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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
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질문 cell counting 질문 드립니당.
알cell count  | 2016.03.11 11:43
첨부파일 파일첨부: 그림1.jpg (76 KB)
이미지 첨부파일
cell counting 하여 cell seeding 하려고 하는데

헷갈려서 질문 드립니다.

제가 직접 계산해서 이미지 파일로 올렸는데 이렇게 하는게 맞는건가요? ㅠㅠ
#cell counting
 
#hemocytometer
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리안재진  |  2016.03.11   

어제도 답변을 달았었는데...
1. 카운팅을 위해 4칸을 계수한것 인가요? 그래서 300마리가 있고... 1칸 평균 75마리 인것인지요?
2. dilution factor와 트립판 블루가 2로 적혀 있는데... 아무튼 총 헤마사이토미터에 넣은 셀은 4배가 희석이 된것인가요?

그렇다면 75마리 X 4배희석 / 0.1ul 입니다. 300마리/0.1ul 네요 ml로 계산하려면 10^4을 곱해주면 됩니다. 최종 산술식은 75 마리 X 4배 희석 X 10^4 / ml 의 농도로 나옵니다.
3 X 10^6/ml 이네요...

필요한 셀의 양이 7 X 10^6 이니 필요하신 양은 2.3ml 이 필요합니다.

질문자가 실수하신 부분은 총 Cell의 수를 구해놓고 단위는 ml로 했다는 것입니다.
지금 구하신 식에서 5를 곱한것을 빼면 ml 당 셀의 계수를 얻을수 있습니다.

cell count  |  2016.03.11    

감사합니다. ^^

5를 곱해준 것은 cell 을 5ml media 에 resuspension 해주어 media에 들어있는 총 cell 수 를

파악하기 위해 한 것입니다.

그리고 찾아보니 만약 cell suspension 한 데에서 20ul cell + 트립판블루 20ul (1:1) staining하고

여기서 20ul 를 hemocytometer 에 넣고 counting 을 했다면 희석배수는 2가 되는것이지요?


이렇게 답변 달아주셔서 진심으로 감사합니다. ^^

개구리sean  |  2016.03.15   
hemocytometer에 20 ul가 다 들어가나요? 보통 10 ul 넣는 걸로 알아요.

만약 세포 20 ul + trypan blue 20 ul를 섞은 후 hemacytometer에 20 ul 넣었다면 희석배수는 2가 맞고, 10 ul 넣었다면 희석 배수는 4가 되므로,

전자의 경우 (300/4)*2*10^4 = 1.5*10^6/ml,  후자의 경우라면 (300/4)*4*10^4 = 3*10^6/ml 가 세포 농도입니다.
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