QuickChange Site-directed mutagenesis를 2003년도 이용했을 때는 5'-phosphorylated primer 짜고, PCR한 후, Dpn I 처리하고, PCR product를 T4 DNA ligation 등등 했는데, 2004년 이후부터는 site-saturation mutagenesis가 등장했습니다. Pfu polymerase로 template plasmid를 PCR하고, Dpn I 처리한 후, 합성된 nick circular plasmid 를 바로 transformation하는 방식이더군요.
그런데 용어 site-directed mutagenesis와 site-saturation mutagenesis 의미 차이가 뭔지 잘 모르겠습니다. 왜 이런 이름을 붙였는지 혹시 아시는 분 계세요??? |
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