안녕하세요, 미생물분야를 이제 막 시작하는 완전초보 입니다.
토양에서 추출한 DNA를 이용하여 RealtimePCR을 하려고 하는데요,
독학을 하다보니, 혼돈스러운 부분이 많아 이렇게 여쭤보게 되었습니다.
Realtime pcr 절대값 분석인 Absolute quantification을 하려고 하는데요,
NTC: DNA가 포함되지 않은 Mastermix
STD: Mastermix + (???)DNA 샘플을 순차적으로 희석하여 5개정도의 농도로 만들어 스탠다드커브를 그리게 함.
UKN: Mastermix + 추출한 DNA
제가 생각하고 있는 NTC, STD, UKN의 의미가 맞나요??
또, 스탠다드DNA샘플로 보통 농도를 알고있는 샘플을 쓴다고 하는데 그게 따로 파는건가요? 아님 추출한 DNA농도를 측정해서 하는 건가요? 추출한 DNA로 하는것이라면, UKN은 STD와 어떻게 다른건가요?
그리고 상대정량을 할때는 STD가 필요없다고 하던데... 실험방법이 많이 달라지나요?
이상 완전 초보의 초보적인 질문이었습니다. 허접한 질문이지만 많은 답변 부탁드립니다ㅜ.ㅡ ㅎ |
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