셀이 젤리처럼 됬다는 게 무슨 의미죠?

"셀"이?

 

20ml 배양한 대장균을 모두 모아서 한 번에 miniprep 했다는 의미인가요?

셀양을 줄여 보세요

Cell 찌꺼기를 다운시킨 것이 젤리처럼 되었습니다.
E.coli이용했고 20ml에 키운 것을 전체 다운시켜 P1 250ul로 풀어주고, P2 250ul, N3 350ul을 넣어 invortexing하였고 10분 다운시켜주었습니다..

셀양이 많은경우 RNA에 의해 점도가 높아질수 있습니다.

셀양을 줄이세요

20ml 전체를 cell down 하신건가요?

copy number가 낮은 경우가 아니라면 plasmid miniprep을 하는데 너무 많은 cell을 사용하신 것 같습니다.

plasmid가 많이 필요하거나 copy number가 낮다면 miraprep 방법을 사용하면 좋습니다.

 

제 경험에서, 젤처럼 굳는 경우 대장균이 아니라 곰팡이 오염이었습니다. 자라는 패턴이나 garvest 한 후의 모습은 대장균이었는데 lysis도 안되고 물컹물컹해지더군요. 이것도 확인해 보세요.

저의 경우, 

Sol1 처리 이후

실수로, Sol2 와 Sol3 순서를 바꾸어 넣은 경우 원심분리 후 젤리처럼 나왔었습니다.