실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
-
레벨5
밝게삽시다.
-
11.07.18 12:47
좀 오래 보관했을 때 항체 희석배수는 변했었는데요....
항체 희석배수 낮추거나 반응시간을 늘려서 해 보신다음 약하게 라도 반응이 있는지를
확인해 보시면 항체 역가에 문제가 생긴 것인지는 판단 가능할 것 같은데....
PBS때문은 아닌 것 같습니다. 저도 여러번 하면서 한가지만 사용했던 것은 아니니깐요....
희안하게도 IHC 는 그런 경우가 종종 있습니다. 너무 패닉당하시지 말구요, 차근차근 조건 달리해서 다시 해보시기 바랍니다.
똑같은 프로토콜로 해도 나올 때가 있고 안 나올 때가 있고, 심지어 계절에 따라 다르기도 합니다.
먼저 위에 분 말씀처럼 항체 dilution 조절과 반응시간을 조절해 보시고
Tris EDTA(pH 9.0)을 retrieval시 사용해 볼 수도 있습니다.
retreival 은 100도로 하셨다고 했는데 무엇으로 하시나요?Microwave로 하시는지요?
아무튼 옛날에 나왔던 Frozen tissue에도 안 나온다니 조건을 다시 잡아야 할 듯합니다.
혹시 항체가 변성되었을 가능성도 배제할 순 없지만 저장이 제대로 되었다면 3개월만에 문제가
되진 않을 겁니다.