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BioLab 박소정 교수
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 카테고리: 전체 > Immunology > Immunocytochemistry
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Q. b-hexosaminidase assay에서요 BSA요..
PIPES buffer  만들 때 10% BSA를 0.1%에 맞춰서 넣자나요..그럼 10%BSA는 머랑 만드는 건가요??...완전 초짜임..ㅠㅠ 알아보라는데.. PBS아닐까요..그리고 이유는 먼가요..ㅠㅠ
회원작성글 동생공 초짜ㅠㅠ  |  2012.10.18
Q. formaldehyde로 처리한후 immunocytochemistry 할수 있나요?
안녕하세요.저희는 환자의 암조직에 침윤되어있는 면역세포를 분리한후 stimulation을 주었습니다.그런다음 특정 protein의 발현을 immunocytochemistry를 통해 보고자 합니다이때 저희는 stimulation 을 주고 난 다음에 그 stim의 영향이 면역세포에서 시간이 지난후 떨어지기 때문에, formaldehyde를 처리를 하여 stop을 시켰습니다.이 세포를 가지고 immunocytochemistry를 할수 있나요?참고로 저희가 보고자하는 protein은 intra에 있습니다.
최한솔  |  2012.09.24
Q. antigen retrival 관련
IHC-paraffin 을 하기위해서  tris/EDTA로 antigen retrival을 해야하는데 90도에서도 조직이 쪼그라들면서 슬라이드에서 떨이집니다. 슬라이드는 많이 쓰는 제품이구요. 혹시 이런 경험있으신 분 있으시면 해결책 좀 알려주세요.
유스케  |  2012.09.17
Q. paraffin block 의 제작시기와 IHC 의 관계
IHC 를 시행하는데 있어서 paraffin block 이 만든지 오래된 거면 실험 결과에 영향을 미칠까요? 병원에 보관되어 있는 특정 질환을 가진 환자의 bone marrow paraffin block 으로 IHC 를 진행할 계획인데 상당 검체가 2001-2005년 사이에 제작된 것입니다. 실험결과에 영향을 끼치지는 않을까 걱정되어 여쭙습니다. 고수님들 답변 부탁드려요^^ 추가로.. 보통 paraffin block 으로는 면역형광염색을 잘 안하고 저도 실제로 해본 적은 없지만.. 일부 시약을 paraffin block 으로도 실험이 가능하다고 catalog 에는 써있는 경우가 많더라고요.  큰 문제 없을까요?
IHCer  |  2012.09.11
Q. paraffin block 을 이용한 immunohistochemistry 시행에서 질문
bone marrow paraffin block 을 이용하여 plasma cell immunohistochemistry 를 시행하는데에 있어 질문 드릴 것이 있습니다1) 두 가지의 marker 를 동시에 사용하여 paraffin block 에서 immunohistochemistry 를 시행할 때에 기술적으로 어떤 어려움이 있는지에 대해서 여쭙고 싶습니다 2) bone marrow 의 많은 cell 에서 발현되는 A 라는 marker 와, 특정 cell 에서만 발현되는 B 라는 marker 로 immunohistochemistry 를 시행하여서 궁극적으로 " B가 발현되는 특정 cell 에서 A 의 발현이 정상보다 증가하여 있다" 이러한 가설을 증명할 수 있을까요?  고수님들 답신 부탁드립니다
ㅠㅠ  |  2012.08.28
Q. 면역화학염색에서 protein expression 을 quantification 하는 방법에 대해 문의하고자 합니다
실험군과 대조군에서의 tissue 에서 IHC 를 시행하여 두 군에서의 단백질 발현의 차이를 보고 싶습니다. 여기에서 질문이 있습니다 1) 특정 protein 의 발현이 두군간에 유의하게 차이가 있음을 IHC 만으로 증명할 수 있을까요 2) 조직 내 특정 세포에서의 protein 의 발현의 차이를 보는 것이 IHC 로 가능할까요? 고수님들의 답변 부탁드립니다.ㅠ 
plasma  |  2012.08.21
Q. intracellular cytokine staining과 cytokine secretion assay 차이
intracellular cytokine staining과 cytokine secretion assay 차이가 무엇인가요?
김실험  |  2012.07.18
Q. immunostaining 방법
immunohistochemistry할때 R&D antibody 를 사용하고있는데AF2559 를 이용하고있습니다.그런데 pbs 로 reconstitution 하라고 되어있는데그냥 20x pbs fitering 해서 사용해야하는지, 아니면 1x pbs 로 filtering 해서 사용해야하는지 방법좀 알려주세요
회원작성글 ggog  |  2012.07.16
Q. ihc할 때 tween 20에 대해서요..
tween 20을 첨가하려하는데tween 20(R)이 있고 그냥 tween 20이 있네요둘 다 점성잇는 것 같은데 둘 중 어느 것을 구입해야할까요?아니면 어떤 것이든 크게 상관없는지..그리고, TBS buffer를 Washing buffer로 사용하는데IHC 월드에 가보니 ph8.4를 쓰라고 되어잇더군요.현재 PH 7.4짜리밖에 없는데.. TBS ph7.4 사용해도 괜찮지요?또하나 질문은,(죄송합니다 ㅎㅎ)PBS buffer를 만일 사용하게 된다면, DPBS ph7.1을 사용하게 될텐데, 보통 다들 7.4짜리를 쓰시더군요. (7.2~7.6)7.1짜리도.. 괜찮을까요? ㅡㅡ. 경험자 선배님들의 조언과 예상을 듣고싶어요~
초보  |  2012.04.20
Q. immuno work에서..
안녕하세요.. TUNEL이나 Immunostaining을 할때, 과정중에 sodium citrate가 들어가는데, 그 역할이 무엇인지 알고싶습니다..그리고 H2O2는 탈수를 시키기 위해 하는 작업인지요??
회원작성글 즌  |  2012.03.07
Q. immunostaining
immunostaining시제가 보려고하는 단백질이 cytoplasmic protein인데요nucleus와 colocalization이 되면 안되는거죠?
ggg  |  2011.12.16
Q. immunocytochemistry
석사1년차 실험 왕초보입니다.이번에 immunocytochemistry를 하게되었는데요 plant cell로요... 기술적인 부분이나 protocol을 공부해야하는데 참고문헌이나 논문... 추천해주셨으면 해서요많은 조언과 추천 부탁드립니다
회원작성글 꽃이되쟈  |  2011.11.15
Q. 면역형광염색 double staining시 질문이 있습니다.
같은 시료샘플에 처리하려고 합니다.A : 1st : rabbit polyclonal, 2nd : Alexa goat-rabbit 488B : 1st : rat monoclonal, 2nd : Alexa goat-rat 594  or  Alexa rabbit-rat 594이런 조건에서 2nd ab를 저 두개중 하나를 선택해서 서로 cross-reactivity가 나타나지 않게하려면 어떻게 해야 할까요?
회원작성글 제미니  |  2011.11.03
Q. Immunocytochemistry로 알수있는것
Immunocytochemistry가 target protein의 존재와 localization을 확인하는 것이자나요그럼 혹시 signal의 강 약 도 확인할 수 있는지요?제가 어떤 chemical을 처리하였을 때 그것이 target protein을확실히 억제하는지를 확인하기 위해서요.만약 처리군에서 signal이 감소하였다면localization뿐만아니라 signal이 억제되었다라고 설명할 수 있는건가요?
회원작성글 히히  |  2011.09.15
Q. antibody관련 질문입니다.
돼지 cell에서 Immunocytochemistry를 하려고하는데요돼지는 antibody가 잘 나와있지 않은 상태라서Anti-Poly(ADP-ribose) Polymer Chicken Polyclonal Antibody(Chicken Immunoglobulin IgY) 를 구입했습니다.data sheet에 보면 HL60 cell,Rat Liver등의 sample에서 잘 작동하는것 같은데돼지에서 과연 잘 작동할지가 의문입니다.또 이게 host가 chicken이니까2nd antibody로 anti-chicken IgY를 사용하면 되는건가요?
회원작성글 히히  |  2011.09.14
Q. Wright-Giemsa stain하기 첨부파일
60mm dish에 culture한 cell을 W-G stain 하려고 합니다. 보통 slide에 고정한 혈구세포를 염색할때 쓰는 방법을 그대로 적용하려는데,(실제 제가 사용한 방법은)1. cell wasing(PBS)2. 4% paraformaldehyde 고정 (20m, R.T.)3. Giemsa stain 15m, R.T.4. Buffer (인산완충용액+W-G)로 5분간 염색5. washing (tap water)이렇게 실시하였어요. 그런데 마지막에 water로 washing하고 난 후 염색된 dish를 어떻게 해야하나요?? 혈구세포 염색하는 것처럼 air dry로 말리는게 맞나요?? 이렇게 셀을 말려도 괜찮을 까요?제가 dish의 셀을 W-G 염색하고자 하는 이유는 화학물질로 dish의 세포에 foci가 형성되도록 만든 후 W-G로 염색하고자 합니다. 즉, W-G stain으로 cell foci를 관찰하고자 합니다. 붙임의 파일처럼 염색하고 싶어요.참..혹시 ATCC로부터 cell line을 구매해 보신분 있으시면 어떻게 하셨는지 알려 주시면 감사하겠습니다. - 대략 걸리는 시간, 절차 (ATCC 홈피??)나 방법(대행해주는 곳) 등이요
궁금  |  2011.07.08
Q. Immunocytochemistry시에 2nd Ab
Immunocytochemistry시에 2nd Ab 수거했다가 재활용해도 되나요?
학생  |  2011.06.01
Q. immunocytochemistry관련실험
immunocytochemistry를 맡기고 싶은데서울가까이에 맡길만한 기업이 있나요? 추천부탁드립니다.
대학원생  |  2011.05.24
Q. Cell foci를 Wright-Giemsa 염색법으로 염색하려합니다.
제목에서도 언급했듯이 flask의 cell foci를 염색해서 관찰하려고 하는데 논문을 찾아보니 크게2가지 염색법이 나오더라구요.1) 0.5% crystal violet을 이용하는 방법과 2) Wright-Giemsa 염색법그래서 저는 Giemsa stain을 이용하려고 하는데, 정확한 프로토콜이 없네요.보통 혈구세포 염색하듯이 하면 되는건지? 혹시 해보신분 계시면 팁 좀 알려주세요.그리고 cell foci 염색법으로 giemsa를 쓰는게 적당한 방법인지도 궁금합니다. 감사합니다.
초보자  |  2011.03.18
Q. step912님 봐주세요~~
답변 감사합니다.혹시 BV2 cell로 NF-kB immunocytochemistry랑 luciferase assay해 보신적있나요?도움 좀 받을수 있을까요?요 두 데이타가 안나와서 오늘부로 졸업이 delay가 되었습니다.눈물밖에 안 나네요.ㅋㅋㅋ혹시 해 보신적 있다면 메일로 연락부탁드리겠습니다~~~~jey-0714@hanmail.net
기대  |  2010.12.06
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