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질문 THP-1 cell culture 질문 ..
알qwertt(대학원생)  | 02.19 12:04

THP-1 cell 키우고 있습니다. 

media는 RPMI+10%FBS(heat-inactivation)+0.05mM 2-mercaptoethanol 사용하고 있습니다.

세포주은행에서 새로 받은지 얼마 안되었는데

제가 알기로 THP-1은 뭉치면 상태가 안좋은것으로 알고있는데 

현미경으로 보면 포도송이처럼 뭉친 애들이 많은 것 같습니다.

 

seeding은 T75에 3*10^6/20ml 로 seeding 하는데 seeding number의 문제 일까요 ? 뭉쳐서 자라는것 해결할 방법이 있나요 ? 

culture해보면 95%정도 viability 입니다.

#THP-1
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  02.19 12:27  

얼마나 뭉쳐자라는지 알수 없으나 monocyte 계열 cell이라서 크게 뭉쳐서

자라지 않습니다.

대왕개구리안재진  |  02.19 12:28  

배양 농도를 낮추시고 시딩하시고...

그리고 ATCC 같은 문서를 보면 시딩 농도와 최대 유지 농도가 있을것입니다.

세포를 초기 풀거나 셀 농도가 높아져 영양부족이 생기면 뭉치는 경향도 있습니다. 그러나 초기 시딩농도와 배양농도를 잘 유지하면서 키우시면 뭉치는 셀은 줄여 들고 예쁜 셀들이 나옵니다. 그리고 중간중간 파이펫팅을 해주면서 뭉친셀도 조금씩 풀어 주세요

근데 항생제는 넣어주시는거죠?

알qwertt  |  02.19 14:07  

네, 항생제는 넣었습니다.

시딩넘버가 높으면 뭉치기도 하나요 ? 

대왕개구리SPEED  |  02.19 14:09  

seeding 수가 많다고 뭉치지는 않습니다만 seeding 할 때 뭉쳐진 상태

아닌가요?

알qwertt  |  02.19 15:28  

seeding 할때는 다 풀어서 single cell 상태로 seeding을 하는데 하루 있다가 현미경으로 보면 뭉치더라고요 .. 

subculture할때마다 풀어서 다시 seeding 하기는 하는데 .. 

대왕개구리SPEED  |  02.19 16:33  

suspension cell이기 때문에 성장하면서 뭉쳐있을 cell interaction이 별로

없는데 이상하네요.

cell에 문제가 있는건 아닌지 모르겠네요.

알qwertt  |  02.20 18:46  

cell 상태가 안좋으면 뭉친다던데 .. 해결방법이 없을까요 ? 

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