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6well에다가 뒤집에서 seeding 한다는게 무슨 이야기 인지 이해가 안갑니다만
Counting은 원래 Upper chamber에 seeding 한 density가 있잖아요?
그럼 다음날이나 이후에 counting 할 때 Upper chamber의 cell과 Lower chamber의 cell을 counting 해서 수를 비교하면 migration을 확인이 될 거 같은데요?
방법은
1. 기존 cell subculture 처럼 trypsin-EDTA 처리후 counting
2. Staining 후 counting
staining은 논문에 서 봤던게 있는데 기억이 안나네요..
Migration 실험 번거롭고 짜증나겠지만 성공하길 빕니다.
아아 ^^ 답변 무슨말씀인지 이해했습니다~
그런데 저는 지금 서로 다른 두 cell을 seeding 하는 거라서..ㅜㅜ..
하나의 cell을 바깥쪽 , 또다른 하나의 cell을 안쪽에 seeding 하는데
바깥쪽에 seeding 하실 때 사용하는 방법을 여쭤봐도 될까요?
질문자님, 혹시 transwell co-culture 실험 하실 때 insert mesh표면 윗면,아랫면에 코팅하듯 cell을 키우셔야 하는건가요? 왜 굳이 그렇게 실험을 하시는지..?
일반적으로는 insert 안쪽에 cell 한가지를 넣고, insert를 담그는 well 바닥쪽에 cell 나머지 한가지를 넣어서 insert부분에 넣은 cell의 migration이나 paracrine factor effect를 확인하는데요.
(https://openi.nlm.nih.gov/detailedresult.php?img=PMC3334900_pone.0035446.g001&req=4)
한번 확인 해보셔야 할 것 같아 답변 남깁니다.
오잉님 무슨말씀인지 알았습니당..ㅋㅋ
그런데 저는 코팅하듯이 키우는건 아니고..다른 두종류의 쎌을 in과 out에 각각 배양할때
어떻게 하시는지가 궁금했던거였습니당^^
답변 감사드립니당~~~이제야 확인했네요 ㅜㅜ,,
아참...그리고 저는 co-culture가 아니고..triple이라서 위아래면 다써야해서..
그래서 in, out seeding 하실때 어떻게하는지가...궁금했던거였어요 ㅜ..
고전을 면치 못하고 있습니다...슬프네요 ㅋㅋㅋ ...ㅠㅠ
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트랜스웰
(비회원)
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23.01.11 13:20
trans-well 뒤집어서 cell seeding 실험중인 석사생입니다 ...
시간이 많이 지났지만 seeding lid 바꿔서 진행하셨나요...
저도 항상 뚜껑에 묻어서 고민인데 tip 찾으시면 알려주실 수 있으실까요..ㅠㅠ
부탁드립니다. 감사합니다.