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BioLab 장재봉 교수
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 카테고리: 전체 > Buffer/Reagent
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질문/투표/프로토콜 등록
Q. 30% KOH 만들기 + 제가 시약 만드는 법이 이상한지도 확인해주세요
우선 정말정말 기초적인거 여쭤봐서 죄송합니다.  저는 시약을 만들 때 예를 들어서 1.5M Nacl을 100ml 만들 때  58.44(FW)*1.5(M)*0.1(L) = 8.766g으로 계산 후,  비커에 80ml 정도 증류수를 넣은 후 8.766g을 녹이고 100ml 볼 플라스크로 최종 볼륨을 맞춰서 만들고 있습니다.  시약을 이런식으로 만드는데 잘못된 점이 없는지 궁금합니다.  (예전에 아무것도 모르고 최종 볼륨을 먼저 메스실린더로 맞춘 후, 40g 정도 넣는 시약을 만들었다가 최종 볼륨과 많이 벗어난 적이 있었습니다.)   또한 이번에는 제가 30%KOH를 만들 예정인데 증류수 100ml 에 KOH 30g을 녹여 만들것입니다. 1. 위와 동일하게 30g을 80ml 정도에 녹인 후 최종 볼륨을 100ml 볼 플라스크로 맞출지  2. 100ml를 메스실린더로 먼저 맞춘 후 30g을 넣어서 그냥 녹일지 둘 중에 어느 방법으로 하는게 맞는지를 모르겠습니다. 너무 기초적인거 질문해서 다시 한 번 죄송합니다. 
회원작성글 닝난ㅇㅇ웅  |  2022.07.19
Q. 6N HCL 을 D.W 혼합하여 1N 10% HCL 조제할 수 있는 방법이 있을까요?
안녕하십니까? 바쁜 시간 와중에 질문을 열람 해주셔서 감사합니다.   1. 6N HCL 상품화된 물질의 50ml 와 D.W 1075ml 을 혼합하였을 때 만들어 지는 1N % HCL은 어떻게 되는지 궁금합니다.   2.1N 10% HCL 용액을 만들기 위해서 6N HCL 50ml와 필요한 D.W ml  양은 얼마나 필요한지 궁금합니다.   3. 6N HCL 을 이용하여 원하는 1N % HCL을 조제 하기 위해서는 6N HCL -> 1N HCL을 1차적으로 조제한 다음 ->2차적으로 D.W와  혼합하여 원하는 % HCL을 만드는 방법으로만 조제해야만 하는지  알고 싶습니다. 한번에 6N HCL에 D.W을 혼합하여 원하는 1N % HCL을 만드는 방법이 있다면 알려주시면 감사하겠습니다.        
회원작성글 잠민이  |  2022.07.18
Q. siRNA transfect dilution
안녕하세요! 현재 구매한 siRNA으로 transfection을 진행하려고 하는 중인데 해당 농도로 진행을 하면 되는 건지 확신이 서지 않아 도움을 구하려 글을 올려봅니다. 늘 도움주시고 조언해주시는 선생님들께 감사드립니다. :)   현재 제가 갖고 있는 siRNA dilution 상태는 20 uM, 250 uL입니다. 진행할 transfection에 사용할 농도는 10 nmol/l, 즉 0.01 uM입니다. transfection procedure을 확인해보면 여기서는 siRNA 10 uM짜리를 사용하라고 하는데 (1) 제가 갖고 있는 siRNA 20 uM, 250 uL에 추가적으로 250 uL buffer을 dilute 해서 10 uM를 사용해도 문제가 없을까요?  또 현재 지금 transfection protocol을 확인해보면 (2) 10 uM, 3 uL를 넣는데 최종적으로 제가 원하는 농도인 0.01 uM을 맞추기 위해서는 siRNA 10 uM를 얼만큼 넣어야하는지 궁금합니다.
회원작성글 audthdus98  |  2022.07.18
Q. Microplate medium 교체 관련 문의입니다
안녕하세요. Microplate에서 cell starvation assay를 진행하고자 하는 대학원생입니다. 96 well과 같은 plate에서 starvation assay를 진행하는 경우, FBS가 포함된medium에서 하루 동안 cell이 바닥에 붙도록 기다리고, 이후에 FBS가 없는 starvation media로 용액을 교체하는 것으로 알고 있습니다. 용액 교체 과정에서 보통 plate 내의 용액을 피펫팅으로 용액을 제거하는 것으로 알고 있습니다. 그런데 해당 과정에서 용액을 너무 완벽히 제거하려다 보면 피펫이 바닥에 닿아 cell이 손상될 수 있고, 반면 용액이 남게 되면 각 well 별로 dilution되는 정도가 달라져 실험오차가 생길 것 같습니다. 혹시 해당 과정에서 재현성 있게 starvation media로 깔끔하게 용액 교체를  하는 방법이 있는 지 문의드립니다. 감사합니다.
회원작성글 kwj053  |  2022.07.16
Q. 15% ammonium sulfate를 어떻게 만들어야 하나요..
단백질 침전시키려고 하는데 ammonium sulfate 15%로 포화시키는 방법을 모르겠습니다ㅠ 
회원작성글 jyun1009  |  2022.07.15
Q. 엔도톡신과 곰팡이
안녕하세요. 바이오업계에 처음 발을 들인 초짜입니다. 용액속에 흰곰팡이가 자랐습니다. 그러나 엔도톡신은 상당히 적은데요. 다른 균이 있지만 엔도톡신이 적을 수 있나요?  
회원작성글 송송버섯  |  2022.07.15
Q. 1X running buffer 만드는 법 확인 부탁드립니다..!
Tris 30.3g, Glycine 144.1g, SDS 10.0g, 3차 DW 1000mL 이를 섞어 10X running buffer 1L를 만들고, 9L의 3차 DW로 희석하여 1X running buffer를 만듦 이 과정 맞나요ㅠ
회원작성글 jyun1009  |  2022.07.15
Q. TLC로 Glucose와 Fructose의 구분이 가능할까요?
현재 고등학교 고급화학 시간에 Glucose와 Fructose를 구분하기 위한 다양한 실험을 진행하고 있습니다. Silica gel 판을 이용하여 Ethyl acetate : Methanol : DW = 40 : 37 : 23의 비율로 전개용매를 제조하여 실험했는데, 두 물질의 차이가 명확하게 드러나지 않아서 혹시 전개액의 비율에 문제가 있거나 다른 이유가 있는지 궁금합니다.
회원작성글 민달팽이3486  |  2022.07.12
Q. YPD, SD media glucose
YPD, SD에 glucose를 따로 autoclave를 처리해서 섞어주는 방식으로 알고있습니다 YPD 같은 경우 yeast extract + peptone 과 glucose를 autoclave 돌린 뒤 어느정도 식으면 섞어주는편인데요 2개를 따로 -4도에서 보관하다 다음날 섞어도 상관 없을까요?
회원작성글 인턴임다  |  2022.07.12
Q. neb buffer, cutsmart
enzyme을 처리할때 NEB buffer 3.1을 사용해야하는데 cut smart로 처리를 해버렸습니다. buffer가 다르면 아예 enzyme 처리 자체가 안되는건가요? 그리고 안된다고 생각했을때 여기에 한번 더 제대로된 buffer로 enzyme처리를 해도 문제가 없는건가요?
회원작성글 doooom  |  2022.07.12
Q. 1X 짜리를 3X로 넣으라는 뜻?
제가 배지에 넣는 amino acid중 1X 기준 0.5g/L 인데요 3X로 넣으라는것은 1.5g/L 의 기준으로 넣으라는 뜻일까요?
회원작성글 인턴임다  |  2022.07.11
Q. Western blot membrane washing 할 때 사용되는 TBS에 대해서
안녕하세요 박사과정학생입니다. 다름이 아니라 새로 대학원에 들어온 친구에게 알려주기 위해 세세한 것 놓치지 않고 공부하고 있습니다. 그런데 western washing에 사용되는 TBS의 조성에서 NaCl 150mM과 Tris 50mM ph 7.6에 대해서 왜 이렇게 사용하는지 기능은 알지만 농도를 정함에 따라서는 저도 너무 근본 없이 외워서 사용한 것 같아서요 이런 세세한 것들을 알아볼 수 있는 사이트나 내용이 담겨있는 곳이 있는지 그리고 혹시 가능하다면 왜 이러한 농도로 사용하는지 여쭤보고 싶습니다. 감사합니다.
회원작성글 짐승준  |  2022.07.11
Q. In Vitro 버퍼 만드는 과정 중 핑크색에서 투명으로 잘 변하지 않습니다.
McDougall's Buffer를 이용하여 만드는데 리터 당 NaHCO3 - 9.8g NaHPO4 7H2O - 4.62g KCl - 0.57g NaCl - 0.47g MgSO4 7H2O - 0.12g CaCl 2H2O - 1ml 로 만든 후 Resazurin Solution(1g/liter)을 1ml 넣고 밀봉하여 Co2가스를 주입합니다. PH도 맞추고 온도도 똑같이 했는데 색이 핑크색에서 변하지 않을때가 많아서 무엇이 잘못된 것인지 알고 싶습니다. 아니면 Resazurin Solution 양을 많이 넣은걸까요??
회원작성글 qkfkadl  |  2022.07.11
Q. 잘 녹지 않는 물질을 동물에게 경구투여할 때 용매
안녕하십니까 선배님들? 제가 현재 실험에 사용하는 샘플이 있는데, 동물에게 경구투여를 하기 위한 용매를 선정하기가 힘이들어서 질문 드립니다 ㅠㅠ 샘플은 100% DMSO에는 완벽하게 잘 녹습니다. 하지만 녹인 뒤에 희석을 해서 DMSO 농도가 약 5-60% 정도로 낮아지면 뿌옇게 현탁액이 되고 코니칼 벽에 석출돼서 달라붙습니다. 그리고 DW 에탄올 등 다른 용매에는 녹지않고 표면에 층이 생긴듯이 떠다닙니다. 이 샘플을 사용한 논문들을 참고했을 때 PBS를 사용해서 녹인 뒤 경구투여한 논문이 있었고, 또 propylene glycol : DMSO : DW = 1 : 1 : 9로 녹여서 사용한 논문이 있었는데 둘다 실제로 해보니 녹지 않았습니다. 이러한 경우에 제가 시도해 볼 수 있는 마우스에게 먹여도 괜찮은 용매는 또 무엇이 있을까요...? 도움 요청드립니다
회원작성글 졸업시켜줘요  |  2022.07.08
Q. 혹시 DPBS 사용할 때 유통기한 지난것 써도 되나요..??
실험실에 있는 새거 DPBS 유통기한이 01/'14 (14년 1월이라고 봐도 될까요?)라고 적혀있는데,,, 제가 생각하기에는 유통기한이 너무 지난것 같아서요... 혹시 실험에 써도 괜찮을까요...?? 너무 오래됐으니 유통기한이 안지난 다른것을 써서 실험해야할까요??   (( mouse에서 liver를 떼어내서 pbs로 잠깐 wash 하고, prep해서 샘플링을 할 계획입니다. ))  
회원작성글 뿡빵스  |  2022.07.08
Q. 올리브오일 희석
안녕하세요.  실험 과정 중 올리브오일을 희석해야 하는 단계가 있는데 올리브오일을 희석하려면 어떤 용액을 써야할까요?
회원작성글 지리산수  |  2022.07.06
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