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Q. 동결 절편 제작 프로토콜 검토
안녕하세요 동결 절편 제작을 하려고 방법을 찾아보던 중에 검토받아보고자 질문 남깁니다.   1. 장기 절단 2. 고정(10% NBF) 24시간 3. 10% sucrose/0.1 M PBS 4도씨 4시간 4. 15% sucrose/0.1 M PBS 4도씨 4시간 5. 20% sucrose/0.1 M PBS 4도씨 하룻밤 6. 동결포리 (드라이아이스) 7. crystat 절편 8. 냉풍건조 실온 1시간 9. 세정 5분간 3회   이러한 과정으로 진행하려고 하는데 궁금한건 20% sucrose 처리 후 세척과정은 따로 필요하지 않은건지 궁금해서 질문 남깁니다.  감사합니다.
회원작성글 라디칼  |  11.21
Q. subculture
subculture 마지막에 cell down 시키고 resuspending해서 플레이트에 seeding 해줄 때 resuspending을 wash buffer에 해줘서 seeding 해도 괜찮나요? 아님 꼭 media에 해줘야 되나요?
회원작성글 yyyyyy  |  11.21
Q. pcr 전기영동 실험을 하였는데 결과해석 도와주실수있나요? 첨부파일
안녕하세요 생명과학과에 재학중인 학생입니다 이곳에 많은분들께서 잘 알려주신다고해서 가입하고 처음 글 썼습니다 실험결과 해석 도와주실수있나요?
회원작성글 봄날의  |  11.21
Q. autotaxin
논문 공부하다가 이해가 안가는 부분이 생겨서요... ATX-LPA 신호 전달과정에 대한 inhibitor에 대한 효과를 나타낸 result입니다 ATX+LPC 자극 시에 왜 LPA 수용체 발현이 감소하는 건가요? inhibitor 처리하면 증가하는 이유도 알고싶습니다...  
회원작성글 소로리  |  11.21
Q. 전기영동 gDNA
구강상피세포를 kit로 추출해 1.2% agarose gel에 135v 20분 Dna농도를 뒤로 갈수록 많아지도록 내렸습니다. 로딩샘플을 만들면서도 확인하고 겔에 넣기 전에도 다시 확인하면서 로딩했는데 3번이나 결과가 이상합니다. Ratio 값이 1.9인 것과 1.8인 차이에 의해서 일어날 수 있는 일인가요? 5번째보다 6번째 well에 더 많은 양의 gDNA를 넣었는데 왜 5번째가 더 밝게 보일까요…
회원작성글 631  |  11.21
Q. Glucose, Fructose, Sucrose를 이용한 Yeast 알코올 발효 실험 질문 !!!!
Glucose, Fructose, Sucrose를 이용한 Yeast 알코올 발효 실험을 하였는데, 풍선을 사용해서 발효면적을 측정했거든요. 실험 결과 발효 가스 (풍선) 면적이 Sucrose > Fructose > Glucose 순으로 나타났어요. Sucrose가 가장 발효가스가 많은 이유과 Glucose의 발효가스가 가장 적은 이유는 무엇인지 알 수 있을까요? + 결과가 틀렸다면 무엇이 틀렸는지 자세히 알려주시면 감사하겠습니다 :)
회원작성글 lkhg0421  |  11.21
Q. bacteria counting CFU 계산법에 대해
e.coli를 96 well plaste에 200μL 첫칸에 μL 넣고 2~9칸에 BPS 180μL 씩 넣고 칸마다 순서대로 10^-8까지 희석을 진행하여 모든 칸에 있는 배양액 20μL씩을 배지에 접종하여 하루 뒤 관찰하였더니 10^-6 희석액?에서 77개의 colony가 관찰되어 CFU/1ml를 구하려고 하는데 얼추 구한 값이 3.85X10^9 CFU/ml가 나오는데 맞나요..?  
회원작성글 은위대  |  11.21
Q. bca assay 정량 계산 법 알려주세요 ㅠ
결과는 다 나왔는데 여기서 엑셀로 그래프 그리는 법을 모르겠어요 y=ax+b 이걸 어떻게 구하나요 ? 그리고 R^2은 어떻게 구하나요 ?
회원작성글 미미미미ㅣ미밈  |  11.21
Q. Pcr 안될때 workflow
대부분 rt pcr 이나 pcr을 할때 사실 저는 primer tm값이나 cycle 조건을 따지지 않고 annealing 58도 30초 72도 30초 이렇게 35cycle 로 돌려버리는 편이고 Bioneer accupower premix 로 우선 돌려봤다가 안나오면 phusion plus 로 해보면 왠만하면 나오더군요 근데 문제는 저렇게 해서 안나오는거는 뭐부터 바꿔야되는지 앞이 안보이더군요 그래서 혹시 pcr 이 안될때 어떤 workflow 를 가지고 실험을 하시는지 궁금하고 또한, 자주쓰는 polymer 나 회사 같은거 추천해주시면 고맙겠습니다
회원작성글 오미자랩  |  11.21
Q. bca assay 정량 계산 법 알려주세요 ㅠ
결과는 다 나왔는데 여기서 엑셀로 그래프 그리는 법을 모르겠어요 y=ax+b 이걸 어떻게 구하나요 ? 그리고 R^2은 어떻게 구하나요 ?
회원작성글 미미미미ㅣ미밈  |  11.21
Q. Lipofectamine 이용 transfection시에
Lipofectamine 2000 이용해서 miRNA로 셀에transfection하려고 하는데 사용해야하는 비율이 어떻게 될까요? miRNA : lipo = 1:2 정도면 충분할까요?
회원작성글 팡이  |  11.21
Q. 이온화에너지 경향성 예외 풀리는 이유
제2이온화에너지에서 S->Cl 부분이 감소하는 형태여야 예외적인 부분이 맞는데 왜 증가하나요?? 정말 많이 찾아봤는데 그 이유를 찾을 수 없었습니다.. 고등학교 과정에선 이 부분을 다루지 않는다고 하던데 이유가 궁금합니다. 화학고수님들 도와주세요..ㅠㅠ
회원작성글 이원굉  |  11.20
Q. Incubator 가 없을 때 활용할 수 있는 것?
안녕하세요? 전공이 바뀌어 실험을 중단했다가 최근 개인적인 이유로 실험 장비를 조금씩 모으며 실험을 하고 있습니다.   매우 간단한 실험을 해보고 싶은지라, 사무실에서 간단하게 장비를 구비하여 하려고 하는데,   incubator가 없을때 대체할 수 있는 장비가 없을까요? (cell incubator는 가격이 좀 세서... 개인적으로 구비하기는 무리가 있어서요..)   키우는 균주는 S.aureus, E.coli 정도로  잘 자라는 균주입니다.   제가 해본 것은   1. 스티로폼 박스에 전구를 켜서 온도를 유지하였습니다. : 전구로 인해 너무 overheating 이 빠르게 되서,  50~60도 이상 온도가 올라가 실패   2. 전구에 자동 온도 조절 장치를 달아서, 일정 온도 이상 올라가면 전구가 꺼지게 하였습니다. : 37도로 맞춘다고 하면, 온도 조절 장치가 sensitive하지 않아,  30~40도 사이에서 온도가 출렁이니까  세균이 다 죽음.   : 또한, 전구가 위에서 내리 쬐는데, 전구에 가까운 부분은  부분적으로 overheating 되는지, plate에 전구쪽 부분은 다 타죽어서 안자람.   : 위에서 열이 가해져서 그런지, plate를 뒤집었다고 가정하면, 밑바닥 (뚜껑) 부분에 물이 흥건... 하게 참     3. 스티로폼 박스에 팬을 설치하고, 하단에 전구를 설치하여 전구에서 발생된 열이 팬으로 고르게 퍼지게 함.   : 밑부분에서 열이 가해져서 그런지, 또 고르게 균이 자르지 않음. overheating 문제는 여전히 있는 듯...   4. 요구르트 배양기를 사서, 거기에 키워봄. : 요구르트 배양기는 생각보다 뜨겁네요.. 50도 가까이 됨.   5. 계란 부화기 : 이것도 너무 뜨거워서 실패   ------------------   약 수만원 이내의 비용으로 배양기를 DIY로 설치해볼 수 있을까요? 이도저도 안되면 배양기를 구입해야하겠구나 생각하고 있습니다.   
회원작성글 화학의신  |  11.20
Q. PI3Ka와 PIK3CA는 서로 다른가요?
브릭에 글을 처음 써봅니다.... 기초적인 질문일 수도 있지만.... PI3Ka (Phosphatidylinositol 3-kinase alpha)와 PIK3CA (Phosphatidylinositol-4,5-Bisphosphate 3-Kinase Catalytic Subunit Alpha)는 다른 것인가요?    논문마다 다르게 사용하고 위키피디아 페이지도 따로 있던데 (https://en.wikipedia.org/wiki/Phosphoinositide_3-kinase , https://en.wikipedia.org/wiki/P110%CE%B1) 제가 혹시라도 다른 물질인데 같다고 착각하고 있을까봐 질문을 드립니다. kinase kinase kinase를 3K로 줄여도 되고 K3로 줄여도 되는 것이지요? 여쭤볼 곳이 없어서 여기에 여쭙게 되었네요 ㅠ 간단한 질문 죄송합니다, 감사합니다.   (두 위키 페이지를 자세히 읽어보니 PIK3CA는 유전자 이름이고 PI3Ka(또는 p110-α)는 단백질 이름이라고 이해하면 될까요?)
회원작성글 무민2  |  11.20
Q. 비타민C 체내 흡수율과 관련된 심화 실험 추천
비타민C 체내 흡수와 관련된 심화 실험에 뭐가 있을까요? 고등학교 과학실 내에서 실험 가능한 것으로 추천 부탁드립니다. 참고로 과학실 내에 웬만한 기구는 거의 보유하고 있습니다! 그리고 너무 쉬운 실험보다는 심화적인 실험이었으면 좋겠습니다. 더 넓게 보아 항산화 관련 실험도 괜찮습니다. 추천 부탁드립니다.
회원작성글 gPfls  |  11.20
Q. RPMI media 찌꺼기 첨부파일
FBS 10%와 P/S 1%를 넣은 complete media를 사용 중입니다. 오늘 media를 확인해보니 하얀색 작은 찌꺼기가 떠다니는 것을 확인하였습니다. 현미경으로 관찰해보니 사진과 같이 보였습니다. Media를 사용할때 항상 새 pipette aid tip을 넣어 사용하거나 tube에 덜어서 사용하는데 혹시 contamination이 일어난걸까요? 최근들어 RPMI Media로 배양 중인 cell의 성장 속도가 느려지긴 했습니다.
회원작성글 나굴  |  11.20
Q. fusion protein 질문
fusion protein 이 어떤 원리로 어떤 작용을 하는지 쉽게 알수있을까요?
회원작성글 얼마안남았다  |  11.20
Q. DMEM을 실온보관 해버렸는데 사용해도 괜찮을까요...??
안녕하세요. 실험실에서 Cell culture를 조금 하고있는 일반인입니다. 제가 실수로 DMEM을 만 이틀정도 상온보관해버렸는데 이대로 사용해도 괜찮을지 여쭤보고 싶습니다.... 참고로 아직 FBS도 넣지 않았고 뚜껑도 열지않았습니다... 답변 부탁드립니다ㅠㅠ 감사합니다.
회원작성글 CELL초보  |  11.20
Q. Firefly luciferase의 재반응(?) 이 가능한가요 ??
 안녕하세요, 추워지는 날씨에도 불철주야 연구하시느라 고생이 많으십니다.  저희 연구실에서 수산생물에 대하여 luminescence를 활용한 in vivo imaging을 셋업하고 있는데요, Luciferase를 발현하는 vector를 injection한 후 3일정도 후에 D-luciferin을 접종해서 imaging을 하고자 했습니다.    그런데 예상과는 다르게 imaging이 잘 안되어서요.. Substrate의 농도설정, 투여경로등 다양한 변수들이 있겠지만 정말로 luciferase의 발현이 안되는지 or imaging protocol의 변경이 필요한지 확인하고 싶습니다.    그래서 해당 Luc2 expressing vector가 접종된 생물의 tissue homogenate를 사용해서 Luciferase assay를 해서 발현여부를 확인하면 어떨까? 하는 생각이 들었습니다. 여기서 제가 궁금한 점은 이미 Substrate와 반응한 luciferase가 새로운 substrate를 만나도 luminescence가 발광될까?? 하는 의문이 들었습니다.   luciferase가 substrate와의 재반응이 가능한가요 ?? 
회원작성글 Anchovy  |  11.19
Q. 탄소 포집 실험 대체 시약 추천
탄소 포집 관련 실험을 진행하려고 합니다. 아민 - 하이드로젤 흡수제와 같은 것을 제작하려고 하는데 아민 수용액과 하이드로젤 가루를 구할 방법을 찾지 못하였습니다. 위의 두 물질을 구할 방법이 있거나 아니면 위 두 물질 대신 사용할 수 있는 시약들이 있을까요..?? 읽어주셔서 감사합니다.
회원작성글 hs2005  |  11.19
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