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 전체 > Immunology > ELISA
조회 8836  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 ELISA할때 96well plate 관하여 문의드립니다.
ELISA  | 2008.04.23 11:46
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
안녕하세요 답변주시면 정말 감사드리겠습니다.

(- -) (_ _)

ELISA를 할때

96well 은 nunc 제품으로 - MaxiSorp™, with high affinity to molecules with mixed hydrophilic/hydrophobic domains

위 제품을 사용하고 있는데요

희석을 편하게 하기위해 위 96well에 혈청 sample 을 희석하느라 1개 사용하고

반응 plate 에 덜어서 multipippet 으로 덜어서 ELISA 반응을 진행합니다.

그런데 누군가가 희석한다고 96well 을 사용하면 잠깐이지만 그동안 well 에

항체나 단백이 부착되어 덜었을때 순수한 양이 다 안딸려오지 않겠냐고

일일이 microtube를 사용하라고 충고해주었습니다.

정말 그런가요?

그럼 희석을 용이하게 하기위해 high affinity 가 안되어 있는 96well 은

어떤 제품이 있나요?



#ELISA
 
# 샘플희석
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
개구리ryan  |  2008.04.23   
님이 말씀하신 바가 희석을 96well-plate에 하고 다시 그것을 96well-plate에 multi pipette로 옮겨서 실험한다는 건가요?

96well-plate에 희석을 하는 이유는 원하는 dilution point의 sample을 사용하기 위함인가요?

일반적으로 희석시에는 micro tube를 사용합니다.
제 생각으로는 잠깐이 얼마만큼을 의미하는 지는 모르겠지만 별 상관이 없을 듯도 싶는데(plate에 혈청이나 dilution buffer만으로 RT에서 잠깐 시간동안 plate에 반응하는 일은 없을 거라 생각되거든요), 혹시나 싶으시면 희석용 plate를 다시 ELISA로 check해 보세요.

희석을 하기위해 사용하시려면 일반 정량용 96-well plate를 사용하세요. 그런편이 더 가격적인 면에서 이득이 될테니까요..
ELISA  |  2008.04.23    
먼저 답변 감사드립니다.

샘플을 한번에 희석하려다 보니 일일이 microtube에 하는것이 전 너무 힘들더라구요

96well plate에 옮길때도 하나씩 해야하고 ...

물론 plate는 무지 아깝지만....96well 에 희석하는것이 훨씬 편해서 ^^;;;

chi  |  2008.04.23    
이용하시는 ELISA format에 따라 다소 해석이 달라질 수 있을 것으로 보입니다.

1) 희석하시려는 물질을 96well에 결합시켜 ELISA를 수행하신다면 희석시 많은 loss가 발생될 것으로 보입니다.특히, 사용하시는 96 well은 Maxisorp이므로 더욱 심할 것으로 보입니다. Maxisorp는 일반 96 well plate에 비해 많은 양을 결합시키기 위해 개발된 것이기 때문입니다. 보통, Maxisorp에서 고정화시킬 때 짧게는 1시간 (상온~37℃)이나 길게는 overnight (4℃)으로 설정을 합니다.

2) 희석하시는 물질이 blocking solution내에 희석되어 있는 경우에는 희석을 그렇게 하셔도 될 것 같습니다.

따라서, 1)번의 경우에는 E.P. tube를 이용하시거나 결합 능력이 떨어지는 다른 microwell plate를 이용하셔서 빠른 시간 내에 희석을 하시는 것을 나을 듯 싶습니다.

ELISA  |  2008.04.25    
답변 너무너무 감사드립니다.

^^;;;

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