Rat 과 mouse 뇌의 substantia nigra 에서 microglia 를 보기 위해 immunohistochemistry 를 하고 있는데 전혀 나타나지가 않아서 경험있으신 분들의 제언을 부탁드립니다. OX-6 (AbD serotec), OX-42 (Biorbyt), IBA-1 (Bioss) 등 항체 모두 안 되었습니다. free floating section 을 사용하고 염색 프로트콜은 다음과 같습니다. 20%NGS로 block 1hr -> primary Ab overnight -> secondary Ab 1hr -> ABC 1hr -> DAB (5-30분)
첨부사진에서처럼, 정상뇌인데도, resting microglia 는 한 번도, 한개도 보이지 않으니 사진의 염색물들이 (혹시 activated) microglia가 아니라 다른 종류의 세포라고 판단하고 있습니다. Tyrosine hydroxylate 와 GFAP는 염색이 잘 되는데 Microglia 만 무슨 연유에선지 몇 달째 안 되고 있으니, 어떤 comment 라도 도움이 될 것 같아 부탁드립니다.