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 전체 > Molecular Biology-DNA > PCR/RT-PCR/Q-PCR
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질문 Real-time RT-PCR 장비가 궁금합니다!
알skanrna(대학생)  | 04.06 20:22

안녕하세요.

Bio 실험에 대해 잘 모르는데 이번에 실험을 하게 되어 물어보려고 합니다.

공부해보니까 일반 PCR, real time PCR, 그리고 reverse transcription PCR (RT-PCR), 그리고 두개를 합친 real time RT-PCR 등 다양한 종류의 PCR이 있는 것 같아요. 그리고 제가 써야하는것은 "real time RT-PCR"입니다.

그런데 PCR 장비를 찾아보니 real time PCR이라고는 많이 써있는데 real time RT-PCR이라고는 주변에 하나도 없네요 ㅜㅜ reverse transcription을 지원하지 않는 장비라는 걸까요?

저희 학교에는 Roche 제조사의 LightCycler96,

Thermo Scientific 제조사의 Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR,

Thermo Scientific 제조사의 Applied Biosystems ViiA 7 Real-Time PCR, 

그리고 Bio-Rad 제조사의 CFX Connect Real-Time PCR

이렇게 있습니다. 혹시 이 중에서 "real-time RT-PCR"이 가능한 장비가 있을까요? 아니면 모두 다 RT가 빠진 그냥 real-time PCR일까요?

감사합니다 ㅜㅜ

#real time PCR
 
#RT-PCR
 
#real time RT-PCR
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답변 본 정보는 네티즌에 의해 작성된 정보로, 내용 중 중요하다고 생각되는 부분은 추가적인 사실 확인을 반드시 하시길 바랍니다.
대왕개구리SPEED  |  04.06 20:26  
채택답변: 질문자가 채택한 답변입니다.

- 일반 PCR, real time PCR, 그리고 reverse transcription PCR (RT-PCR), 그리고

두개를 합친 real time RT-PCR 등 다양한 종류의 PCR이 있는 것 같아요.

: 장비로 나누는 것이 아니라 실험 방법으로 나눈것입니다.

장비는 PCR(gradient 유무), realtime PCR 두가지가 있습니다.

realtime PCR에는 측정 가능 channel 수가 여러가지 있습니다.

진핵세포 유전자 발현을 보려면 total RNA를 분리해서 RT 반응 후

realtime PCR을 진행합니다.

따라서 real time RT-PCR이 따로 있는게 아닙니다.

RT 반응은 PCR앞단계에서 진행해 주면 됩니다.

질문에 있는 장비는 모두 사용가능합니다.

qPCR에 대하여 미리 공부를 하는 것이 좋아 보입니다.

 

알PCR  |  04.07 07:26  

RT-PCR 과 Real time PCR에 쓰고 있는 장비가 다릅니다. 한까지 장비로 할수 없습니다.

Roche 제조사의 LightCycler96,

Thermo Scientific 제조사의 Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR,

Thermo Scientific 제조사의 Applied Biosystems ViiA 7 Real-Time PCR, 

Bio-Rad 제조사의 CFX Connect Real-Time PCR

다 "Real-time PCR" 만 가능합니다. 

RT-PCR에 cDNA synthesis 할대 쓰고 있는 일반 PCR 기개 써도 됩니다.

 

LCK BD&FAS  |  04.07 09:37   

위의 보유한 장비들은 모두 Real Time PCR 장비들이 맞습니다.

- 일반 PCR : ePCR(End point PCR or Conventional PCR)

- RT PCR : Reverser Transcription PCR

- Real Time PCR : qPCR 

 로 구분 지을 수 있으며, Application 별로 결과 보는 방법이 다를 뿐 기본은 PCR 입니다.

ePCR은 PCR 산물을 전기 영동으로 확인을 하게 되며, 정성적인(On/Off) 분석만 가능합니다.

Real Time PCR은 형광물질을 이용하여 매 cycle마다 변화하는 형광양을 측정하여 결과를 확인 합니다. 전기 영동을 할 필요가 없으며, 정성적인 분석 뿐만 아니라 정량적인 분석도 가능합니다. 

정량적 분석의 대표적인 Application은 Gene Expression으로 mRNA 양을 확인 하는 방법입니다. mRNA양을 확인 하려면 mRNA를 증폭 시켜야 하는데 RNA를 in vitro에서는 정상적으로 증폭 시킬 수 없기 때문에 cDNA(complementary DNA)로 conversion 하여 사용해야 하며 이 과정을 Reverse Transcription, RT PCR 이라고 하는 겁니다.

관련하여 다른 문의 사항 있으시면 FAS@lcktech.co.kr 로 메일 주시면 답변 드리도록 하겠습니다. 

개구리Arkadis  |  04.07 13:02  

자세한 것들은 윗분들이 설명을 잘 해주셔서 팁 하나 드리자면, real time RT-PCR 관련 검색을 하시려면 RT-qPCR로 더 많이 나올겁니다.

김보현  |  04.08 17:37   

안녕하세요 

해외 Real-time RT-PCR 장비 알아보시는 것 같은데

 

국내 Real-time RT-PCR 장비는 어떠신가요

국내 장비도 성능이 좋은 제품이 많이 있습니다

bhkim@banb.co.kr

 

연락주시면 국내 장비 안내 도와드리겠습니다

 

감사합니다

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