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 전체 > Chemical biology > Analysis
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질문 TLC와 open column chromatography의 eluent 질문드립니다.
올챙이소순굉(대학원생)  | 2019.10.08 10:33

 

 안녕하십니까 초보 실험생입니다.

 

천연물을 70% EtOH으로 추출 후 용매별로 분획을 진행하였고 assay결과 water fraction에서 활성이 나타나서 TLC로 분리를 진행하고 있습니다.

 

현재 open column chromatography를 위해 TLC로 용매조건을 잡아가는 중인데 극성 물질로 판단되어 극성 물질 분리에 사용되는 용매조건으로 실험하고 있습니다.

 

 이전에 다른 천연물실험에서 open column을 진행했을 때에는 두 가지 유기용매로 gradient를 걸어서 했습니다.

 

1) 그런데 만약 3가지 이상 유기용매로 TLC분리 조건을 잡은 후 open column시 어떻게 gradient를 걸어야 하나요?

 

2) 천연물 극성 물질의 TLC 조건도 추가적으로 알려주시면 감사하겠습니다.

 

 

답변부탁드립니다. 감사합니다:)

#TLC
 
#open column chromatography
 
#eluent
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  2019.10.08   

TLC 전개 용매와 open column의 이동상을 반드시 같은 조성으로 할 필요는

없습니다.

2가지 용매로 gradient 방식으로 분리도 하지만 2종 또는 3종 혼합 용매로

분리 하기도 합니다.

어떤 resin을 open column에 사용할 것인가요?

올챙이소순굉  |  2019.10.08   

빠른 답변 감사드립니다.

먼저 open column시 resin은 silica gel입니다.

 

제가 알고 있는 개념은 TLC로 용매 조건을 잡으면( 예를 들어 MeOH : EtOAc = 2 : 3) 해당 용매 조건이 open column의 용매 gradient에 들어가게끔 설정하는 것 아닌가요? 많이 부족합니다ㅠㅠ

 

그럼 TLC와 open column의 용매 조성이 일치하지 않아도 된다면

TLC에서 잡은 조건의 용매의 극성에 따라 open column시 용매 조성의 PI값만 고려하면 된다는 말씀이신가요?

 

답변 부탁드립니다. 감사합니다:)

대왕개구리SPEED  |  2019.10.08   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

TLC 용매와 silica column 이동상이 동일한 경우도 있고 차이가 나는

경우도 있습니다.

어떤 용매를 사용하든 사용 용매의 평균 polarity를 동일하게 맞추면 됩니다.

silica column에서 이동상 gradient는 하지 않고 혼합 극성으로 분리해야

합니다.

예로 MeOH : EtOAc = 2 : 3으로 이동상을 사용하는 경우 두 용매를 혼합 후

단일 극성으로 사용합니다.

올챙이소순굉  |  2019.10.12   

감사합니다 :)

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