현재 gDNA 가지고 qPCR을 하고 있는 중입니다
standard를 잡으려고 농도를 200, 100, 50, 25, 10 으로 물로 희석하여 실험하고 있는데요
소의 dna이고 조직에서 추출하였고 순도는 1.8입니다
product size는 667 이고요
문제는 200이랑 100농도에서 증폭이 안된다는 겁니다.. 100은 그나마 ct값이 19는 되는데
200농도는 아예 증폭이 안되거나 ct 값이 2~3정도 처음부터 올라가거나 계속 이런식으로 결과가 나옵니다 ㅠㅠ
size문제라고 생각해서 500넘는것도 해보았지만 그것은 잘 나왔습니다
시약도 바꿔보고 primer도 다시 희석해봣지만 ..
다른 size 작은 것들은 200농도에서도 잘만 증폭됩니다 ㅠㅠ
아무리 찾아보고 고민해봐도 해답을 찾기가 힘드네요
결과 사진을 첨부하겠습니다 증폭된것은 100,50,25,10이고 밑에 증폭안된게 200입니다.
혹시 조금이라도 아시는분 조언 부탁드립니다 !!,ㅠㅠ