LB BrothㅡNaCl,trypton,Yeast 로 제조하는데 Trypton대신 Pepton써도 되나요?

선생님들 질병유도물질을 용해하는데 독성관련해서 문의드려요 DMSO 는 통상적으로 1~2%대이하면 세포 컨디션에 지장이 가지않는다고 알고있습니다. 다만 이번에 메탄올로 용해하는게처음이라 메탄올은 어느정도 퍼센트까지 낮춰야 세포에 영향을 끼치지 않을지 알수있을까요? 감사드립니다

gel extraction 진행후 ratio까지 확인했습니다. ratio는 잘나왔지만 6ng/ul 나왔습니다.  너무 적은거 같아서요 cloning 실험 하는데 최소 몇 ng 까지 있어야 하는지 알려주시면 감사하겠습니다.!  

저번 실험에서 t-vector와 ligation을 해서 새로운 vector를 만들었습니다. 그 vector에 insert DNA가 잘 들어갔는지 확인하는 실험을 했습니다. Colony에서 white와 blue colony를 각각 넣은 pre-mix를 PCR 진행해주었는데, PCR을 진행하는 이유가 뭔가요? 그리고 white colony를 넣은 pre-mix를 전기영동해주면, band가 나오는데 blue colony를 넣은 pre-mix를 전기영동해주면, band가 나오지 않더라구요 만약 insert DNA가 삽입이 되면 lacZ가 발현되지 않아 b-galactosidae가 분비되지 않아 x-gal이 분해되지 않아 white colony가 생성 되는 것까지는 이해가 되는데 왜 전기영동시 band가 나오지 않는건가요?

40% 아크릴아마이드를 30%아크릴아마이드로 농도를 낮춰 실험을 하고 싶습니다.   그이유는 SDS-page 조성표가 대부분 30% 아크릴아마이드에 해당하는 농도이며, 계속 진행해왔던 아크릴아마이드 농도는 30%이기 때문입니다.   40%아크릴아마이드를 전체농도에서 1/4만큼의 아크릴아마이드를 사용하면 동일한 결과를 얻을수 있지만 30%으로 농도를 낮춰 진행을 하고 싶습니다. 괜히 농도가 바뀌었다는 이유만으로 실험에 영향이 가지 않을까 걱정이 되기도 해서요 ㅠㅠ    이경우 아크릴아마이드 40%와 DDW(auto clave 하지않은) 3:1 로 희석을하여 잘 섞어주면 30%아크릴아마이드가 되나요?

안녕하세요 사진과 같은 결과가 나온 이유를 뭐라 설명해야할까요 ㅠㅠ 동일한 조건에서 실험했기 때문일까요?? PCR 첫실험이라 모르는게 너무 많네용 ㅠㅠ

안녕하세요. 논문 투고 관련해서 질문드립니다.   해외 저널에 논문을 투고 하고 있는 대학원생입니다.  투고할 때, 저자를 쓰는 부분에 모두 하이픈"-" 을 사용해서 이름을 쓰고 이메일도 제대로 썼습니다. 그런데, 투고 마지막 과정에서 최종 데이터 확인 부분에서 저자들 중 일부만 이름에서 하이픈"-"이 빠지고, 이메일도 g*******이렇게 나옵니다.. 다른 사람들은 안바뀌는데 일부 저자만 이렇게 바뀐적 혹시 있으신지 여쭤보고 싶습니다..

안녕하세요 프로바이오틱스 실험중인 대학원생입니다. HT-29 ,RAW 264.7 cell을 이용해 MTT실험을 진행중입니다. 하지만 균이 유산을 생성해서 생균으로 MTT 실험 시 결과가 너무 튀어, 사균으로 실험을 진행하고있습니다. 여러 프로바이오틱스 논문들을 찾아봐도 cell 실험때는 사균체를 처리해서 실험하더라구요. 찾아봐도 잘 안나오는데 cell 실험 시 생균이 아닌 사균으로 실험을 해도 되는 이유가 있을까요??

부레옥잠에서 사포닌을 추출하려고 하는데 어떤 추출방법이 있나요?

PCR 기계에서 온도조절이 위에서 되는 이유가 무엇인가요 ㅠㅠ? 아무리 찾아봐도 안나오네요

안녕하세요. 여러가지 peptidase를 이용해서 특정 peptide를 자른 뒤 TLC (Thin Layer Chromatography)를 수행한다면 어떻게 잘렸는지 확인이 가능할까요? 예를들어 Peptide는 LLVYGGLAAF라고 가정했을때, A peptidase cutting 시:  L/L/VYG/G/LAAF B peptidase cutting 시:  LLVYGGLA/A/F C peptidase cutting 시:  LLVY/GGLAAF 위처럼 잘린다면 TLC plate에 amino acid와 small peptide가 구분되어 나타나는지 궁금합니다. 미리 답변 감사드립니다.

유산균 생균수를 측정하는데 형광측정법을 사용하고자 하는데 혹시 어떤 시약을 사용하는지 알 수 있을까요?? 

안녕하세요,   MIC를 하려는 원료를 에탄올에 녹여야하는데, 그렇다면 MIC를 진행할 때 균주에 에탄올이 영향을 끼치지 않을지 걱정되어 질문 올립니다.        

안녕하세요. serial dilution 재현성 관련해서 고민이 많은 초보 연구원입니다. 제가 스탁 농도가 1.59mg/ml 인 recombinant를 희석해서 사용하는데요, 200ng부터 2배씩 serial dilution 하고있습니다. 그런데 항상 25ng, 12.5ng에서 값이 튀는게 문제입니다. serum을 dilution buffer로 사용하고있어서 serial dilution 하면 팁에 차고 올라와서 2배씩 내릴때마다 10초 기다려서 안에 차오르는거 다시 넣고 볼텍싱해서 하고있어요.  현재 정량하려고 하고있는데 정량곡선 그리면 항상 25ng, 12.5ng이 추세선보다 위에 존재합니다. 그래서 R제곱값도 계속 떨어지구요.  다들 serial dilution 어떻게 하시는지 궁금합니다. 개선점이 있을까요?  

안녕하세요... lx2 cell TGF-b 유도로 골머리를 썩고 있습니다 논문에 보면 10ng/ml에 lx2 cell 치면 timp1, col1a1 이 잘 유도가 된걸 볼 수 있었습니다.. 근데 제가 유도해서 qPCR을 진행하면 timp1은 오히려 줄어드는 결과를 봐서요 ㅠㅠㅠ.... 유도해보신 분들 제발 조언 부탁드립니다.!!!!!!!! cell counting 이나 media 등등... 참고로 저는 6 well에 2x10^5정도를 깔고 있고 media는 rpmi를 사용중에 있습니다. TGF-b를 24시간동안 쳤구요 ...ㅠㅠㅠㅠ

안녕하세요... 아직 실험실 들어온지 몇달안된 학부생입니다.. 도저히 머리로 이해가 안가서요..!!! TGF-b로 lx2 cell 유도 시키는 실험을 하고 있습니다. 근데 TGF-b를 새로 녹이려고 하는데 농도가 어려워서요 ㅎㅎㅎ....ㅠㅠ R&D TGF-b를 사용중이며 , 이를 녹여야하는데 Reconstitute at 100 μg/mL in sterile 4 mM HCl containing at least 0.1% human or bovine serum albumin 이렇게 나와있습니다. 1. 37% HCL의 M이 대략 12M이라 4mM을 100ml 만들려면 33~35ul가 들어가고 여기에 0.1% BSA를 추가하려고 합니다 여기까진 일단 stock 녹이는 용매를 만들 순 있는데.. 그 뒤부터가 문제입니다. 제가 가지고 있는 양이 5ug인데 저위에서는 100ug/ml을 만들라고 해서요 ㅠㅠㅠㅠ 제 방법은 5ug을 50ul에 녹이면 100ug/ml이 된다고 생각하는데 이게 맞을까요...??? 그리고 논문에 보면 TGF-B를 10ng/ml을 치라고 나와있는데 TGF (5ug)을 5ml에 녹이면 1ug/ml이고 이를 1/100하면 10ng/ml 이니까 이런식으로 cell에 처리를 하려고 했습니다 맞는지 한번만 확인해주시면 정말 감사하겠습니다... 도와주세요 ㅠㅠㅠ....