실험 Q&A Mol. Biol.-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
PCR 결과 두리뭉실한 밴드의 정체는?
PCR초보 (비회원)
안녕하세요- 항상 이 게시판에서 많은 도움을 얻고 있습니다. PCR을 처음 하고 있는데, 도통 알 수 없는 결과들이... 첨부한 사진 중 레인이 많은 것을 1번, 적은 것을 2번이라고 하겠습니다. rat brain의 total RNA 를 뽑아서 RT를 한 후, actin primer를 사용해서 pcr 을 돌렸습니다. (30cycle) 그 결과가 2번입니다. 상식적으로 모든 레인에 왕창 나와야 하는데 왜이리 조금 나왔을까요- 그런데 보통 RT 이후에 dilution 을 하지 않습니까- dilution을 깜박 잊었던 것입니다. 그래서 DEPC water로 dilution 하고, 다시 PCR 을 돌려서 gel 에 달려 보았습니다. 그 결과가 1번입니다. 2번은 왜 1번과 모양 차이가 이리 많을까요. actin band가 두리뭉실하고, 작은 사이즈의 엄청 많은 두리뭉실한 것들은 1번에선 없었는데 도대체 무엇이며, 왜 생긴 것일까요? 실험 과정 중 어느 부분을 점검해야 할 지 느낌이 오시는 분들께서 좀 도와주시면 정말정말 감사하겠습니다... ps. 또 2번에서 actin 이 많이 나와야 할 것 같은데 조금 나오는 것도 이상합니다. PCR을 30cycle 돌렸으면, cDNA가 조금만 있어도 엄청 많은 DNA가 만들어져야할텐데..
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