[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
마크로젠
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
미국 박사 유학 생존기
전체보기 안전점검 LABox
 전체 > Plant Biology > Plant Tissue Culture
조회 1937  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 1/2MS 배지 pH가 너무 낮아져요!
올챙이실험실뵹아리(과기인)  | 2020.12.08 21:53

현재 8개월 동안 계대배양해온 형질전환체가 모두 죽었습니다ㅠㅠㅠ

 

배지를 교반기 위에서 1/2MS, 3% sucrose, 그리고 0.3% gelrite 농도에 맞게 성분을 첨가한 뒤에 pH 측정기로 5.8까지 맞추었습니다. 

오토클레이브를 한 뒤 petri dish로 분주 후 소량 남은 고형화되기 이전의 배지를 리트머스 종이에 올려보니 5.2~5.6 사이로 보여집니다... 고형화된 배지위에 리트머스 종이를 올려보았을 때에도 5.0~5.4정도로 보였습니다. 

식물 형질전환을 하고 아그로박테리아를 제거하기위해 cefotaxime을 첨가 한 배지에서는 4.6~5.0정도로 보였습니다. 

제가 배지를 잘 못만들고 있다는 것인데 왜 그렇게 pH가 낮아지는지 이해가 되지 않습니다...

선배님들께서 알고 계신 노하우를 전수해주시면 감사하겠습니다!!

#MS medium
 
#pH
 
#tissue culture
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
꽃개구리느림보  |  2020.12.09   
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.
실험실마다 쓰는 시약이 달라서 일반화는 어렵습니다. 1/2 농도이니 pH 완충능이 약해서 다 그렇겠죠. 오토클레이브 후에 넣는 호르몬이나 첨가물질 영향도 있을 수 있고요. 배지의 pH는 오토클레이브 전후뿐 아니라 식물의 생장과장에서 이온교환으로 계속 변하기 때문에 대개는 MES를 3-5mM 또는 0.5-0.65g/L를 첨가하게 됩니다.
올챙이실험실뵹아리  |  2020.12.23   

느림보님 채택이 늦었습니다 ! 조언해주셔서 정말 감사합니다!!

답변하기
할인행사/신제품신기술 광고 검색광고
인성크로마텍 인성크로마텍
[BQC] 산화 스트레스(Oxidative Stress) 분석 / 세포 분석 / 조직 염색 키트 20% 할인 (4.28까지)
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
Poly-His tagged recombinant protein정제, NEB로 빠르고 쉽고 간단하게!
필코리아테크놀로지 필코리아테크놀로지
TissueGnostics 의 HistoQuest 는 Single cell 수준의 Image Cytometr..
마이크로젠타스 마이크로젠타스
[ExoCAS-2™] 샘플에서부터 엑소좀 까지 고농도 고순도 고회수율로 추출해주는 Exosome Isolat..
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN 한국공인대리점] TECAN Microplate reader/ IMPLEN Nanophotomet.. (4.11까지)
코람바이오텍 코람바이오텍
Antibody 할인 - Cell Signaling Technology, Santa Cruz, Protein.. (4.25까지)
최근등록   더보기 >
RNA gel 좀 봐주세요   03.29
무균시험 멤브레인필터법 사용 장비 기기 시약등 하나하나 세세하게 알려주세요   03.29
TLC 에 대하여 질문 있습니다.   03.29
mouse 약물 주입 후, 혈청분석 할 때, 오래 지나면 파라미터 의미가 없어지나요?   03.29
pcDNA3.1-PCDH10 vector 소지하고 계신분 구합니다!   03.29
MALDI TOF MS 측정 후 데이터 분석 시   03.29
western 실험시 streptavidin-HRP 사용에 관해 질문이 있습니다.   03.29
HepG2 dish에 차는 %를 잘 모르겠습니다.   03.29
Cell 수를 바꾸면 고농도보다 저농도 reagent에서 cell이 더 죽을 수 있나요??   03.28
gel %가 안 맞습니다...ㅠ, running gel 만들 때 가끔씩 발생하는 문제점   03.28
최근답변자 우수답변자
개구리기적

개구리촉촉한촉수

알Ekdrkddkwl

알나는야학부생

알김스키

대왕개구리SPEED

개구리아이이이잉

올챙이효옹

대왕개구리SPEED

꽃개구리bio

꽃개구리개그

개구리ryan

개구리Marine

개구리미맹

꽃개구리TX

개구리처음처럼

실험관련연재
세오 연재중실전 실험 프로토콜 101
세오 (필명) (Cincinnati Children’s Hospital Medical Center)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
박은총 연재마감후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
Mr.S 연재마감의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재마감실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
이제욱 연재마감생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
엘앤씨바이오 광고