지금 저 이상한(?) 콜로니들을 새로 만든 amp 배지에 streaking 하면 순수한 transformant만 얻을 수 있을까요? 아니면 다시 transformation부터 다시 진행해야 할까요? *배지는 알아보니 만든지 좀 되었더군요... 일단 저도 앞으로 쓸 일이 있을거 같긴 해서 새로 만들었습니다.    
회원작성글 란란루  |  11.24
Q. (그래프 있음, 질문 2개) 정량 곡선인 Standard curve 그렸을 때의 농도끼리 간격에 대한 질문이요. 첨부파일
질문 1) standard curve를 그렸을 때, 데이터가 너무 멀리 떨어져 있으면 좋지 않다고 하는데요. 그 이유를 모르겠어요. 질문 2) 예전에 R²값이 0.99 이상 되지 않았을 때, 데이터 1개를 빼서 0.99 이상으로 만들었었는데 모든 Standard 값이 다 들어간 상태로 정량해야 한다고 했었고요. 0.99 이상으로 만들기만 하면 되는 것이 아닌가요? 답변 부탁드립니다. 감사합니다.
회원작성글 아스널  |  11.24
Q. 2가지 물질의 혼합물을 uv로 측정할 때
제가 UV로 찍으려는 2가지 물질은 파장이 완전히 다르기에 서로의 피크값에 영향을 크게 주지는 않습니다 그렇지만 서로의 피크 범위에서 약간의 흡광도(0.05미만)가 존재하기 때문에 이를 보정해야 할 것 같은데요 단순히 a+b의 혼합물의 흡광도에서 같은 농도의 a의 흡광도를 빼주면 순수한 b의 흡광도가 나오는게 맞나요? 이해가 잘 안됩니다 ㅜ 도와주세요!    
회원작성글 공돌공돌  |  11.24
Q. dss유도 장염 모델은 어째서 female로도 실험하는 것이죠?
일반적으로 실험 동물 사용시 여성호르몬의 보호효과로 인하여 이를 배제하기 위해 수컷으로 실험하는 걸로 알고 있습니다. 제가 이 실험을 기획할때, DSS의 농도가 정해져있지 않아 농도확립을 위한 실험을 하여야 하고, 유도시 마우스가 희생되거나, 유도되지 않는 경우도 많다는 것을 확인하고 암컷이 DSS에 저항성을 가져 보다 높은 농도에서 유도되며, 수많은 논문에서 암컷을 실험동물로 쓰는것을 확인한 후, 암컷으로 실험을 진행하였습니다.  그런데 왜 수컷으로 실험하지 않았느냐는 질문이 들어왔을 때 대답할 수 없었습니다. 생각해보면 여성호르몬의 보호효과는 사라지지 않았고, 심지어는 estradiol이 보호효과를 보인다고 논문화 되어있더군요. 실험에서는 변수를 줄이는게 기본이고.. 그래서 암컷 사용을 지양해야 하는데도 불구...  이런 기본적인 문제가 존재함에도 어째서 암컷으로 실험한 논문이 많은지 그 이유가 궁금합니다.   
회원작성글 caco2  |  11.24
Q. COD수질오염키트 원리및시약
역반응또는 크롬망간인가...? 했는데 서치해봐도 나오질 않네요 관련정보는 어디서 찾을 수 있을 까요 ㅜㅜ
회원작성글 cocoyaj  |  11.24
Q. heat map , 미생물 표기 첨부파일
어떤 논문의 데이터입니다 .. gut microbiome의 heat map 결과입니다 해당분야가 아니라 잘 몰라서 질문드려요  1. 미생물 이름 표기시 앞에 써있는 알파벳의 의미가 궁금합니다. 2. 왼쪽에 나와있는 화살표? 의 의미가 궁금합니다   논무넹 언급은 없었습니다 
회원작성글 뚜리  |  11.24
Q. Transformation bead
Transformation 할 때 bead로 굴려서 spreading 하는데 이때 노하우가 있을까요? colony가 자꾸 잘 안떠서... shaking하다가 cell들이 많이 죽을 수 있는지, 어느정도 해야될지 감이 잘 안잡혀서 도움 요청합니다..
회원작성글 쪼꼬만먼지  |  11.24
Q. Site-directed mutagenesis 안되는 이유..
  안녕하세요.. 현재 Site-directed mutagenesis를 하고있는데 colony가 안떠서 난항을 겪고 있습니다..   vector 전체 size는 3.5kb로 작은 편이고, primer design은 다음과 같이 C ▶ T로 바꾸는 것을 목표로 하여, 33mer 로 design 하였습니다.   snapgene 상에서의 Tm값은 63도로 계산되나, 사실 primer 자체는 Agilent quickchange webdesign tool로 design 한 것입니다.    Agilent quickchange protocol은 annealing Tm 값을 55도 기준으로 한다는데.. 무튼 protocol은 다음과 같이 하였습니다..   PCR mixture : total volume 50ul (high fidelity Pfu)에 template vector 200ng PCR cycle :    95°C 30s 95°C 30s 55°C 60s 68°C 2:30s (1kb/30s로 조금 넉넉하게 줬습니다.) step 2부터 X 18  68°C 13:00   PCR이 완료되면, 바로 PCR product에 DpnI 1ul 넣고 37°C 에서 6h incubation    그리고 com-cell에 heatshock 주고, 1ml plain LB에서 40min 돟안 shaking incubation   마지막으로 1ml LB culture medium centrifugation 하여, 가라앉은 com-cell pellet과 soup조금만 남기고, 적당히 pipeting하여 suspened하게 만들고 Amp(marker입니다.) plate에 spreading       제가 예~전에 해당 protocol로 했을 때는 잘 했었던것 같은데, 그때랑 달라진건 polymerase 종류 (회사) 정도? 그래서 사실 high fidelity Pfu 다른 회사 2종류로 test 해봤는데도 역시 안뜨더군요..   무엇이 문제일까요...   선생님들의 지식을 조금만 나누어주시면 감사드리겠습니다.. ㅠㅠ
회원작성글 neuronal p..  |  11.24
Q. retinoic acid 응결 현상 해결방법
안녕하세요. 지금 retinoic acid를 이용해서 SH-SY5Y 분화 실험 셋업중인 석사 1학기차입니다.   지금 5mM retinoic acid stock을 만들어둔 상태이고요. (DMSO에 녹였습니다!) media(DMEM)에 희석시켜서 최종 10uM 사용하려고 했는데 RA가 잘 안녹고 떠다니더라구요 ㅠㅠ  그리고 최대한 vortexing하고 처리해봤더니 cell도 다떨어져 죽었습니다.. 같은양의 DMSO만 넣었을땐 안죽는걸로 봐서 RA 때문인거같은데.. 혹시 SH-SY5Y분화실험을 해보셨거나 RA를 완벽하게 녹이는 법을 알고계신분 있을까요..?
회원작성글 청포도맛 망고  |  11.24
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