안티바디를 안티바디 제작업체에 의뢰하여 만들어 진 것을 테스트 하고 있는 학생입니다.

C-term과 N-term에 대한 레빗 안티바디를 얻어서 다양한 실험들을 진행하였습니다.

과발현 시스템에서

C-term 에 대한 안티바디 : WB, IP 확인

N-term 에 대한 안티바디 : WB, IF 확인

이렇게 C-term에 대한 안티바디는 WB, IP 모두 잘 되는 것으로 확인이 되었고

N-term에 대한 안티바디는 WB와 Immunocytochemistry만 되는 것을 확인했습니다.

문제는 C-term에 대한 안티바디로 Immunocytochemistry를 진행했을 때입니다.

non-specific signal이 지금까지 이미징 해봤을 때 전혀 보지 못한..

세포들이 붙어있는 커버슬립 바탕이 모래를 뿌린것처럼 뿌옇고

또한 뭔가 동그랗게 뭉쳐있는 동시에 세포들이 빛을 내는 것이 아니라 

반대로 까맣게 그림자처럼 보입니다.

안티바디 타이터를 낮추어도 같은 현상이 나타납니다.

같이 제작하였던 안티바디를 이용한 실험과 세트로 같이 실험하고 있는데

C-term 안티바디를 사용했을 때 이런 현상이 나타납니다.

왜 이런 현상이 나타나는지 궁금합니다 ㅠㅠ

전문가님들 도와주세요..