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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 serum free media관해서..남쪽 바람님 봐주세요..
serum free media  | 2006.01.19 00:00
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
저번에 serum free media에 관해서 문의하였던 학생입니다..
다름이 아니라..
시그마 제품으로 serum free media(Cat. no. A8806) 전용 BSA를 구입하여 사용하였습니다. 논문에 나와있던 대로 4mg/ml로 사용하였는데..
셀이 다죽었습니다..
제가 실험하는 세포는 MSC입니다..
혹시 이 세포에 맞는 serum free media조건을 아신다면..가르쳐주시요..
저는 F-12 배지에 Sodium bicarbonate를 첨가하고 여기에 culture media와 BSA를 첨가하였습니다..대조군으로 BSA를 제외하여 배양한 플라스크에서는 세포가 붙어서 느리게 자라는데..BSA를 첨가한 곳에서는 붙지도 않고 다떨어져 죽었습니다..
아무래도 BSA의 농도가 안맞아서 그런거 같은데..문제가 무엇인지 모르겠습니다..
조언 좀 부탁드립니다..
#media
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남쪽바람  |  2006.01.19    
예..
논문과 님의 실험이 다른 양상을 보인다면 골치아프시겠네요.
저도 그런 문제들이 있었죠..
분명 논문대로 했는데 제가 하면 안되는 문제들..
솔직히 대책이 없습니다. 저도 뭐라고 말씀드리기 어려운 문제이구요
BSA 안들어간 배지에서 세포들이 그래도 살아있다면 BSA없이 실험하시는건 어떨까요?
꼭 그 논문대로 하실 필요는 없을거 같습니다.
그리고 제가 BSA넣는 농도는 0.25%로 넣어서 2일간 배양한뒤 다시 serum free media로 갈아주고나서 처리하는 조건입니다.

제가 많은 도움이 못되었네요.
좋은 실험 조건을 꼭 찾으시길 바랍니다.

그럼.

엘피스  |  2006.01.19    
BSA는 cell을 바닥에 붙지 않도록 해주는 목적으로 많이 사용합니다. 그이유는 바닥을 BSA로 coating함은 물론 외부작업중 cell에 damage를 주지 않도록 큐션역할을 하기 때문입니다. 0.4%라면 상당한 양으로 cell이 붙지 않는 것이 당연할 수도 있습니다. 농도를 조절해 보시고 기존에 이런 시스템으로 부착세포를 배양한 논문이 있는지 찾아보시는 것이 어떨지요?

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