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본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다. |
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항생제가 amp라면 incubation을 빼버리고 깔아보세요.
그리고 com cell 효율도 한번 측정해 보시는 것이 좋을 것 같습니다. |
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ligation도 gel을 결어 확인 한 결과 linear form vector가 없는 걸 확인 했구요 ㅠㅠ
-> 이게 무슨 말씀이신지???
결과적으로 나온 DNA가 모두 size가 이상한 xxx라는 것인가요?
DH5a vector와 insert의 길이가 길어지면 가끔 미쳐서 recombination이라는 환상적인 활동을 시작합니다.
이렇게 되면 colony를 찍어서 mini해서 잘라보면 넣어준 vector보다도 작은 이상한 놈들이 들어있곤 한데... <- 혹시 이것이 님의 case?
그렇다면 E.Coli 균주를 다른 것으로 바꾸시길 추천합니다.
XL1-blue내지는 JM109... 이것도 안되면 Stbl등등의 DNA stability를 높인 균주...
invitrogen이나 stratagene에 몇몇 균주가 유명한데, 사서 써 보세요.
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 roprin | 2010.07.22
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ligation도 gel을 결어 확인 한 결과 linear form vector가 없는 걸 확인 했구요 ㅠㅠ
- 이건 ligation을 위해 pRS425에 enzyme을 처리한후 gel 걸어보면 vector가 잘려서 linear form을 확인 할 수 있자나요?(gel상의 band를 보구요) ligation 후에는 이 band가 안 뜨더라구요 그래서 linear form이 없다, 즉 ligation이 되긴 됐구나 이렇게생각한 것 입니다.
그리고 지금 제 문제는 ㅠ
transformation후에 colony가 안 뜬다는 것입니다 ㅠ
친절하신 답면 감사합니다 >ㅁ |
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