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Immunocytochemistry
조회 2172
[IHC] 이(본문 속 그림) IHC에 대해 알려주시면 감사하겠습니다.
붐붐파우
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2014.08.28 10:21
안녕하세요
Muscle 내 proliferated cell을 보고 싶어 BrdU를 detection하려 하는데요
위와 같은 staining 은 어떤걸 사용해야 하는지 알려주시면 감사하겠습니다.
Laminin과 Dystrophin staining이라고 하네요.
두 staining을 한 후에 BrdU를 디텍션하면 위와 같이 나온다고 하거든요
#brdu
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으흐음
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2014.08.28
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제가 잘못봐서인지 모르겠지만 붉은색으로 한가지만 염색된것같아 보이네요. 초록색이 BrdU 라면요.
보니 형광면역염색인데 예를들어 abcam사의 Alexa 들중 색깔에 맞춰 사용하면되는데요.
Secondary Ab에 형광이 달려있어서 일반 IHC랑 같습니다 방법은 마지막에 DAB로 발색을 안하고 그냥 봉입해서 본다는것만 빼면요. 형광 Secondary Ab를 잘 골르셔서 하면 됩니다.
답변추천
2
붐붐파우
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2014.08.28
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감사합니다 으흐흠 선생님!!
그러면 일반적인 IHC 프로토콜로 staining 작업 후 secondary Ab만 형광 발색되는걸로 해서 마지막 처리 후 암실에서 보면 저렇게 초록 형광으로 나타나 보인다 이거죠?
큰 도움이 됐습니다 감사합니다!
답변추천
2
형광현미경
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2014.09.03
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붐붐파우님,
제가 정확히 이해했는지 모르겠지만, 암실에서 보면 형광이 보이는 게 아니라, 형광현미경을 사용해서 봐야 보인다고 알고 있습니다.
물론 형광현미경은 어두운 환경에서 보는 게 좋으니, 형광현미경을 암실에 두는 경우가 많지요.
혹시나 해서 몇 자 적어봤습니다. 제가 잘못 이해했다면 죄송합니다.
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