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 전체 > Cell Biology > Cell Culture
조회 4694  스크랩 인쇄하기 주소복사 트위터 공유 페이스북 공유 
질문 freezing media를 잘못 만들었어요!
실수!!  | 2009.01.06 16:36
답변있는 질문은 수정/삭제 불가(☞문의)
원래 freezing media 비율이
Media : FBS : DMSO = 5:3:2 로 보통 만드는데

media라는게 cell을 풀은 media인데..
착각하고 media를 더 첨가 했네요

결과적으로 10 : 3: 2의 비율로 넣어준건데..

혹시 이렇게 만들면 cell이 다 터지고 죽을까요?
#freezing media
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
eyedea  |  2009.01.06    
어떤 세포인지 모르겠지만,

cell이 냉동될때, 내부 크리스탈이 생기면서 죽는 것을 방지하는 목적으로
보통 5%~20% DMSO를 사용하는 것으로 알고 있습니다.

제가 사용하는 cell line은 대부분 10%를 사용하지만, 잘 살아있더군요. ^^

그보다 어떤 방식으로 얼리셨는지가 더욱 중요할 것같다는 생각이 듭니다.
바로 deep freezer에 넣으시지는 않으셨지요? ^^

실수!!  |  2009.01.06    
아이소팬탄 탱크에 넣어서
-70C에 넣어놨어요..

혹시 media의 수분이
cell결빙에 안좋은 영향을 미칠 것 같아서 걱정이네요 ㅠㅠ
eyedea  |  2009.01.06    
cryo 하신 순서를 간단히 적어 주실수 있나요? ^^

단번에 -70도로 넣으셨다면, 문제가 생길 수 있을텐데요 걱정입니다.
실수!!  |  2009.01.06    

isopentane tank에 넣어서 -70c deepfreezer에 넣어놓으면
-1도씩 떨어지는 걸로 아는데요..
그래서 다음날 액체질소로 옮기고요..

그동안 그렇게 보관했을 때는 아무 문제 없었은데
오늘은 제가 실수로 media비율을 잘못 만들어서
media가 많이 들어간게 걱정이 되서요..
eyedea  |  2009.01.06    
다른 일을 하면서 보다가 isopentane tank 부분은 skip 해서
-70 도로 그냥 직행한 줄알았습니다. 죄송합니다. ^^;;

좋은 Lab인가 보군요..
제가 있는 곳은 cryogenic tank 가 없어서
냉장실 1h-> -4 냉동실 2h-> -20 냉동실 2h -> depp freezer ON -> L N2 순서로 하고있습니다.
ㅡ,.ㅡ;;;

5~10% DMSO로도 충분한 양이라고 생각됩니다.
10% 이상 넣으셨으니 세포가 크리스탈로 인해 터져 죽는 일을 없을 것 같습니다.
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