IHC 실험하다가 background 떄문에 질문드립니다.

일반적인 protocol로 진행중이고, 

blcoking, 1st antibody, 2nd antibody, ABC, DAB 

매 step마다 1x PBS 5min 씩 2번 washing 을 하는데요.

Dehydration다하고 mounting 할때보면  사진에서 처럼 

주변에 얼룩이 생김이나 잘 안보일수도있는데 연한 갈색으로요.

문제가 뭘까요..

전 실험실에서 진행할때는 문제없이 진행했엇거든요.

실험실 옮기고 차이라고 하면 ABC step추가 뿐인데.

IHC 고수님들 도움 요청드립니다.