[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
벡톤디킨슨코리아
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
웹진 6월호 오픈
전체보기 실험 Q&A 안전점검 LABox
 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
조회 5771  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 SDS-PAGE gel 문제 ㅠㅠ급해요 도와주세요~!
실험  | 2013.07.09 19:46
 답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
SDS-PAGE gel을 로딩하고 나서, 밴드가
staking gel에 일렬로. 한 줄로 서지 않고요
쭉 퍼져있어요ㅠ
그리고 퍼진 상태로 내려오니 잘 될리가 없겠죠;;;

그래서 그걸 coomasie blue로 staing 해보니까 더 가관이예요ㅠㅠ
10well에 걸었는데, 어떤well은 15well에 건것처럼 well이 좁고,
또 그옆 well은 두배로 넓어지고, 라인도 선명하지 않고요.

SDS-PAGE gel이 뭐 대단한거라고 렇게 속썩이네요-
왜이런지 아시는분 있으시면 도움좀 주세요ㅠㅠ
제발요 플리즈~~

premix로 만들어 놓고, 거기에 APS, TEMED만 따로 첨가해서 만드는데
다른 사람들은 문제가 안생기는데, 저만 그래요ㅠ
#SDS-PAGE
 
#gel
 답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리Kim  |  2013.07.09   
glass를 깨끗이 닦으시나요?
개구리carpe diem  |  2013.07.09   

충분히 믹싱해서 젤을 굳히신 게 맞나요?
전 vortexing해서 섞어주고 거품생기면 기울여서 따서 사용합니다.
실험  |  2013.07.10    
네~ 글래스도 잘 닦고, 거품도 생기지 않았어요ㅜ
알kasia  |  2013.07.10   
gel을 만드시는 곳의 온도가 높으신건 아닐지...

폴리아크릴아마이드 젤은 온도가 높을수록 빨리 굳으니까요..
격자도 고르게 잘 안만들어지고...

요즘 여름이기도 하고.. 저도 에어컨 끄고 실험하다가 예상외로 젤이 빨리굳어버려서

다시 에어컨 키고 젤을 다시 만들었거든요;;;
개구리ExDown's  |  2013.07.11   
sds buffer 체크해보세요. 저라면 가장먼저 buffer부터 바꿔보겠습니다.

다른게 문제가 아니라면요
개구리유전학도^^v  |  2013.07.11   

제 경험상 well volume에 비해서 loading 양이 많거나

또는 윗분 말씀처럼 running buffer 상태가 안 좋으면 그런 식으로 나오더군요.


단백질 농도를 높이는 방법/고농도 sample buffer 사용/running buffer 다시 만들기

살짝 말씀드려 봅니다.

그리고 재료의 문제라면 pre-casting gel 사용하시지 않는 이상,

다른 사람의 Tris-Cl (pH6.8) buffer를 한번 빌려 써 보세요.

역시나 가장 기본적인 실험이 가장 어렵네요...
cast21  |  2020.04.06    

혹시 Stacking Gel 만드실때 pH8.8 쓰신게 아닌지 조금 의심이 갑니다.

 

 
답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
인성크로마텍 인성크로마텍
[다중 면역형광 이미징 시스템] ORION™ 한번의 면역염색 및 스캔으로 20 여 개의 바이오마커 동시 분석
에이비클로널코리아 에이비클로널코리아
1차 항체 20µL 균일가(최대 50% 할인) 행사_ABclonal Korea (6.16까지)
바이오닉스 바이오닉스
[TECAN No.1 한국공식대리점] TECAN 대행사! 견적 및 Demo 신청시 상품권 지급 (7.2까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
원하는 VOLUME으로 3+1 ! 3개 구매시 1개 무조건 증정! (~23.06.30까지) (12.31까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
EXOSOME 추출 쉽고, 빠르고, 높은 수율을 원하신다면 EXOSOME Production Kit
코람바이오텍 코람바이오텍
[Cell Signaling Technology] Primary Antibody 전제품 3개 구매 시 20%.. (7.31까지)
최근등록   더보기 >
분광광도계를 이용해 미세플라스틱의 양을 구할 수 있을까요?   06.10
ion Exchange Chromatography 관련 질문   06.10
subcloning insert가 계속 중간에서 잘려서 들어가는데 왜그런건지 아시는 분 있...   06.10
항균성 오류 원인...   06.10
qPCR 시 UDG 농도   06.10
single cell RNA sequencing 같은 data를 다루는 법 과외..받을 곳...   06.09
ADAM cell counter 사용해보신 분들 계신가요?   06.09
캔맥주, 병맥주 바닥에 있는 yeast 찌꺼기를 되살릴 수 있습니까?   06.09
웨스턴 Western Blot 실험 관련 질문드립니다.   06.09
60 pi dish DNA transfection   06.09
투표진행
Q. 세포 실험할 때 장갑을 끼고 하시나요?
참여하기
최근답변자 우수답변자
대왕개구리SPEED

꽃개구리bio

올챙이밍고

알나만안돼

개구리범수리

개구리푸른고래

대왕개구리강시

뒷다리쿵쿠따리쿵쿠..
대왕개구리안재진

꽃개구리착한사람

개구리secu

꽃개구리juno

꽃개구리개그

개구리별숲

개구리Lucid

개구리G.P.Ts
실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
홈  |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의		 트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
에펜도르프코리아 광고