[DEBUG-WINDOW 처리영역 보기]
즐겨찾기  |  뉴스레터  |  오늘의 정보 회원가입   로그인
BRIC홈 실험
일루미나
배너광고안내
이전
다음
스폰서배너광고 안내  배너1 배너2 배너3 배너4
실험실 새내기를 위한 안전교육
전체보기 안전점검 논문교환 LABox
 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
조회 564  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 PCR 반응이 제대로 안일어나는데 사진 좀 봐주세요
알Grooot(대학생)  | 02.19 14:24
첨부파일 파일첨부: IMG_0007.JPG (1.99 MB)
이미지 첨부파일

안녕하세요 

PCR 반응이 제대로 안일어나서 몇가지 경우의 수를 시험해보고 있습니다.

 

전기영동 사진 대로 설명드리자면

 

template gDNA는 모두 같은 샘플이고

세팅값 annealing 온도(56도/59.6도), 시간(30초/40초), extention 시간(5분/10분)

프라이머A와 B pairs 의 Tm값은 59.6~8도 정도 입니다.

래더 옆에서 부터 PCR 세팅값 다르게 8개/8개 하여

 

세팅 1

프라이머A 1,2,3,4 / 프라이머 B 1,2,3,4

세팅 2

프라이머A 1,2,3,4 / 프라이머 B 1,2,3,4

 

이렇게 보시면 됩니다.

 

세팅 1의 프라이머A 1, 3, 4가 밴드 안나온 것을 알 수 있는데요.

 

안나온 밴드들은 밑에 프라이머 밴드도 없는데

 

이런 경우는 세팅값이 달라서 인가요 아니면 primer나 template가 적게 들어가서 인가요?

 

 

 

그리고 저희가 쓰는 Taq 제조사에서 제공하는 annealing 온도 계산법이 따로 없는데, Tm 값 calculator 사용하시는 곳들 추천 부탁드립니다.

몇 군데 해보니 계산 값 차이가 크게 나네요...

#PCR
답변하기
답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  02.19 14:33  

mixture 만들 때 실수가 있은거 아닌가요?

남은 primer는 보여야 합니다.

답변하기
할인행사 광고 검색광고
하나과학 하나과학
SOCOREX 프리미엄 피펫 Special Offer (6.30까지)
코람바이오텍 코람바이오텍
2021년 Antibody 할인 이벤트: Cell Signaling Technology 외 (5.31까지)
바이오닉스 바이오닉스
[TECAN공식대리점] 봄맞이 사은이벤트 (5.1까지)
아이클루바이오 아이클루바이오
작지만 강력한 SPR biosensor, iMSPR-mini 2021년형 모델 출시 기념 프로모션! 10년.. (3.31까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
UV/Vis Spectrophotometer 구매 시 선착순 멀티 파이펫 FREE!! 놓치지 마세요~ (4.31까지)
비앤코리아 비앤코리아
RNA/DNA 정량 장비 / 라이브 세포 이미징 장비 파격행사! 선착순으로 진행됩니다 서두르세요 (3.25까지)
그린메이트바이오텍 그린메이트바이오텍
[TECAN] Microplate reader 초특가 이벤트!! 할인이 쏟아진다~ (6.31까지)
엠피바이오메디칼스코리아 엠피바이오메디칼스코리아
토양/분변/마이크로바이옴 DNA 추출키트 파격 1+1 이벤트 ! (6.30까지)
브래디 브래디
초저온라벨 등 실험실용 라벨링 솔루션 (4.27까지)
프리미엄 등록안내
최근등록   더보기 >
lithium heparin검체보관했던 혈액을EDTA검사에 이용해도 되는지   03.03
마우스 난자를 공급받을 수 있는 곳을 찾고 있습니다   03.02
백혈구 식균작용 관측실험을 설계중인데 관련 질문드립니다.   03.02
Whole-genome sequencing에서 Chromosomal/Plasmid DNA...   03.02
애기장대 키우고 있는데 곰팡이 피는 것 어떻게 처리하나요?   03.02
RNA work 할 때 plasticware washing 어떻게 하시나요?   03.02
xanthine oxidase inhibition 실험 질문입니다.   03.02
KEGG pathway 분석   03.02
L6 cell배양중입니다. contamination인지 궁금합니다.   03.02
cryosection한 mouse skin에서 eosin 염색이 잘 되지 않습니다.   03.02
최근답변자 우수답변자
대왕개구리SPEED

알개미마왕

알피자빵떡

알corming

알cyo

올챙이뽀개

대왕개구리강시

개구리bio

꽃개구리스카이

꽃개구리착한사람

꽃개구리Kozmoj

개구리유전학도^^v

개구리절대교주

개구리현직백수

개구리얕은지식

개구리쿠나비

실험관련연재
박은총 연재중후배에게 주고 싶은 면역학 노트
박은총(Duke University)
신코 연재중분석장비 이야기
분석장비 탐험가 (필명) ((주)신코)
Mr.S 연재중의학계의 Spectaculum: 임상시험
Mr. S (필명) (연세대학교)
에스프리 연재중실험을 해봅시다
에스프리 (필명)
곽민준 연재중랩노트
곽민준 (POSTECH 생명과학과)
이제욱 연재중생명과학자 기초체력 다지기
이제욱 (오송첨단의료산업진흥재단, 신약개발지원센터)
위로가기
실험 홈  |  실험FAQ  |  실험 문의 및 제안
 |  BRIC소개  |  이용안내  |  이용약관  |  개인정보처리방침  |  이메일무단수집거부
Copyright © BRIC. All rights reserved.  |  문의 member@ibric.org
트위터 트위터    페이스북 페이스북   유튜브 유튜브    RSS서비스 RSS
머크 광고