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1차 안티바디가 specific 하면 2차는 30분정도만 붙여도 충분합니다.
항체반응 후엔 워싱 스텝이 중요하구요
워싱스텝을 안 적으신거보면 혹시 빠져있는건지 궁금하네요
아니요 워싱 스텝은 포함이 되어 있습니다....
상온에서 안정시킨 1x PBS를 사용하여 워싱을 하고 있습니다
제 의견으로는 primary 1시간으로 조절하시구요. Secondary는 30분으로 그리고 washing buffer 를 TBST 로 사용해보세요. Tween20 이 들어간게 아무래도 세척력도 좋고 TBST가 background 를 좀 더 깨끗하게 나오더라구요.