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 전체 > Molecular Biology-Protein > Western Blot Analysis
조회 5428  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 sds-page gel
초보  | 2007.10.30 16:47
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
질문이 두개인데요....

1. sds-page gel을 resolving-15%, stacking-5% 로 항상 써 왔습니다.
이번에 7.5%로 내릴려고 하는데 비율 계산을 못해서..ㅡ.ㅜ

15%를 쓸 때
d.w 7.1ml
40% acrylamide 7.5ml
1.5M Tris-cl(ph 8.8) 5ml
10% sds 0.2ml
10% aps 0.2ml
TEMED 8㎕
이렇게 쓰고 있습니다.

7.5%로 사용할려고 하는데 어떻게 해야하는지 몰라서요 ㅡ.ㅜ

답변 부탁드립니다~~~~



2. non-denaturing gel을 내려야 하는데
위에처럼 20ml을 만들면 다 똑같이 넣고 sds만 빼고 나머지는 d.w로 채우면 되나요?
그리고 sample을 준비 할 때 sample buffer(2* sample buffer + DTT)쓸 때 DTT을 빼고 boiling 하지 않고 loading 하는 게 맞는지요..
첨 해보는지라 이것저것 알아봤는데 확실한지 잘 모르겠어서 여쭤봅니다~

답변부탁드립니다~~
#sds-page gel
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리안재진  |  2007.10.31   
15%를 쓸 때 조성이 아래와 같다면...

d.w 7.1ml
40% acrylamide 7.5ml
1.5M Tris-cl(ph 8.8) 5ml
10% sds 0.2ml
10% aps 0.2ml
TEMED 8㎕
이렇게 쓰고 있습니다.

7.5% gel 조성은 Acrylamide 만 반으로 줄이면 됩니다. 그리고 나머지는 DW로 채우면 되고요... 때문에

d.w 10.35ml
40% acrylamide 3.25ml
1.5M Tris-cl(ph 8.8) 5ml
10% sds 0.2ml
10% aps 0.2ml
TEMED 8㎕
이렇게 쓰고 있습니다.

non-denaturing gel은 detergent 요소를 빼고 그부분을 물로 채워서 내리면 됩니다.
초보  |  2007.10.31    
좋은 답변 감사합니다~~^^
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