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Molecular Biology-Protein
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Western Blot Analysis
조회 5430
immunohistochemistry의 background 제거하기?
궁그미100
|
2006.10.06 16:35
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(
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안녕하세요~
immunohistochemistry에서 형광 dye로 염색 후,,
background
가 심해지는 경우 사용하는 물질들이 무엇이 있나요~
그리고,,,,
다른 질문인데요,,
antibody가 western용으로만 제작된 것인데요,,
immunohistochemistry에 사용해도 이상 없겠지요?
ㅡ.ㅡ;;;
실험에 앞서 불안함만 앞선다는..^^;;
한가위 연휴 잘 보내시길~~
#immunohistochemistry
# background
# western antibody
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juno
|
2006.10.06
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Background
를 줄이시려면 titer를 잘 조절하시고 blocking을 절절히 하시면 되겠지요. ^^
Antibody와 조직에 따라 blocking에 신경을 써 주셔야 할 것들이 있습니다.
Mouse 조직에 mouse 로부터 얻은 일차 항체를 쓸 경우라던지 auto-fluorescence가 많은 조직을 염색하게되는 상황이라던지...
그런데 어떤 상황인지 정보가 없네요. ^^
Western용으로만 제작이 된다는 것의 의미를 잘 모르겠습니다만 그 항체가 western 외에는 working을 안한다면 당연히 IHC하면 실험이 안되겠지요.
하지만 test 해본적이 없다면 실험하시면서 조건을 맞추어 보시면 되겠습니다.
IHC는 항상 control을 잘 짜서 실험하셔야 신뢰할 수 있는 데이타를 얻을 수 있습니다.
그렇지 않으면 뭔가 염색이 된다고 해도 이게 진짜 signal인지 가짜 signal인지 구분할 수가 없거든요.
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