실험Q&A를 통해 여러분의 지식을 나누어 주세요. 답변을 등록하시려면 로그인 해주세요.
본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
indentification용 universal primer는 문제가 발생할 가능성 낮습니다.
동일 조건으로 처음에 증폭이 잘되다가 증폭 양이 줄어들면 template 양이
줄어 들었든지 아니면 효소의 활성이 줄었든지 2가지 가능성이 가장 높습니다.
premixed PCR 반응액을 사용하면 다른 시료도 똑같은 증상이 나타날 건데
다른것은 정상적으로 증폭된다면 효소 문제 보다는 template 양의 문제일것
같습니다.
template양을 항상 일정한 ng으로 PCR하나요?
-
레벨6
Applied_Microbe
(과기인)
-
20.10.23 14:33
50ng/ul 이상으로 유지하고 있습니다.
template DNA는 총 vulume 20ul로 잡고 2ul 넣습니다.
primer 10pmole forward reverse 각각 1ul 넣고 있습니다.
template 농도가 50ng/ul 이상이고 2ul를 사용한다면 template를 줄이세요.
일반 PCR에서 template 농도는 10ng/tube 이하로 사용하세요.
최소 2^30 배 이상 증폭을 하기 때문에 많이 넣으면 반응만 저해 될뿐
PCR 반응에서 좋은 점은 없습니다.
-
레벨6
Applied_Microbe
(과기인)
-
20.10.23 18:09
답변 감사드립니다