실험 Q&A Mol. Biol.-RNA > Northern Blot
blotting 후에 film에 exposure 할때 온도가 중요한가요?
레벨2 거북선 (과기인)
안녕하세요. 저는 석사과정 학생입니다. 저희 실험방은 노던을 주로 하는데요. membrane에 방산선동위원소로 label한 프로브를 hybridization 시켜서 film에 casset안에서 노출시킵니다.
근데 저희 실험방에서는 항상 membrane이랑 film이랑 카제트에 넣은뒤에 딥프리저(-70ºC)에서 노출을 시키거든요.
시간은 시그널에 따라서 overnight하기도 하고 몇시간만 하기도 합니다.
근데 왜 딥프리저에서 노출을 하는지 선배들이 아무도 모르더라구요 ..? 검색해봐도 exposure 관련하여 온도에 대해 고찰하는 경우는 또 거의 없다싶이 하구요 .. 단순히 어두워서 그런건가? 라고 하기에는 차라리 암실에 그대로 두는게 더 낳을거 같고...
또 western 할때는 전부 상온에서 expose하잖아요 ;;
이게 특별히 이유없이 그냥 실험방 관례라서 다들 그렇게 하는걸까요?? 친구는 뭐 '샘플이 더이상 reaction 못하게 하는거다!' 라고 하는데 .. 젤 내리기전에 샘플들 inactivation 충분히 시키는데 이게 뭔소린가 싶기도 하구요.
아시는 분 있을까요?
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