이 전에 제가 stem cell에 retinoic acid를 처리하여 분화를 시키는 실험을 한 적이 있습니다.
RA는 아시다시피 lipid soluble하기 때문에 DMSO에 녹이셔야 합니다. 일단 RA를 구매한 곳에서 최대한 물질에 대한 정보를 확인하십시요. solubility라던지..
RA는 빛과 열에 매우 약합니다. 어느 정도 사이즈의 RA를 구매하셨는지 모르지만, 대부분 아주 작은 사이즈로 구매하셨다면 solubility를 확인해 보시고 바로 그 vial에 DMSO를 넣어서 녹이시면 됩니다. 만약 hood에서 녹이실 거면 형광등은 끄고 하십시요. 그리고 aliquot해서 -80C에 보관하시면 됩니다. 저 같은 경우 호일로 감싸줬었습니다.

그리고 세포에 처리하실 때는 1/1000 dilution으로 하시면 좋을 겁니다. 즉 stock을 1000x로 만드신 후 1 ul RA를 1 ml media에 처리하셔도 될 겁니다. 세포에 바로 처리하는 것 보다는 1 ml에 1 ul RA를 넣고 잘 섞은 뒤 세포에 media change하는 것 처럼 넣어주시면 됩니다. 그리고 control에는 그에 해당되는 DMSO를 넣어주시면 비교 가능하시겠죠.. 키우시는 세포가 어떤 종류의 세포인지는 모르겠으나 cell line의 경우 0.5%까지 처리했을 때, 죽는 경우는 없었습니다. (물론 제 경우지만..) 하지만 분화실험을 하신다고 하니 최대한 DMSO%를 낮추시는게 좋을 것 같습니다. (0.1% 이하로). 아니면 control 실험으로 DMSO%를 다르게 해서 실험을 해 보는 것도 괜찮을 것 같습니다.

도움이 되었으면 좋겠습니다.