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질문 OD값과 콜로니카운팅 표준곡선
알심장  | 2016.05.26 23:07
안녕하세요


궁금한게 있어 질문드립니다


E.coli가 아닌 다른 균을 OD값과 평판도말법을 통해 표준곡선을 그리려고 합니다


그래서 실험설계를


1. Preculture O/N


2. Serial dilution (1*10^0에서 1*10^-5 까지)


3. 각각의 OD600값을 측정한다


4. OD값 측정 후, 각 dilution 용액을 1/100씩 희석한다


5. Agar 배지에 100 ul씩 분주한 후 24 h 배양한다


6. 배양 후 콜로니 수와 OD값을 통해 비례식을 그린다


이렇게 하면 OD값에 따른 생균수를 구할 수 있는거 맞나요?

잘못됐으면 좋은 답변 부탁드립니다 ㅠㅠ
#OD
 
#colony counting
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
올챙이Kh:D  |  2016.05.28   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
전체적으로 맞는 방향이긴 한데,
현재 Control 곡선을 처음 작성하려고 하시는 것 같은데, 
  OD값과 CFU값은 비례하긴 한데 말이죠.
  그,, 배양 환경에 따라 이게 값이 또 여러 갈래로 튑니다.
  BHI medium에서 한 거랑, NA medium에서 한 거랑 비교해보면 분명히 다른 비례식과 곡선이 나올 거에요.
 그 점 주의해서 하시고..

저라면 그냥 배양액 한 4~8개 준비한 다음에,
아침 9시에 1번 배양액에 균액 접종
정오에     2번 배양액에 균액 접종
오후 3시에 3번 배양액에 균액 접종
오후 6시에 4번 배양액에 균액 접종

이런 식으로 시간을 다르게 접종한 다음, 배양액을 전부 Shaking 배양하면서 시기마다 OD값 측정하고,
그렇게 하면서 plate에 깔아서 CFU도 계산할 것 같습니다.

혹시나 해서 말하는 거지만, 배양 후 Colony 수를 통해서 구한 CFU/mL 값으로 비례식 그리는 게 맞는 것 같습니다.
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