실험 Q&A Immunology > Immunocytochemistry
immunocytochemistry 관련 질문
학생 (비회원)
rabbit에서 분리해 낸 특정 단백질에 대한 항체의 워킹 여부를 확인하기 위해서 immunocytochemistry를 하고 있습니다. 그런데, 제 단백질이 세포 표면에 발현하기 때문에 immunocytochemistry 과정 중 Permeation 과정을 빼고 immunocytochemistry를 했는데 2% PFA로 고정을 해서 그런지 permeation이 되어서 컨트롤로 넣어준 phalloidin이 F-actin을 잡았습니다. 그래서 아예 PFA로 고정하기 전에 1st Ab를 상온에서 한시간 반응시킨 후에 여러번 워싱하고 PFA로 고정하였더니, Cell의 모양이 응축되거나 cell이 거의 떨어져 나가서 관찰이 힘든 상황입니다. 제가 알고있는 방법말고 세포 표면에 발현되는 protein만 볼 수 있는 immunocytochemistry 방법을 아시는 분 조언좀 부탁드립니다.
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